重慶嘉安健達(dá)二代測(cè)序技術(shù)

常見(jiàn)的二代測(cè)序平臺(tái)有哪些？

二、IonTorrent系列

包括Proton/PGM等型號(hào)，其技術(shù)基于半導(dǎo)體芯片，可檢測(cè)DNA聚合反應(yīng)中釋放的氫離子，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA序列的測(cè)定，通量適中，測(cè)序速度快，適用于快速檢測(cè)和一些臨床診斷應(yīng)用，如病原體檢測(cè)等.

華大智造系列DNBSEQ-T7/T20：通量高，能夠快速完成大量樣本的測(cè)序工作，適用于大規(guī)模的基因組學(xué)研究和臨床檢測(cè)項(xiàng)目，如群體基因組測(cè)序、**基因突變檢測(cè)等.MGISEQ-2000：性能穩(wěn)定，可提供準(zhǔn)確可靠的測(cè)序數(shù)據(jù)，在轉(zhuǎn)錄組測(cè)序、全基因組甲基化測(cè)序等多種應(yīng)用場(chǎng)景中都有良好表現(xiàn).

賽納生物S100利用流式熒光發(fā)生測(cè)序化學(xué)技術(shù)和ecc糾錯(cuò)編碼測(cè)序技術(shù)，將測(cè)序精度提升至Q40，可檢出0.1%低頻突變，在bitseq簡(jiǎn)并測(cè)序模式下，**快6.5小時(shí)完成基因測(cè)序，適用于未知病原微生物等亟需快速檢測(cè)的場(chǎng)景. 一代、二代、三代測(cè)序的區(qū)別是什么？重慶嘉安健達(dá)二代測(cè)序技術(shù)

二代測(cè)序在代謝組研究中的應(yīng)用途徑①

通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序關(guān)聯(lián)代謝組

原理：轉(zhuǎn)錄組測(cè)序借助二代測(cè)序技術(shù)可以獲取細(xì)胞或組織中所有mRNA的表達(dá)信息。由于基因表達(dá)**終會(huì)影響代謝過(guò)程，mRNA轉(zhuǎn)錄水平的變化往往會(huì)導(dǎo)致后續(xù)代謝途徑中關(guān)鍵酶的表達(dá)改變，進(jìn)而影響代謝物的合成與轉(zhuǎn)化。例如，當(dāng)某個(gè)參與糖代謝途徑的關(guān)鍵酶基因轉(zhuǎn)錄上調(diào)時(shí)，對(duì)應(yīng)的酶含量可能增加，從而加速該代謝途徑的運(yùn)轉(zhuǎn)，使代謝產(chǎn)物的量也隨之發(fā)生變化。

案例：在植物抗逆研究中，對(duì)遭受干旱脅迫的植物和正常生長(zhǎng)的植物分別進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序。發(fā)現(xiàn)許多與滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)（如脯氨酸、甜菜堿等）合成相關(guān)的基因轉(zhuǎn)錄水平在干旱脅迫植株中顯著提高。再結(jié)合對(duì)植物代謝組的分析，的確檢測(cè)到脯氨酸、甜菜堿等代謝物的含量明顯增多，表明植物通過(guò)調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄來(lái)改變代謝，以適應(yīng)干旱環(huán)境。

黑龍江二代測(cè)序技術(shù)二代測(cè)序的特征是高通量，降低了測(cè)序成本的同時(shí)，還大幅提高了測(cè)序速度。

二代測(cè)序技術(shù)的一些研究進(jìn)展②植物基因組學(xué)研究領(lǐng)域：花生四倍體野生種基因組測(cè)序：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)殷冬梅教授團(tuán)隊(duì)和上海交通大學(xué)韋朝春教授團(tuán)隊(duì)聯(lián)合發(fā)布了花生四倍體野生種近乎完整基因組amon2.0版本。該研究結(jié)合ONT超長(zhǎng)讀段、二代測(cè)序和Hi-C等多種測(cè)序技術(shù)，使基因組的連續(xù)性、完整性和準(zhǔn)確性都得到了顯著提高，為花生的遺傳馴化和分子育種提供了重要的基因組數(shù)據(jù)信息資源。長(zhǎng)雄野生稻基因組解析：中科院昆明動(dòng)物所王文研究組與云南省農(nóng)科院糧食作物研究所胡鳳益研究組等中外機(jī)構(gòu)合作，利用二代測(cè)序技術(shù)成功組裝出高質(zhì)量的長(zhǎng)雄野生稻基因組，并對(duì)其與近緣物種的分歧時(shí)間、基因的收縮擴(kuò)張等進(jìn)行了分析，還鑒定出一批可能影響地下莖以及自交不親和性狀的候選基因及代謝途徑，為解析相關(guān)分子機(jī)制提供了重要線索。

WES測(cè)序

局限性

檢測(cè)范圍有限：無(wú)法檢測(cè)外顯子間區(qū)域和非編碼序列區(qū)域的變異，也不能覆蓋整個(gè)基因.

對(duì)某些變異不敏感：在檢測(cè)重復(fù)序列擴(kuò)增、G-富集區(qū)域和GC含量高的區(qū)域等變異時(shí)，效果可能不佳.

應(yīng)用

遺傳病診斷與研究：可診斷病因不明的遺傳病，明確致病突變，還能用于產(chǎn)前診斷，輔助家庭生育決策.

**研究：助力**基因突變檢測(cè)，為**的早期診斷、***方案制定及預(yù)后評(píng)估提供依據(jù).

藥物基因組學(xué)：檢測(cè)結(jié)果可指導(dǎo)醫(yī)生選擇靶向藥物或進(jìn)行基因***，實(shí)現(xiàn)精細(xì)醫(yī)療. 二代測(cè)序的使用場(chǎng)景都有哪些？

二代測(cè)序的建庫(kù)步驟②二、片段化處理物理方法：超聲破碎是常用的物理片段化方法。它通過(guò)超聲波的高頻振動(dòng)將核酸分子打斷成合適大小的片段。例如，在一些文庫(kù)構(gòu)建中，將DNA樣本置于超聲破碎儀中，通過(guò)調(diào)整超聲功率和時(shí)間，可以將DNA片段化到幾百堿基對(duì)（bp）的長(zhǎng)度范圍，一般在150-300bp左右，這符合二代測(cè)序的讀長(zhǎng)要求。超聲破碎的優(yōu)點(diǎn)是片段大小比較均勻，但操作需要優(yōu)化超聲參數(shù)，否則可能會(huì)導(dǎo)致過(guò)度破碎或片段大小不一致。酶切方法：利用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行片段化。限制性內(nèi)切酶能夠識(shí)別特定的DNA序列，并在這些序列處切割DNA。例如，用EcoRⅠ酶可以識(shí)別GAATTC序列并進(jìn)行切割。通過(guò)選擇合適的限制性內(nèi)切酶組合，可以將DNA切割成期望大小的片段。不過(guò)，這種方法的局限性在于酶切位點(diǎn)的限制，可能無(wú)法獲得理想的片段大小分布，而且可能會(huì)引入酶切偏好性。二代測(cè)序廣泛應(yīng)用于個(gè)性化醫(yī)學(xué)。蘇州哪里有二代測(cè)序

二代測(cè)序的優(yōu)勢(shì)是高準(zhǔn)確性。重慶嘉安健達(dá)二代測(cè)序技術(shù)

二代測(cè)序在代謝組研究中的應(yīng)用途徑②

調(diào)控元件測(cè)序輔助代謝組分析

原理：除了對(duì)編碼基因的轉(zhuǎn)錄組測(cè)序外，二代測(cè)序還可用于分析非編碼RNA（如miRNA、lncRNA等）以及基因的調(diào)控元件（如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子等）。miRNA可以通過(guò)與靶mRNA結(jié)合抑制其翻譯或促使其降解，間接調(diào)控代謝相關(guān)基因的表達(dá)，從而影響代謝組的構(gòu)成。啟動(dòng)子等調(diào)控元件的甲基化狀態(tài)等表觀遺傳變化也會(huì)改變基因的轉(zhuǎn)錄活性，**終對(duì)代謝過(guò)程產(chǎn)生作用。

案例：在**代謝研究中，通過(guò)對(duì)**組織和正常組織的miRNA測(cè)序，發(fā)現(xiàn)特定miRNA在**組織中表達(dá)異常。進(jìn)一步研究表明該miRNA可靶向調(diào)控參與葡萄糖代謝的關(guān)鍵酶基因，使得腫瘤細(xì)胞中葡萄糖代謝模式發(fā)生改變，代謝組分析也證實(shí)了相關(guān)糖類代謝物的異常積累，為揭示腫瘤細(xì)胞獨(dú)特的代謝特征提供了線索。 重慶嘉安健達(dá)二代測(cè)序技術(shù)