遼寧嘉安健達二代測序應(yīng)用

來源: 發(fā)布時間:2025-01-18

什么是chip-seq?

Chip-seq即染色質(zhì)免疫共沉淀測序(ChromatinImmunoprecipitationSequencing),是一種結(jié)合染色質(zhì)免疫共沉淀(ChIP)技術(shù)與高通量測序(NGS)的分子生物學(xué)技術(shù),可在全基因組范圍內(nèi)檢測與組蛋白、轉(zhuǎn)錄因子等相互作用的DNA區(qū)段。以下是具體介紹:

技術(shù)原理

染色質(zhì)固定:使用甲醛等試劑交聯(lián)細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)和DNA,使蛋白-DNA相互作用的復(fù)合物固定,從而保留它們在體內(nèi)的結(jié)合狀態(tài)。

染色質(zhì)片段化:采用超聲波或酶切的方法將染色質(zhì)剪切成適合測序的小片段,通常片段大小在200-500bp范圍內(nèi)。免疫共沉淀:利用特異性抗體富集與目標蛋白結(jié)合的DNA片段,通過抗體與目標蛋白的特異性結(jié)合,將蛋白-DNA復(fù)合物沉淀下來。

交聯(lián)逆轉(zhuǎn)與DNA提?。和ㄟ^加熱或化學(xué)方法逆轉(zhuǎn)蛋白-DNA交聯(lián),使DNA與蛋白質(zhì)分離,然后提取并純化DNA。

文庫構(gòu)建與高通量測序:對純化的DNA片段進行測序文庫制備,在DNA片段兩端連接特定的寡核苷酸接頭,隨后在高通量測序平臺上進行測序。

數(shù)據(jù)分析:包括序列比對,將測序讀段映射到參考基因組;峰值調(diào)用,識別蛋白質(zhì)結(jié)合的富集區(qū)域;功能注釋,分析峰的位置和功能等。 二代測序的流程有哪些?遼寧嘉安健達二代測序應(yīng)用

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二代測序用于蛋白組測序的發(fā)展前景?

多組學(xué)整合更緊密:未來二代測序與蛋白組測序會和其他組學(xué)技術(shù)(如代謝組學(xué)、表觀基因組學(xué)等)進一步深度整合,從多個層面***地解析生命活動分子機制,例如在疾病研究中,綜合分析基因轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)表達及代謝產(chǎn)物變化等,為疾病的早期診斷、精細***提供更完善的依據(jù)。

技術(shù)優(yōu)化提升準確性:一方面,二代測序技術(shù)自身會不斷改進,提高測序的準確性、降低錯誤率,并且在通量上可能進一步提升;另一方面,和蛋白組測序銜接的相關(guān)流程和分析方法也會不斷優(yōu)化,從而更精細地從轉(zhuǎn)錄組信息轉(zhuǎn)化為可靠的蛋白組信息,推動蛋白組測序領(lǐng)域的發(fā)展。 江西嘉安健達二代測序原理單細胞測序?qū)儆诙鷾y序嗎?

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常見的二代測序類型①

全基因組測序(WGS):對生物體整個基因組進行測序,涵蓋所有基因、非編碼區(qū)域、調(diào)控區(qū)域等。能***檢測基因組變異,但數(shù)據(jù)量和成本較高,適用于復(fù)雜疾病研究、物種進化分析等.

全外顯子組測序(WES):針對基因組中全部外顯子區(qū)域測序,可快速鑒定基因突變,性價比高,常用于遺傳病診斷、**基因突變檢測等,助力發(fā)現(xiàn)致病基因和潛在***靶點.

轉(zhuǎn)錄組測序(RNA-Seq):對特定細胞或組織在特定狀態(tài)下的 RNA 轉(zhuǎn)錄情況測序,包括 mRNA、lncRNA、miRNA 等,可檢測基因表達水平、剪接變異、可變剪接等信息,用于基因表達調(diào)控研究、疾病標志物篩選、藥物研發(fā)等.

轉(zhuǎn)錄組測序的主要測序?qū)ο蟀ㄒ韵聨最悾ㄏ拢?

長鏈非編碼RNA(lncRNA):lncRNA長度較長,具有多種生物學(xué)功能,如參與基因表達調(diào)控、染色質(zhì)修飾、轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)等。轉(zhuǎn)錄組測序有助于發(fā)現(xiàn)和鑒定新的lncRNA,并分析其在不同組織和細胞中的表達模式及功能機制。其他RNA

環(huán)狀RNA(circRNA):circRNA是一類特殊的非編碼RNA,呈環(huán)狀結(jié)構(gòu),具有穩(wěn)定性高、不易被降解等特點。轉(zhuǎn)錄組測序可以檢測circRNA的存在和表達水平,研究其在基因表達調(diào)控、細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及疾病發(fā)***展中的作用。

小核RNA(snRNA)和小核仁RNA(snoRNA):snRNA主要參與真核生物mRNA的加工過程,如mRNA的剪接等;snoRNA則主要參與rRNA的加工和修飾。轉(zhuǎn)錄組測序可以對它們的表達和功能進行研究,以揭示其在細胞內(nèi)的作用機制。 二代測序廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)研發(fā)。

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二代測序用于蛋白組測序的優(yōu)勢

高通量:二代測序本身具有一次性處理大量核酸序列的能力,在結(jié)合蛋白組測序相關(guān)應(yīng)用時,能快速獲取大規(guī)模的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),進而可以對眾多潛在的蛋白質(zhì)信息進行分析推斷,相比傳統(tǒng)逐個蛋白分析的方法,**提高了效率,能夠在短時間內(nèi)覆蓋更***的蛋白組范圍。

能發(fā)現(xiàn)新蛋白及異構(gòu)體:借助對轉(zhuǎn)錄組的深度測序,可以挖掘出一些新的轉(zhuǎn)錄本,這些轉(zhuǎn)錄本有可能翻譯出全新的蛋白質(zhì)或者產(chǎn)生蛋白質(zhì)異構(gòu)體,有助于拓展對蛋白組復(fù)雜程度的認知,發(fā)現(xiàn)那些以往可能被遺漏的蛋白質(zhì)種類和形式。 二代測序的使用場景都有哪些?江西哪里有二代測序運用

二代測序?qū)嶒炁c測序原理是什么?遼寧嘉安健達二代測序應(yīng)用

不同二代測序技術(shù)平臺的速度Illumina測序平臺:這是目前市場上應(yīng)用較為***的二代測序平臺之一,其測序速度較快。例如IlluminaNovaSeq系列,一次運行可以在1-3天內(nèi)產(chǎn)生大量的數(shù)據(jù),通量可達數(shù)億甚至數(shù)十億條讀長,能夠滿足大規(guī)?;蚪M學(xué)研究和臨床檢測的需求。Roche454測序平臺:Roche454測序系統(tǒng)的測序速度也較快,其特點是測序片段比較長,高質(zhì)量的讀長能達到400bp左右,一次運行可以在24小時左右完成對一定數(shù)量樣本的測序。BGISEQ系列:華大智造的BGISEQ系列測序儀在速度上也有出色表現(xiàn),如全球二代測序速度**快設(shè)備E25量產(chǎn),為快速測序提供了有力支持遼寧嘉安健達二代測序應(yīng)用

標簽: 二代測序