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激光掃描共聚焦顯微鏡是目前生物學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用和圖像分辨率比較高的實(shí)驗(yàn)儀器它是在熒光顯微鏡成像基礎(chǔ)上加裝了激光掃描裝置,利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,使用紫外或可見光激發(fā)熒光探針,從而得到細(xì)胞或**內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像 已成為形態(tài)學(xué)、分子細(xì)胞生物學(xué)、材料科學(xué)等諸多領(lǐng)域中有力的研究工具。激光掃描共聚焦顯微鏡主要由 1、光學(xué)顯微鏡部分 2、激光發(fā)射器 本院的LSCM使用三個(gè)激光器氬離子激光器 488nm 氦氖綠激光器543nm 氦氖紅激光器 633nm 這三個(gè)激光器可做三通道熒光標(biāo)記 可使用絕大多數(shù)常見的綠、紅或遠(yuǎn)紅外激發(fā) 3、掃描裝置 檢測(cè)***光柵、分光鏡、發(fā)射熒光分色器等 4、光檢測(cè)器 高靈敏度的光電倍增管(PMT) 電壓越高 則光信號(hào)轉(zhuǎn)換成的電信號(hào)越強(qiáng) 可將熒光圖像的強(qiáng)度按照0~255分級(jí)顯示 5、計(jì)算機(jī)系統(tǒng)(包括數(shù)據(jù)采集、處理、轉(zhuǎn)換、應(yīng)用軟件) 6、圖像輸出設(shè)備六部分組成。 雙光子顯微鏡是怎么操作的?吉林生物顯微鏡廠家
1、動(dòng)態(tài)連續(xù)掃描及三維圖像重組
LSCM可以對(duì)對(duì)活細(xì)胞或細(xì)胞切片樣品的不同層面進(jìn)行連續(xù)
逐層掃描, 來(lái)獲得各個(gè)層面的圖像 即所謂的“無(wú)損傷的光學(xué)切片”。
LSCM掃描的每個(gè)層面之間的間距可以達(dá)到0.1um甚至更小。獲得的圖像
通過(guò)計(jì)算機(jī)重組 可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系
統(tǒng)的三維圖像 與普通光學(xué)顯微鏡獲得的圖像相比 LSCM所得的重組
三維圖像清晰度高、立體感強(qiáng), 可通過(guò)計(jì)算機(jī)軟件對(duì)細(xì)胞內(nèi)所研究的結(jié)
構(gòu)進(jìn)行各種測(cè)量 對(duì)細(xì)胞內(nèi)的空間結(jié)構(gòu)和某些物質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位方面
的研究中有應(yīng)用。
2、同時(shí)多種物質(zhì)標(biāo)記
利用LSCM 通過(guò)對(duì)膜上、胞漿內(nèi)多種物質(zhì)的熒光標(biāo)記 可以實(shí)現(xiàn)
在同一樣品上同時(shí)進(jìn)行多重物質(zhì)的觀察 比如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈉、鈣、鎂等
離子濃度的比率及動(dòng)態(tài)變化。 西藏顯微鏡質(zhì)量推薦激光掃描共聚焦顯微鏡的規(guī)格。
首先我們從放大的倍數(shù)分析, 國(guó)產(chǎn)的金相顯微鏡放大倍數(shù)標(biāo)的都是很大的, 有的都是幾千倍,
但是實(shí)際效果卻大不大這么大的倍數(shù), 實(shí)際上的倍數(shù)頂多也就幾百倍, 然而進(jìn)口的放大倍數(shù)
標(biāo)的只有一千倍, 但是誤差卻很少, 這是一點(diǎn), 另外我們從光學(xué)系統(tǒng)方面說(shuō), 光學(xué)系統(tǒng)是金
相顯微鏡的心臟, 國(guó)產(chǎn)有鏡片上的鍍膜標(biāo)準(zhǔn)是達(dá)不到的, 所以導(dǎo)致質(zhì)量上也不達(dá)標(biāo), 和國(guó)際
標(biāo)準(zhǔn)相差很遠(yuǎn), 國(guó)產(chǎn)的一般都是有限的光學(xué)系統(tǒng), 進(jìn)口的卻是無(wú)限的光學(xué)系統(tǒng); 從校正能力
上來(lái)分析, 國(guó)產(chǎn)金相顯微鏡也是無(wú)法比擬的, 分辨的能力懸殊也很大; 從使用壽命上來(lái)分析,
能夠長(zhǎng)時(shí)間維持高清圖像質(zhì)量的只有進(jìn)口金相顯微鏡, 國(guó)產(chǎn)的使用壽命和進(jìn)口的使用壽命相
差也很大; 售后服務(wù)方面進(jìn)口的金相顯微鏡要比國(guó)產(chǎn)的好, 就像進(jìn)口的奔馳汽車, 奔馳公司
可以開著飛機(jī)去給你免費(fèi)維修, 當(dāng)然光學(xué)產(chǎn)品沒(méi)有那么夸張, 但是服務(wù)態(tài)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國(guó)產(chǎn)金
相顯微鏡。
2. 為什么說(shuō)雙光子顯微鏡一般不需要配備紫外激發(fā)激光器?
雙光子顯微鏡技術(shù)是建立在雙光子激發(fā)效應(yīng)的基礎(chǔ)上的一種熒光激發(fā)技術(shù): 熒光染料分子可以同時(shí)吸收低
能量的兩個(gè)光子而被激發(fā)(兩個(gè)光子到達(dá)熒光分子的時(shí)間間隔小于 1 飛秒) , 其激發(fā)效果可以等同于吸收
一個(gè) 1/2 波長(zhǎng)的高能量光子。 例如, 吸收兩個(gè)紅色波長(zhǎng)的光子, 相當(dāng)于一個(gè)吸收紫外的分子。 長(zhǎng)波長(zhǎng)的光
子不易被細(xì)胞吸收, 因此對(duì)活細(xì)胞的光毒性減少, 也降低了光漂白。 這樣即起到紫外激發(fā)的功能, 又避免
了紫外光線對(duì)樣品的傷害。 雙光子顯微鏡哪個(gè)牌子的好?
在傳統(tǒng)熒光顯微鏡中, 一個(gè)熒光團(tuán)吸收一個(gè)光子, 該光子能量對(duì)應(yīng)于
熒光團(tuán)基態(tài)和激發(fā)態(tài)能量之差。 通過(guò)一個(gè)較短壽命的虛態(tài), 也可以通過(guò)同
時(shí)吸收兩個(gè)較低能量(即更高的波長(zhǎng)) 的光子激發(fā)熒光。 例如, 吸收兩個(gè)
紅色波長(zhǎng)的光子, 可以激發(fā)一個(gè)吸收紫外的分子。 雙光子激發(fā)是一個(gè)非線
性過(guò)程, 對(duì)激發(fā)光強(qiáng)度有平方依賴關(guān)系。
使用單激發(fā)光源, 雙光子具有相同的波長(zhǎng), 該技術(shù)被稱為雙光子激發(fā)
熒光顯微術(shù)。 如果兩個(gè)光子具有不同的波長(zhǎng), 就稱作雙色激發(fā)熒光顯微術(shù)。
雙光子吸收幾率依賴于兩個(gè)入射光子在空間和時(shí)間上的重合程度(兩
個(gè)光子必須在 10-18 秒內(nèi)到達(dá))。 雙光子吸收截面很小, 對(duì)若丹明 B 一般
為 10-50cm4 s photon-1 molecule-1, 這樣, 只有在具有很大光子流量
的區(qū)域的熒光團(tuán)才會(huì)被激發(fā)。 鈦寶石激光器等鎖模的, 高峰值功率激光可
以為雙光子激發(fā)提供足夠的強(qiáng)度。 激光掃描共聚焦顯微鏡的種類有哪些?湖南掃描探針顯微鏡生產(chǎn)廠家哪家好
在哪里可以買到雙光子顯微鏡?吉林生物顯微鏡廠家
電子顯微鏡的分辨率達(dá)0.1nm左右.因此亞微米數(shù)量級(jí)樣品的觀察一直主要靠電子顯微鏡.但電子顯微鏡結(jié)構(gòu)復(fù)雜,且使用電子顯微鏡需要將樣品置于真空環(huán)境,這樣環(huán)境會(huì)迅速破壞必須在潮濕化學(xué)狀態(tài)上才能維持的全部生物活性,而且樣品容易受到高能電子束引起的輻射損傷.與之相比,光學(xué)顯微鏡具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,操作方便,直觀,可以在自然狀態(tài)下觀察樣品,且對(duì)樣品無(wú)任何損傷等優(yōu)越性.但經(jīng)典光學(xué)顯微鏡受衍射的限制,分辨率不高,不能適應(yīng)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展.因而研究超**辨率光學(xué)顯微鏡具有重要意義. 吉林生物顯微鏡廠家
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