、 流式微球技術(shù)的原理
與傳統(tǒng)的基因芯片和固相蛋白芯片不同。 CBA技術(shù)由
許多不同編號的球形基質(zhì)構(gòu)成, 具有相同縮號的球形基質(zhì)
上偶連有相同的探針分子, 相當于固相芯片上面的一個
一個CBA檢測系統(tǒng). 利用這個系統(tǒng), 可以對同一個樣品中
的多個不同的分子同時進行檢測. 目前商業(yè)化的球形基質(zhì)
多數(shù)以聚苯乙烯為材料, 表面進行了一系列的修飾, 用來偶
連探針分子。
的球形基質(zhì)都有一個獨特的編號。 在球形基質(zhì)的制造
過程當中。 摻人了兩種不同的熒光素分子, 根據(jù)這兩種分類
熒光的比例不同, 可以把球形基質(zhì)編為不同的編號. 這些
不同的球形基質(zhì)可以標記上不同的探針分子, 即可對樣本
中不同的目的分子同時進行檢測。 由于球形基質(zhì)上兩種熒
光素分子的含量不同, 它們在m1/孔. 2點圖上所處的位
置就各不相同, 據(jù)此就可以給每個球形基質(zhì)一個特定的編
號, 來區(qū)分它們.
聚合物微球
聚合物微球是一般指具有圓球形狀且粒徑在數(shù)
十納米到數(shù)百納米尺度范圍內(nèi)的聚合物粒子。
迄今為止合成微球的材料已有數(shù)十種, 從可降
解性上可分為生物降解微球和不可生物降解微球。
可生物降解微球因可被人體重新吸收, 釋放速度的
穩(wěn)定和可控性以及更適宜不穩(wěn)定 的釋放, 而被
廣泛應(yīng)用于 傳輸系統(tǒng)。
淀粉微球是天然淀粉的一種人造衍生物, 是淀粉
在引發(fā)劑作用下, 羥基與交聯(lián)劑進行適度交聯(lián)后制得
的一種微球, 屬于生物降解微球。
淀粉微球主要有中性微球和離子微球兩類。 中性
微球主要包括丙烯?;矸畚⑶?、 丙烯酯化淀粉微球、
交聯(lián)淀粉微球等; 離子淀粉微球主要包括陽離子淀粉
微球和陰離子淀粉微球兩種 。
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1) 問題: 蛋白無法吸附到微球上。
解決方法: 加入更多的蛋白; 去除微球中的表面活性劑, 釋放其占據(jù)的蛋白結(jié)合位點; 引入
中間物, 將微球與蛋白相連; 改變緩沖液。
2) 問題: 標記時加入了大量的蛋白, 但是仍然無活性。
解決方法: 改變蛋白加入量, 從而改變蛋白與微球結(jié)合的空間構(gòu)象; 使用表位稀釋物, 占據(jù)
微球上的部分蛋白結(jié)合位點, 防止蛋白靠的太近。
3) 問題: 清洗去除未吸附蛋白后, 微球聚集。
解決方法: 增加蛋白標記量或封閉劑的用量, 防止有空余位點;
4) 問題: 標記后開始活性很好, 儲存一段時間后, 活性降低。
解決方法: 降低儲存溫度到 2~8 度; 降低儲存液中的封閉劑濃度, 防止抗體被替換; 確認
儲存液中無能與抗體競爭的雜質(zhì), 防止長時間取代抗體。
2.
蛋白溶液應(yīng)該在快速的攪拌下, 快速加入到微球懸液中。 小體積的話, 可以進行斡旋混合。 當大體積
時, 應(yīng)該在燒瓶或燒杯里攪拌劇烈些, 蛋白溶液快速加入到漩渦中間。
3.
移除未結(jié)合的化合物或蛋白, 如果顆粒直徑大于 0. 2um, 可以通過離心的方法, 微球可以重新懸浮,
然后攪拌, 接著溫和的超聲分散。 離心力不宜過大, 這樣會導致微球不易分散。 也可以用超濾或透析來純化。
當用超濾時, 濾膜孔徑應(yīng)該足夠大, 使得游離的蛋白能自由的通過濾膜。 用于清洗微球的 buffer 應(yīng)該和
storage buffer 一樣。 用于清洗的 buffer 的任何緩沖液成分及 pH 的改變, 都會引起蛋白的脫落。 乳膠微球的工作原理是什么?
聚合物微球調(diào)驅(qū)技術(shù)
? 聚合物微球是一種新型堵水調(diào)驅(qū)材料。 該材料主要包括吸
水樹脂和活性高分子溶膠, 吸水樹脂具有膨脹倍數(shù)大、 韌
性好和有效延遲膨脹性能等優(yōu)點, 能隨注入水運移到地層
深部, 對地層大孔道形成**度封堵, 使出水量大幅度下
降甚至接近零。
? 活性高分子溶膠為核殼型結(jié)構(gòu), 外部為陰離子型, 保證在
水中穩(wěn)定存在, 并能防止在地層吸附。 微球高溫水化膨脹
后, 內(nèi)部的大量陽離子材料膨脹程度比外部材料大, 因此
陽離子材料外露, 與相鄰的微球外殼發(fā)生交映, 從而實現(xiàn)
逐級、 逐層深部調(diào)驅(qū), **終實現(xiàn)水降油升的效果。 乳膠微球品牌有很多,你如何選擇?湖南熒光微球推薦貨源
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2 有機熒光微球的制備技術(shù)
2. 1 物理化學接枝法
將有機熒光分子通過物理化學方法接枝到聚合物微球表面是制備有機熒光微球的
一種較直接的方法, 其優(yōu)點是制備過程簡單方便且不會影響聚合物微球的形態(tài), 單分
散性; 通過控制熒光素的投料量可以控制微球的熒光強度. 其缺點是微球表面的官能團
往往較少, 所以很難制備具有高熒光強度的微球.
采用無皂及種子無皂乳液聚合方法制備了 200~800 nm 粒徑的四個不同
尺寸的單分散聚合物微球, 當單體滴速為 1 mL/h 時, 沒有二次成核現(xiàn)象的發(fā)生。 然后
通過擴散合成法在微球表面修飾樹枝狀聚酰胺。 通過微球表面的氨基與四甲基異
硫氰酸羅丹明(TRITC) 鍵合后制備了四種不同尺寸的熒光微球。 河北進口微球
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