并交替通過(guò)入射狹縫進(jìn)入單色器中,經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上,色散并通過(guò)出射狹縫之后,被濾光片濾除高級(jí)次光譜,再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測(cè)器的接收面上。探測(cè)器將上述交變的信號(hào)轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號(hào),經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后,轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位,計(jì)算機(jī)處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。JC-HW30A雙光束紅外分光光度計(jì)二、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的概述不同:1、紫外分光光度計(jì)的概述:根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是比較大吸收波長(zhǎng)λmax和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很***的應(yīng)用。在國(guó)內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的比較大吸收波長(zhǎng)和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的手段。2、紅外分光光度計(jì)的概述:由光源發(fā)出的光,被分為能量均等對(duì)稱的兩束,一束為樣品光通過(guò)樣品,另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過(guò)樣品室進(jìn)入光度計(jì)后,被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制,形成交變信號(hào)。三、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)和紅外分光光度計(jì)的應(yīng)用不同:1、紫外分光光度計(jì)的應(yīng)用:將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)。紫外分光光度計(jì)的光譜是帶狀光譜。河北光譜儀分光光度計(jì)教程
原子熒光光度計(jì)具有原子吸收光譜和原子發(fā)射光譜兩種技術(shù)優(yōu)勢(shì),并克服現(xiàn)有分析技術(shù)的不足,是一種優(yōu)良的痕量分析儀器。其原理是利用硼氫化鉀或硼氫化鈉作為還原劑,將樣品溶液中的待分析元素還原為揮發(fā)性共價(jià)氣態(tài)氫化物,然后借助載氣將其導(dǎo)入原子化器進(jìn)行原子化而形成基態(tài)原子。基態(tài)原子吸收光源的能量而變成激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)原子在去活化過(guò)程中將吸收的能量以熒光的形式釋放出來(lái),此熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與樣品中待測(cè)元素的含量成線性關(guān)系,因此通過(guò)測(cè)量熒光強(qiáng)度就可以確定樣品中被測(cè)元素的含量。海南國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)推薦分光光度計(jì)從分光元件來(lái)講可分為棱鏡式和光柵式兩種,也有光柵加棱鏡的分光光度計(jì)。
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理,利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見(jiàn)光譜區(qū)的輻射吸收來(lái)進(jìn)行分析的一種分析儀器。主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成。其工作原理為分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。本文介紹的是日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用方法。日立U-3010型號(hào)紫外分光光度計(jì)的使用1.開(kāi)電源,先開(kāi)U-3010電源,再啟動(dòng)電腦2.點(diǎn)擊桌面上UV,啟動(dòng)程序3.點(diǎn)擊method窗口,將會(huì)出現(xiàn)GeneralQuantitationinstrumentMonitorReport五個(gè)對(duì)話框,如下圖所示:4.設(shè)置(1)General對(duì)話框;(2)Quantitation對(duì)話框,如果測(cè)波長(zhǎng)選擇wavelength,數(shù)量可選多個(gè),比如測(cè)定:260nm,280nm,230nm,則選擇3個(gè);如圖所示:(3)Instrument對(duì)話框,將你要測(cè)定的波長(zhǎng)值依次輸入框內(nèi);(4)設(shè)置好后,點(diǎn)確定鍵5.放入空白對(duì)照。
點(diǎn)擊上方藍(lán)字關(guān)注“公眾號(hào)”分光光度計(jì)分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)核酸或者蛋白樣品濃度**常用的工具之一。儀器使用頻繁,但甚少見(jiàn)到有人維護(hù)。其實(shí),保持分光光度計(jì)清潔、無(wú)污染是成功操作的關(guān)鍵。清潔儀器我們應(yīng)該用蘸有中性清潔劑的軟布擦拭分光光度計(jì)的表面。刺激性的清潔劑可能會(huì)損壞儀器表面。你也可以清潔比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或異丙醇的無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。這可防止液體進(jìn)入內(nèi)部。如果你必須要用水清潔,那么可用蘸有乙醇或異丙醇的棉簽來(lái)加速干燥。比色皿插槽的蓋子也可以清潔,但不是泡在清潔劑中。如有必要,拆下蓋子,用蘸有溫和清潔劑的軟布或無(wú)絨棉簽來(lái)清潔。此外,平時(shí)不使用時(shí),應(yīng)蓋上比色皿插槽的蓋子,以免灰塵或其他污染物落入。消毒和凈化如果分光光度計(jì)被微生物所污染,那么可采用下列步驟進(jìn)行消毒和凈化。首先,利用溫和的清潔劑來(lái)清潔設(shè)備。然后,用蘸有消毒劑(通常是酒精溶液)的軟布擦拭表面。如有必要,拆下并清潔比色皿插槽。檢查組件維護(hù)的另一方面在于檢查分光光度計(jì)的光度準(zhǔn)確性。Eppendorf提供了一個(gè)濾光片系統(tǒng)(BioSpectrometerreferencefilterkit),以評(píng)估光度準(zhǔn)確性和系統(tǒng)的波長(zhǎng)誤差。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為分光光度計(jì)的光源。
在測(cè)量準(zhǔn)確性和精確度時(shí),將空白濾光片和樣品濾光片放入插槽內(nèi)。將測(cè)得的輸出吸光度值與允許值范圍比較。在檢查波長(zhǎng)時(shí),測(cè)定三個(gè)測(cè)試濾光片在對(duì)應(yīng)波長(zhǎng)(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以確定每個(gè)波長(zhǎng)的變異系數(shù)。許多分光光度計(jì),包括Eppendorf的所有儀器,都帶有一個(gè)特殊的功能——自檢。Eppendorf建議用戶至少每周運(yùn)行一次自檢,但自動(dòng)自檢的頻率可根據(jù)需要進(jìn)行設(shè)定。自檢主要檢查儀器的幾個(gè)部分。它通過(guò)測(cè)定現(xiàn)有波長(zhǎng)的隨機(jī)誤差來(lái)校驗(yàn)檢測(cè)器,通過(guò)檢查大能量、隨機(jī)誤差、基準(zhǔn)傳感器的信號(hào)和光強(qiáng)度來(lái)校驗(yàn)光源。分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)型號(hào)
紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)遠(yuǎn)離發(fā)出磁場(chǎng)、電場(chǎng)和高頻電磁波的電氣裝置。河北光譜儀分光光度計(jì)教程
由于儀器的制造和調(diào)整誤差,單色光的實(shí)際波長(zhǎng)與儀器的波長(zhǎng)讀數(shù)值間都存在一定的誤差。但是,當(dāng)吸收峰寬度較小,而且吸收峰兩側(cè)邊緣比較陡直,此時(shí)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的影響就必須引起注意。2、透射比(吸光度)準(zhǔn)確度很顯然,透射比或吸光度的誤差越大,測(cè)試結(jié)果的可信性越差,從而影響到測(cè)試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。3、雜散光雜散光是由于光學(xué)元件制造誤差以及光學(xué)和機(jī)械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光,隨著樣品濃度的增加,雜散光的影響也隨之增大,將給分析結(jié)果帶來(lái)一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強(qiáng)度和檢測(cè)器的靈敏度均明顯減弱,雜散光的影響更不能忽視。因此,雜散光的大小也是儀器性能的一項(xiàng)重要指標(biāo)。使用與維護(hù)1、若大幅度改變測(cè)試波長(zhǎng),需稍等片刻,等燈熱平衡后,重新校正“0”和“100%”點(diǎn)。然后再測(cè)量。2、指針式儀器在未接通電源時(shí),電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況,需進(jìn)行機(jī)械調(diào)零。3、比色皿使用完畢后,請(qǐng)立即用蒸餾水沖洗干凈,并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去,以防止表面光潔度被破壞,影響比色皿的透光率。4、操作人員不應(yīng)輕易動(dòng)燈泡及反光鏡燈。河北光譜儀分光光度計(jì)教程