中草藥外泌體

外泌體研究背景：胞外囊泡是從細胞膜上脫落或者由細胞分泌的具有雙層膜結構的囊泡狀小體，主要由微囊泡、凋亡小體、外泌體組成。而外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml，可攜帶核酸、蛋白質質和脂質等，存在于血液、唾液、尿液等多種體液中。越來越多的研究證實，外泌體可以通過細胞間轉移核酸、蛋白質、脂質等特定物質，發(fā)揮特殊的功能。如在抗原提呈細胞中呈遞抗原程中、肉瘤細胞發(fā)生了發(fā)展、神經細胞信號轉導過程中都發(fā)揮著重要作用。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。外泌體的大?。和饷隗w的直徑約30-150nm。中草藥外泌體

Exosome，中文名外泌體，是一種能被大多數細胞分泌的微小膜泡，具有脂質雙層膜結構，直徑大約40-100nm。盡管外泌體較初在1983年就被發(fā)現，但人們一直認為它只是一種細胞的廢棄物。然而較近幾年，人們發(fā)現這種微小膜泡中含有細胞特異的蛋白、脂質和核酸，能作為信號分子傳遞給其他細胞從而改變其他細胞的功能。這些發(fā)現點燃了人們對細胞分泌膜泡的興趣。2015年，隨著精確醫(yī)學概念的提出，越來越多的人開始關注如何能做到疾病的精確診斷和診療。外泌體作為一個新型的研究熱點，由于它在體內存在的普遍性和獲取的便捷性，已經成為了疾病診斷診療的潛在有效方式，在精確醫(yī)學發(fā)展上有著光明的前景。外泌體的提取的方式：超速離心法。外周血提取試劑盒服務外泌體的直徑比微泡的要小，后者直徑為100nm-1μm。

密度梯度離心法根據在蔗糖、碘海醇或碘克沙醇等惰性溶液中的浮力密度將外泌體分成特定的層，目前普遍應用的是蔗糖，這種方法可以成功地將亞細胞成分（例如過氧化物酶體，線粒體和核內體）分離到密度梯度溶液中的不同層中。樣品被放置在梯度的頂部，當施加離心力時，樣品中的顆粒以獨特的速率通過梯度，該梯度以從上到下的密度增加。樣品中的外泌體將在1.13-1.19g/ml的密度范圍富集，隨后可以通過分餾收集，密度梯度超速離心對從蛋白質聚集體和非膜顆粒中分離出外泌體非常有效。此方法獲得的外泌體純度較高，但步驟繁瑣、費時且會造成外泌體損失。

外泌體是細胞分泌到胞外的一種囊泡，其大小為30-150nm，具有雙層膜結構和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內含物（包括核酸、蛋白和脂質等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。所有的細胞都能分泌外泌體，但是不同細胞分泌的外泌體不管在數量上還是在內含物中都具有比較大的差異性，這也決定了每種外泌體所行使的功能不一樣。外泌體普遍參與細胞間物質運輸與信息傳遞，調控細胞生理活動。同時，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進瘤子發(fā)生和轉移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來進行藥物遞送。外泌體膜中有跨膜蛋白PGRL、LAMP1、LAMP2。

外泌體分離的主要挑戰(zhàn)之一是消除納米級污染物，包括干擾外泌體標志物解析的游離核酸和脂蛋白。超速離心是目前分離外泌體的主要技術。盡管如此，它仍難以符合臨床應用所需的標準，主要是由于該方法得到的外泌體純度不足，產量較低，完整性欠佳且分離純化操作耗時長。其他方法，例如基于聚乙二醇（PEG）的沉淀，磷脂酰絲氨酸親和捕獲，尺寸排阻色譜法和膜親和捕獲，近年來已經出現在特定的應用中，但是只適用于特定場景。近來，非對稱流場-流分離方法已被用于從細胞和瘤子培養(yǎng)基中高分辨率地分選EV亞群，但其通量受到繁瑣的樣品制備程序的影響。單一分析耗時的過程也限制了其普遍的應用。因此，目前亟需開發(fā)創(chuàng)新技術以提高外泌體分離純化的效率，純度，產量，速度和耐用性?；诔瑸V的技術提供了潛在的有前途的替代方法，但它們也有缺點。在切向流過濾中，使進料流平行于多孔膜流動，以避免堵塞。然而，盡管已實現使用切向流過濾從大量條件細胞培養(yǎng)基中濃縮外泌體，但受制于其一次性模塊的成本高，高剪切應力，難以處理小體積樣品等因素而難以應用于臨床分析。外泌體膜可以與靶細胞膜直接融合，非選擇性的釋放其所含的蛋白質、mRNA以及microRNA。宇玫博生物科技有限公司

需要開發(fā)大規(guī)模生產質量可控的外泌體并快速純化外泌體的技術和策略。中草藥外泌體

外泌體遞送藥物的優(yōu)勢：許多新的候選藥物（例如蛋白質和核酸）在體內環(huán)境中高度不穩(wěn)定，對診療結果的效果提出了重大挑戰(zhàn)。鑒于與許多當前的納米微粒遞送系統相關的問題，外泌體作為“自然的遞送系統”允許遞送這些生物分子。由于外泌體體積小和其本身就是細胞產物，通過外泌體遞送藥物可以避免巨噬細胞的吞噬作用或降解，還可以在體內長時間循環(huán)，保持效果。其中，外泌體能夠穿過血腦屏障以將特定藥物輸送到中樞的神經系統是外泌體遞送藥物的一個明顯優(yōu)勢。中草藥外泌體

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