胸水外泌體芯片

近年來，外泌體的捕獲技術越來越多，微流體系也被用于外泌體提取，此方法能根據其物理和生化特性同時分離外泌體。采用這種方法獲得的樣品純度高，且可及時獲取外泌體用于疾病的相關檢測。在初次注射時外泌體粘附在微流控設備的內表面，并在隨后的PBS注射中沖洗掉。此方法采用的設備復雜，所需的樣本量取決于流動通道的長度。另外，樣品量的注入速率比較低，因此，對于大樣品量，將需要較長的處理時間。外泌體在包括瘤子在內的各種疾病的發(fā)病機理中具有重要的功能。目前，研究人員已開發(fā)了多種方法來分離外泌體，離心技術仍然是常用方法，其他方法，例如過濾、磁珠分離和色譜法等，也顯示出獨特的優(yōu)勢，但目前仍然沒有一種公認有效的提取方法，研究人員應針對不同來源的樣本以及不同的下游分析選取較適宜的提取方案。外泌體其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。胸水外泌體芯片

質膜的連續(xù)內陷較終導致多泡體的形成，多泡體可與細胞內的其他囊泡和細胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據細胞來源的不同，細胞外囊泡，包括外泌體，可以包含細胞的許多成分，包括DNA、RNA、脂質、代謝物、胞質和細胞表面蛋白。目前產生外泌體的生理目的尚不清楚，需要進一步研究。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內環(huán)境的穩(wěn)定。較近的研究也表明外泌體中特定細胞成分的功能、靶向、機制驅動的積累，提示它們在調節(jié)細胞間通訊中發(fā)揮作用。北京外泌體iTRAQ對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預后分析。

質膜的連續(xù)內陷較終導致多泡體的形成，多泡體可與細胞內的其他囊泡和細胞器交叉，從而增加了外泌體成分的多樣性。根據細胞來源的不同，細胞外囊泡，包括外泌體，可以包含細胞的許多成分，包括DNA、RNA、脂質、代謝物、胞質和細胞表面蛋白。目前產生外泌體的生理目的尚不清楚，需要進一步研究。一個推測的作用是外泌體可能從細胞中去除多余和/或不必要的成分以維持細胞內環(huán)境的穩(wěn)定。近來的研究也表明外泌體中特定細胞成分的功能、靶向、機制驅動的積累，提示它們在調節(jié)細胞間通訊中發(fā)揮作用。

肉瘤細胞可以通過產生異常的抗肉瘤或肉瘤免疫應答并促進瘤子細胞的活動而大量產生外泌體，這些外泌體富含促病的細胞成分，例如PD-L1、mRNA和micro-RNA等免疫阻止蛋白，參與病癥的發(fā)展、轉移和耐藥性。值得注意的是，肉瘤分泌的外泌體表面和外泌體顆粒中均存在的PD-L1。ESCRT（運輸所需的內體分選復合體）參與將生物分子包裝到外泌體中，nSMase2（中性鞘磷脂酶2）和Rab蛋白調節(jié)外泌體分泌。已確定ESCRT、Rab27a和nSMase2參與外泌體PD-L1的包裝和分泌。外泌體可以將PD-L1轉運至其他PD-L1表達低或沒有PD-L1的細胞，并可能與PD-1結合。外泌體顯示出了在診療各種疾病（如心肌病和神經?。┓矫娴臐摿?。

外泌體的來源與特征：外泌體是一種存在于細胞外的多囊泡體，通過細胞內吞泡膜向內凹陷形成，其大小均一，直徑為40-100nm，密度為1.10-1.18g/mL。外泌體可由間充質干細胞、淋巴細胞和肉瘤細胞等多種類型細胞主動分泌釋放。外泌體內主要含有核酸、蛋白質和脂質等，可作為疾病診斷標記物、調控靶細胞功能、參與細胞生物學活動等。例如：含有miR-140-5p的滑膜間充質干細胞來源外泌體(SMSC-Exo影響軟骨組織再生；骨髓間充質干細胞來源外泌體攜帶的miR-196a可調節(jié)成骨細胞分化促進大鼠顱骨缺損的骨再生。外泌體可以通過多種方法給藥，靜脈內給藥是較常用的途徑。干細胞外泌體示蹤

外泌體具有異質性，即使是同一種細胞分泌的外泌體都有可能具有比較大功能區(qū)別。胸水外泌體芯片

外泌體生物學功能：1、在心血管系統(tǒng)中，據報道，源自人胚胎干細胞（ESC）的間充質干細胞（MSC）外泌體可減少小鼠和豬模型中的心肌缺血和再灌注損傷；2、在免疫系統(tǒng)中，據報道趨化因子受體CCR5通過外泌體在細胞之間轉移是細胞人類免疫缺陷病毒傳染的一種機制；3、在中樞的神經系統(tǒng)（CNS）中，外泌體的作用是消除廢物并介導大腦活動，從而阻止神經退行性疾病的發(fā)病機理；迄今為止，尚未完全發(fā)現調節(jié)外泌體-細胞結合的途徑。然而，比較明顯，其結合過程從外泌體識別受體細胞PM上的特定受體開始。膜受體的識別是外泌體細胞反應的基礎，它可能活躍受體并隨后導致相關信號通路的活躍，外泌體與PM融合或外泌體的內吞作用，從而導致蛋白質和RNA直接釋放到受體細胞中。從研究上來講并不太嚴格區(qū)分外泌體或微泡。胸水外泌體芯片

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