黑龍江外泌體NTA

Buller等利用miR-146b的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞，使其分泌的外泌體負(fù)載miR-146b，并將外泌體注射至移植到小鼠體內(nèi)的GBM處。結(jié)果表明，這種利用外泌體運(yùn)輸miRNA進(jìn)行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生長。對于GBM類腦部中流，體內(nèi)zhiliao不同于體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，更需考慮腦部組織微環(huán)境對藥物的影響，外泌體可運(yùn)輸miRNA并不破壞其在腦部中流組織處的原本功效。然而，至今還沒有利用外泌體載藥經(jīng)靜脈注射zhiliaoGBM的報(bào)道，這主要是由于跨越血腦屏障(BBB)仍然是外泌體進(jìn)行腦部中流zhiliao需要解決的難題。盡管如此，Wood等報(bào)道的在進(jìn)行阿茲茨海默病zhiliao時利用對腦部神經(jīng)元特異性肽RVG靶向的外泌體穿過BBB的研究顯示了經(jīng)靶向修飾的外泌體具備穿過BBB的潛力，因此外泌體載藥zhiliao具有廣闊的前景。電子顯微鏡下外泌體大小不一，通常呈茶托樣的圓形或橢圓形。黑龍江外泌體NTA

外泌體的檢測,在其他消化道系統(tǒng)瘤的診療中,存在著巨大的潛在價值.如:食管鱗狀細(xì)胞病的研究中發(fā)現(xiàn),miRNA-21在外泌體中的高表達(dá),表達(dá)水平可100%反應(yīng)瘤水平,外泌體miRNA-21的高表達(dá)往往預(yù)示著寬泛浸潤與復(fù)發(fā)[36].十二指腸病的研究中,發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移性十二指腸病細(xì)胞分泌的外泌體富含PABP1蛋白,細(xì)胞不能耐受PABP在胞內(nèi)的大量囤積,通過外泌體PABP1蛋白排出胞外是轉(zhuǎn)移性十二指腸病細(xì)胞所具有的特性,外泌體PABP1是轉(zhuǎn)移性十二指腸病的分子標(biāo)志物,此發(fā)現(xiàn)不只在轉(zhuǎn)移性十二指腸病的診斷上提供了價值,也為轉(zhuǎn)移性十二指腸病的治理提供了新的思路。浙江外泌體circRNA測序外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙，快速直達(dá)基底層起效。

瘤在生長過程中會不斷地將外泌體釋放到周圍環(huán)境中去，同時，外泌體能在4℃保存96h，或是在-70℃下保存更長時間，可以從患者的體液中分離外泌體用于早期臨床診斷。隨著技術(shù)的進(jìn)步，已經(jīng)有生物公司嘗試涉足外泌體領(lǐng)域，外泌體中存在黑色素瘤標(biāo)志物包括MIA、S100B和酪氨酸酶相關(guān)蛋白，且黑色素瘤患者胞外體中MIA和S100B濃度顯著高于健康人群和非黑色素瘤患者，通過檢測MIA和S100B表達(dá)水平對黑色素瘤的診治具有積極地參照作用。從本質(zhì)上說，液態(tài)活檢是分子診斷在樣本來源上的延伸，進(jìn)一步豐富了檢測手段，而隨著外泌體的不斷揭秘，相信其會在液態(tài)活檢中發(fā)揮越來越重要的作用。

唾液中包含來自于唾液腺上皮體外細(xì)胞的外泌體，Michael等從唾液中提取外泌體，并對唾液外泌體中的miRNA進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)此類miRNA有望作為成為唾液腺疾病的生物標(biāo)志物。Wu等成功從汗液中提取得到外泌體，并進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，在汗液外泌體中鑒定到1062種蛋白質(zhì)，其中包含多種抗jun肽和免疫因子，表明汗液外泌體參與皮膚免疫。Liu等從患有阿爾茲海默癥患小鼠的腦脊髓液中提取得到外泌體，并與野生型小鼠進(jìn)行對比，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組miR-193b明顯下調(diào)。對外泌體的分析和檢測可以輔助疾病的早期診斷、療效評價和預(yù)后分析。

獲得囊泡粒徑分布的兩種方法動態(tài)光散射(DLS)和納米顆粒跟蹤分析(NTA)都被廣fan應(yīng)用于外泌體顆粒數(shù)目和粒徑分布的測量，但兩種方法也各有不足。動態(tài)光散射法中散射光強(qiáng)度依賴于顆粒質(zhì)量(體積)，混合體系中大囊泡的存在(即使只有很少的量)將嚴(yán)重影響測量結(jié)果，因此動態(tài)光散射法更適用于單分散體系。而且動態(tài)光散射法所得的結(jié)果強(qiáng)烈依賴于所應(yīng)用的數(shù)學(xué)算法。而采用納米顆粒跟蹤分析儀對不同粒徑范圍的囊泡進(jìn)行檢測時，為了得到準(zhǔn)確的濃度和粒徑信息，需要根據(jù)所要測量的顆粒粒徑范圍對儀器分別校準(zhǔn)，操作繁瑣。受檢測靈敏度所限，納米顆粒跟蹤分析儀適用于粒徑范圍50nm～1μm的顆粒，粒徑小于50nm的外泌體無法檢測。除此之外，兩種方法都依賴光散射和粒子的布朗運(yùn)動進(jìn)行分析，難以區(qū)分合成的納米材料、大蛋白質(zhì)聚合體和生物囊泡。外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，從而活躍細(xì)胞內(nèi)的信號通路。山東外泌體NTA

外泌體分離之后，需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。黑龍江外泌體NTA

結(jié)果表明，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。應(yīng)用Tim4的外泌體強(qiáng)結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。以前無法用超速離心法提取的微囊泡，也通過運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取。本指導(dǎo)書中對該技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)說明，這項(xiàng)技術(shù)的有用性今后將受到世界各方評價，有望在外泌體和微囊泡生理功能的分析研究上起重大貢獻(xiàn)。外泌體的檢測和提取還遇到一個困難即：對各種外泌體的分類。研究人員尚未統(tǒng)一定義以何種方法提取的細(xì)胞外囊泡可以稱之為外泌體，給實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析和重復(fù)性確認(rèn)帶來困難。近年，隨著國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會的成立、世界性研究者研討會的舉辦，提案MISEV指南作為國際標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)劃或已經(jīng)開始進(jìn)行EV研究的科學(xué)家請務(wù)必閱讀這些方針。黑龍江外泌體NTA

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