外泌體分泌檢測(cè)

人體內(nèi)多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體，包括干細(xì)胞、免疫細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、血小板及平滑肌細(xì)胞等。外泌體被包裹在堅(jiān)硬的雙層膜中。雙層膜保護(hù)外泌體的內(nèi)容物，使外泌體能夠在組織中長(zhǎng)距離移動(dòng)。干細(xì)胞外泌體因在上皮組織的增殖、遷移、再生、炎癥和瘢痕控制等方面的作用，有望成為“無(wú)細(xì)胞的細(xì)胞治理”工具。干細(xì)胞來(lái)源的外泌體可通過(guò)囊泡，將干細(xì)胞的精華部分——mRNA、miRNA、IncRNA及蛋白質(zhì)等生物活性物質(zhì)，打包運(yùn)出干細(xì)胞體外。通過(guò)“細(xì)胞間高速公路”來(lái)“快遞”到人體各個(gè)組織內(nèi)。外泌體是具有生物活性的脂雙層囊泡。外泌體分泌檢測(cè)

尋找肝臟疾病的新型分子標(biāo)志物一直是研究熱點(diǎn)，也是難點(diǎn)。不同肝臟疾病中，細(xì)胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。這些不同生理狀態(tài)下外泌體所攜帶的特異性蛋白分子、miRNA等，是潛在的分子診斷和預(yù)后標(biāo)志物。肝細(xì)胞患者中，血清外泌體miR-21、-18a、-221、-222和miR-224明顯上升，miR-101、-106b、-122和miR-195明顯下降。而HCC患者肝移植復(fù)發(fā)后，血清外泌體miR-718水平明顯下降。除外泌體外，微泡也有可能作為新型標(biāo)志物，研究發(fā)現(xiàn)HCV患病者中CD4+和CD8+T細(xì)胞來(lái)源的微泡含量上升；而肝臟干細(xì)胞分泌的微泡中多種miRNAs上調(diào)。血漿提取試劑盒廠家外泌體是其中一類小囊泡，直徑為30~150nm，密度1.10~1.18g/ml。

肺病細(xì)胞來(lái)源外泌體（LCC-exosome）可以通過(guò)刺激種瘤血管的形成來(lái)促進(jìn)種瘤的生長(zhǎng)。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過(guò)調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進(jìn)種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過(guò)開(kāi)啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來(lái)促進(jìn)肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。科學(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能。

所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和病癥細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體。體內(nèi)所有體液，包括血液、唾液、腦脊液、腹水，甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號(hào)分子，包括蛋白質(zhì)、信使核糖核酸（mRNA）和非編碼核糖核酸（RNA），其攜帶的分子可以被其他細(xì)胞吸收。因此，外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞。這種細(xì)胞間通信不只涉及生理功能，還涉及一些疾病的發(fā)病機(jī)理，包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等。外泌體可以作為藥物治理的遞送系統(tǒng)。

流式細(xì)胞技術(shù)針對(duì)外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低，所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強(qiáng)反射，操作耗時(shí)又費(fèi)力。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM)，將可檢測(cè)的外泌體粒徑降至40nm，能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測(cè)，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測(cè)，目前該儀器已商品化。提取的外泌體的鑒定方式主要是通過(guò)形態(tài)學(xué)（電子顯微鏡技術(shù)）、粒子大小以及標(biāo)志蛋白等方式實(shí)現(xiàn)的。成都外泌體芯片

外泌體能負(fù)載的治理物質(zhì)包括小分子化合物、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等，且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體分泌檢測(cè)

circZKSCAN1在肝ai細(xì)胞中低表達(dá)且抑制肝ai細(xì)胞的增殖，ciRS-7則被認(rèn)為是非小細(xì)胞肺ai、結(jié)腸ai和胃ai等中流的預(yù)后指標(biāo)，其高表達(dá)與較高的臨床分期和較差的總體生存期相關(guān)。目前已發(fā)現(xiàn)組織、血液和外泌體中的circRNA分子表達(dá)失調(diào)，而多種circRNA的聯(lián)合檢測(cè)會(huì)提高外泌體標(biāo)志物的敏感性和特異性，甚至可達(dá)到90％左右。外泌體可作為納米載體來(lái)介導(dǎo)細(xì)胞間的信息傳遞，發(fā)揮信息傳遞作用的方式主要有：在細(xì)胞間轉(zhuǎn)移受體，通過(guò)配體受體介導(dǎo)的方式作用于受體細(xì)胞，向受體細(xì)胞轉(zhuǎn)移功能蛋白，通過(guò)膜融合方式向受體細(xì)胞傳遞mRNA、miRNAs或轉(zhuǎn)錄因子等信息。這些方式為中流靶向zhiliao開(kāi)辟了新的途徑。外泌體分泌檢測(cè)

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