湖北鼻腔灌洗液外泌體

在血液和大多數體液（如尿液、腦脊液、唾液、胸腹腔積液、羊水和乳汁等）中均可檢測到外泌體。血液外泌體的檢測通常采用EDTA抗凝血分離的血漿，miRNA等一些微小RNA則采用血清樣本。泌尿系統(tǒng)中存在大量的RNA水解酶可降解尿液中的裸miRNAs，但外泌體外膜則可幫助RNA免于被降解，因此研究尿液外泌體miRNAs更具有應用價值。相較于血清中相關miRNA的水平，腦脊液外泌體中的miR-21可作為膠質瘤診斷和預后的指標，特別對預測中流復發(fā)或轉移具有價值。唾液樣本在安靜狀態(tài)下主要來源于舌下腺和頜下腺，刺激狀態(tài)下則主要來源于腮腺。外泌體作為膜和細胞溶質蛋白、脂質和RNA細胞之間傳遞的載體。湖北鼻腔灌洗液外泌體

外泌體的提取方法：超速離心法，這是外泌體提取比較常用的方法。超速離心法得到的外泌的體量比較多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡而不是外泌體。過濾離心法，這種操作簡單、省時，不會影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期的準備工作繁雜，比較耗時，量少。外泌體綜述外泌體觀察到它們可以在體內刺激免疫應答。

干細胞外泌體可直接促進血管生成,改善大腦缺氧后的損傷。因此，干細胞外泌體可用于中風的治理，改善神經預后，增加血管與神經生成。干細胞外泌體對多種類型的免疫細胞均具有免疫調節(jié)作用，包括樹突狀細胞、T細胞、B細胞和巨噬細胞。靜脈輸注干細胞外泌體可抑制CD4+T和CD8+T細胞的活化和浸潤，從而延長GVHD小鼠模型的存活時間，并減少多個組織的病理損傷。干細胞在人類健康領域所發(fā)揮出來的潛能，令人驚嘆。而干細胞外泌體，作為干細胞與其它組織細胞相互交流信息的載體，儼然會成為生物醫(yī)學研究的新風口之一。

中流細胞分泌的外泌體可以通過體液進入特定qi官，建立有利于ai細胞生長的微環(huán)境，包括促進受體細胞上皮細胞-間充質轉化、引發(fā)炎癥、促進血管生成，為ai細胞的擴散形成有利條件。進一步研究發(fā)現中流細胞外泌體能夠引導ai癥轉移至特定qi官，在膜表面特異性整合素的作用下，中流細胞外泌體首先在特定的qi官累積，引起受體qi官產生炎癥、生成血管，形成有利于中流轉移的微環(huán)境，使得中流細胞更容易轉移至該qi官。Maji等揭示了惡性中流細胞外泌體中的AnnexinⅡ蛋白能夠促進血管生成，為中流轉移創(chuàng)造有利的微環(huán)境。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理。

外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。現在外泌體特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。干細胞外泌體通過改變細胞外基質，改變受體細胞的轉錄組和蛋白質組，調節(jié)細胞凋亡，生長，增殖和分化途徑。湖北鼻腔灌洗液外泌體

外泌體被工程化改造后，具有靶向特定細胞類型或組織的功能。湖北鼻腔灌洗液外泌體

研究采用蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀，極大地降低了外泌體的提取成本，且獲得的外泌體不僅表達外泌體公認的標志蛋白分子，同時也表達胎盤特異性蛋白分子，證明通過這種方法獲得的外泌體是胎盤來源外泌體。通過蔗糖密度梯度離心后得到的外泌體沉淀經蛋白質SDS-PAGE膠電泳，銀染后可見各蛋白分子條帶清晰可見，動態(tài)光散射分析粒徑，結果顯示獲得的外泌體顆粒粒徑大部分分布于28-91nm之間，與文獻報道外泌體顆粒大小相一致。胎盤外泌體經過PKH67熒光染料染色后，與細胞共孵育，熒光顯微鏡下觀察外泌體具備進入細胞的活性，進一步驗證了我們應用此種改良的分離方法可有效的獲得胎盤來源的外泌體。本研究通過蔗糖密度梯度離心聯合2次PEG6000沉淀成功分離得到母體血清中胎盤來源外泌體，并從蛋白標志分子、電鏡、粒徑及分布、進入細胞活性四方面對其進行了鑒定，為研究妊娠期間胎盤外泌體在正常妊娠及胎盤源性并發(fā)癥中的作用奠定了基礎。湖北鼻腔灌洗液外泌體

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