唾液提取試劑盒方法

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-08-24

外泌體的組成較為復(fù)雜,其內(nèi)含有多種生物大分子,如:核酸(雙鏈DNA和各種RNA亞型)、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán),而后被靶細(xì)胞吸收,從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能。此外,外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子,調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá),參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號(hào)的傳導(dǎo)。有研究表明,外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強(qiáng)種瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)種瘤的發(fā)展。外泌體天然的可以攜帶遺傳到靶細(xì)胞中,從而在生物學(xué)和致病過(guò)程中誘導(dǎo)遺傳修飾。唾液提取試劑盒方法

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外泌體作為疾病診斷的標(biāo)志物具有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì):(1)與正常細(xì)胞相比,病變細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內(nèi)容物方面存在明顯差異。病變的細(xì)胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式,外泌體的組成不同于來(lái)源細(xì)胞。其內(nèi)包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結(jié)構(gòu)和運(yùn)輸方式,有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機(jī)制。(3)病變細(xì)胞分泌的外泌體通過(guò)胞吐的過(guò)程進(jìn)入血液、尿液等體液,囊泡狀結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)外泌體內(nèi)部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾,有利于保持其結(jié)構(gòu)完整和生物活性,通過(guò)對(duì)此類體液進(jìn)行分析可以實(shí)現(xiàn)疾病的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)檢測(cè)。體內(nèi)外泌體的示蹤方法外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類型。

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在過(guò)去十年中,細(xì)胞外囊泡已經(jīng)成為細(xì)胞間通訊的重要介質(zhì),參與原核生物和高等真核生物細(xì)胞之間的生物信號(hào)傳遞,以調(diào)節(jié)不同范圍的生物過(guò)程。此外,細(xì)胞外囊泡的病理生理作用開始在包括癥狀、傳播性疾病和神經(jīng)變性疾病在內(nèi)的疾病中得到認(rèn)識(shí),突出了醫(yī)治干預(yù)的潛在新靶點(diǎn)。此外,未修飾和工程化的細(xì)胞外囊泡可能在大分子藥物遞送中具有應(yīng)用。該綜述回顧近在理解細(xì)胞外膜泡生物學(xué)和細(xì)胞外囊泡在疾病中的作用方面的進(jìn)展,討論新出現(xiàn)的醫(yī)治機(jī)會(huì)并考慮相關(guān)的挑戰(zhàn)。

小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞產(chǎn)生的外泌體中含有的中流多肽能夠啟動(dòng)特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,根除或抑制小鼠中流的生長(zhǎng),這一發(fā)現(xiàn)為中流免疫zhiliao提供了新的研究思路。另外,樹突狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體也能夠通過(guò)激huo其他免疫細(xì)胞誘導(dǎo)抗中流反應(yīng),從而抑制中流。B細(xì)胞分泌的外泌體包含MHCⅡ-多肽復(fù)合物,能夠激huo人和小鼠抗原特異性T細(xì)胞,從而實(shí)現(xiàn)調(diào)節(jié)免疫響應(yīng)的功能。細(xì)菌或病原體感ran的巨噬細(xì)胞外泌體能夠刺激巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞分泌炎性介質(zhì),在增強(qiáng)機(jī)體免疫監(jiān)督方面發(fā)揮重要作用。外泌體能夠影響級(jí)聯(lián)反應(yīng)的每一步,因此可作為病灶治理的靶點(diǎn)。

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外泌體是由細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的晚期內(nèi)泡小體以膜融合的方式通過(guò)胞吐方式主動(dòng)分泌到細(xì)胞外環(huán)境的一種直徑30-100nm的微型囊泡,其形態(tài)規(guī)則,呈圓形或橢圓形杯狀結(jié)構(gòu),不同類型細(xì)胞分泌的外泌體具有很多共性,包括膜上富含脂筏及豐富的跨膜蛋白,如四次跨膜蛋白家族成員CD63、CD81等,表面為類似于細(xì)胞膜的脂質(zhì)雙分子層,具有一定的疏水性。外泌體能夠攜帶微小RNA(microRNAs,miRNAs)、RNA、蛋白質(zhì)等生物活性分子,并在細(xì)胞外環(huán)境穩(wěn)定存在,而且通過(guò)傳遞供體細(xì)胞信息,調(diào)節(jié)靶細(xì)胞的代謝通路。外泌體可由多種類型細(xì)胞分泌,妊娠期母體血清中存在表達(dá)胎盤堿性磷酸酶(placentalalkalinephosphatase,)的胎盤來(lái)源外泌體,并且在妊娠中發(fā)揮重要的作用。不同肝臟疾病中,細(xì)胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。安徽外泌體Dil

外泌體是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。唾液提取試劑盒方法

外泌體是具有雙層脂膜的囊泡結(jié)構(gòu),其穩(wěn)定性較好,可保護(hù)內(nèi)部生物分子免受體液中各種酶的影響,從而保持其完整性和生物活性。外泌體被提取后一般懸浮于磷酸鹽緩沖液。目前,常用的儲(chǔ)存方法為冷凍保存,但是冷凍保存可能會(huì)導(dǎo)致外泌體形狀與物理性質(zhì)的改變,也可能導(dǎo)致多層囊泡的形成和聚集,反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致外泌體表面分子的生物特性、含量和標(biāo)志物組成發(fā)生變化。血清中包含外泌體在內(nèi)的細(xì)胞外囊泡DNA在不同儲(chǔ)存環(huán)境可保持穩(wěn)定,血漿存放于4°C時(shí)其RNA會(huì)明顯降解,在–20°C下長(zhǎng)期保存也會(huì)導(dǎo)致血漿中外泌體總RNA降解,但miRNA卻十分穩(wěn)定,這也提示了外泌體miRNA作為生物標(biāo)志物的潛力。唾液提取試劑盒方法

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