外泌體的應用前景

與PC-3細胞相比，PC-3細胞外泌體中含有較高豐度的鞘糖脂、鞘磷脂、膽固醇和磷脂酰絲氨酸。外泌體常見的表面蛋白質包括四跨膜蛋白(如CD63、CD9、CD81)、黏附蛋白(如L1CAM、LAMP2)、整合素和糖蛋白(如纖連蛋白)等，而外泌體囊泡內蛋白質則與來源細胞內的蛋白質密切相關，包含例如熱休克蛋白(HSP70、HSP90)和細胞骨架蛋白(actin、tubulin、cofilin)等。除此之外，外泌體中還攜帶有來源細胞的miRNAs、mRNAs、non-codingRNAs、circularRNAs和DNA等遺傳物質。外泌體的完整囊泡結構能夠保護其內部生物分子不受體液中各種酶的影響從而保持其完整性和生物活性。外泌體可以作為生物標志物來對疾病進行檢測。外泌體的應用前景

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體，如樹突狀細胞、淋巴細胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。血清外泌體提取試劑盒外泌體能向病變細胞輸送功能性物質，所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。

外泌體的組成較為復雜，其內含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）、蛋白質和脂質。這些分子被外泌體攜帶進入血液循環(huán)，而后被靶細胞吸收，從而調節(jié)靶細胞基因表達和細胞功能。此外，外泌體相關的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子，調節(jié)致病基因或抑病基因的表達，參與細胞分化、細胞凋亡及細胞信號的傳導。有研究表明，外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強種瘤細胞的侵襲和轉移能力、介導種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進而促進種瘤的發(fā)展。

外泌體富含蛋白質、脂質和核酸分子，這些分子具有來源細胞的特異性，所以通過分析中流細胞所釋放的外泌體分子特征就可部分反映其來源細胞表型及其生物學作用?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)多種中流外泌體來源的蛋白類分子標志物。例如，乳腺ai、結腸ai和胰腺ai中均可檢測到磷脂酰肌醇蛋白聚糖1（glypican1，GPC1）的表達，且與乳腺ai和結腸ai相比，GPC1對胰腺ai的早期診斷尤具價值。前列腺ai患者血漿外泌體中凋亡抑制蛋白的表達增高則提示與中流進展相關。隨著蛋白組學技術的發(fā)展，研究發(fā)現(xiàn)中流患者血液外泌體來源的蛋白標志物其診斷特異性和敏感性分別可達到95％和90％。外泌體作為腦內種瘤和神經退行性疾病的新型標記物。

血清和血漿為常規(guī)檢測樣本，具有微創(chuàng)取樣的優(yōu)點，是診斷疾病的理想樣本。血液中外泌體能夠作為胰腺ai、胃ai、肺ai和阿爾茲海默等疾病的早期診斷和療效評價提供潛在標志物。血液外泌體來源的疾病標志物主要包括蛋白質和miRNA兩類。Melo等發(fā)現(xiàn)利用胰腺ai細胞外泌體表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能夠實現(xiàn)胰腺ai早期診斷，利用該方法對血清中包含GPC1的外泌體進行檢測，能夠高特異性(100%)、高靈敏度(100%)地區(qū)分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。不同類別的外泌體囊泡有三個征：表面具涂層的膜泡、內含纖維的膜泡、電子致密囊泡。細胞上清外泌體提取試劑盒報價

外泌體是內源性和質膜起源的不同類型的膜囊泡。外泌體的應用前景

外泌體的生物發(fā)生途徑主要包括三個關鍵的檢查點：ILV的形成，阻止MVEs的降解以及MVEs和細胞膜的融合，這三個檢查點都包含在內體相關的囊泡運輸過程中。RABGTPase定位到特定膜結構的表面，通過招募效應因子來調節(jié)相應膜結構的囊泡運輸，例如，在內體溶酶體運輸網絡中，RAB5調節(jié)早期內體的形成及相互融合；內體膜上RAB5到RAB7的轉換調節(jié)早期向晚期內體的轉變；RAB7調節(jié)晚期內體/MVEs與溶酶體的融合來降解ILVs；RAB27調節(jié)MVEs與細胞膜的對接和融合來釋放ILVs形成外泌體。內吞的膜蛋白，特別是受體酪氨酸激酶家族的表皮生長因子受體，定位到內體和MVEs，通過MVEs和溶酶體融合來進入溶酶體降解，此過程受多種RABGTPases和ESCRT復合體的調控。外泌體的應用前景