外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中，由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸，因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞，而后將SR4987與PTX共混，使SR4987分泌的外泌體含有PTX，再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái)，研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能，小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047～0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%，這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。癥狀細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與癥狀進(jìn)展相關(guān)的分子。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

目前為止已鑒別了2500余種miRNAs分子。例如，血液外泌體miR-21的升高已被證實(shí)與胰腺ai、結(jié)直腸ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai及食管ai等多種中流相關(guān)，可能與其參與中流xue管生成有關(guān)，研究表明肺ai細(xì)胞釋放的外泌體miR-21會(huì)通過(guò)STAT3依賴(lài)機(jī)制誘導(dǎo)周?chē)夤芗?xì)胞血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）的產(chǎn)生，從而促進(jìn)血管生成。在食管ai中，miR-21還可以反映中流的惡性程度，食管ai患者的miR-21水平與良性中流患者相比急劇上升，上升的miR-21水平也與中流的淋巴侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)。在膀胱ai患者中，尿液中的miR-21和miR-4454會(huì)明顯上調(diào)。外泌體circRNA測(cè)序干細(xì)胞外泌體可用于中風(fēng)的治理，改善神經(jīng)預(yù)后，增加血管與神經(jīng)生成。

外泌體即細(xì)胞分泌的直徑約40-100nm的微小膜泡，多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。一開(kāi)始被當(dāng)做細(xì)胞排泄物，但是近幾年，研究發(fā)現(xiàn)外泌體可謂是小身體大作用。種瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移后，如何靶向呈遞藥物一直是種瘤醫(yī)治中的一個(gè)巨大挑戰(zhàn)。發(fā)表于NanoLett的一項(xiàng)研究中，研究人員利用外泌體制備藥物的遞送系統(tǒng)（LD-MDS），并取得成功。在這項(xiàng)研究中，研究人員將相關(guān)藥物錨定在活巨噬細(xì)胞膜上，細(xì)胞自身相關(guān)蛋白酶響應(yīng)開(kāi)啟并將藥物轉(zhuǎn)載進(jìn)入外泌體，順利遞送至肺轉(zhuǎn)移灶并且轉(zhuǎn)化為納米囊泡和次級(jí)納米囊泡，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性4T1病細(xì)胞的有效內(nèi)化和細(xì)胞死亡。之后，受損的4T1病細(xì)胞可以釋放次級(jí)納米囊泡和游離藥物分子，再破壞鄰近的病細(xì)胞。研究顯示，LD-MDS對(duì)體內(nèi)直徑小于100μm的肺轉(zhuǎn)移病灶顯示出優(yōu)異的靶向效率，并顯著壓制肺轉(zhuǎn)移。

外泌體作為細(xì)胞外囊泡的一個(gè)亞群,直徑集中于30~150nm。目前,基于粒徑大小分離外泌體的方法有超濾法、尺寸排除色譜法、靜水過(guò)濾透析法和非對(duì)稱(chēng)場(chǎng)流分離法等。超濾法利用不同孔徑的濾膜,對(duì)樣品進(jìn)行選擇性分離以獲得外泌體,一般分為壓力超濾和離心超濾。其中離心超濾效果更好,不jin能減輕力對(duì)外泌體的破壞,而且可通過(guò)增大離心力和延長(zhǎng)離心時(shí)間提高外泌體產(chǎn)物濃度。但離心力過(guò)大或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)均有可能導(dǎo)致超濾膜或外泌體破裂。此外,超濾法可以和切向流過(guò)濾法、微控流法、超速離心法或凝膠過(guò)濾色譜法等方法結(jié)合進(jìn)一步提高分離效率。神經(jīng)細(xì)胞來(lái)源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。

建立記錄各論文實(shí)驗(yàn)條件的數(shù)據(jù)庫(kù)也可作為規(guī)避混亂的方法之一。一方面，隨著EV研究倍受世界矚目，各國(guó)啟動(dòng)了大型研究項(xiàng)目。美國(guó)啟動(dòng)NIH戰(zhàn)略性大型項(xiàng)目（ExtracellularRNACommunication），國(guó)際厲害性學(xué)會(huì)——Gordon和KeystoneSymposia也從2016開(kāi)始成立會(huì)議小組。受到歐洲藥物研究開(kāi)發(fā)公司“創(chuàng)新藥物倡議組織（IMI）”的支持推進(jìn)的CANCER-ID項(xiàng)目，也包含EV研究在內(nèi)。2017年日本選定了EV研究為文部科學(xué)省研究開(kāi)發(fā)戰(zhàn)略的目標(biāo)之一，期待會(huì)加速今后的研究發(fā)展。無(wú)論如何，今后EV研究的根本就是必須有強(qiáng)有力的研究方法和技術(shù)，而PS親和法有望成為其中之一。外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型。植物外泌體lncRNA芯片

外泌體可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化等方方面面。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)

外泌體在各種疾病的診斷和治理中的應(yīng)用研究火熱。外泌體的復(fù)雜性，為疾病檢測(cè)和監(jiān)測(cè)提供了一個(gè)多指標(biāo)的診斷窗口。此外，能夠向病變細(xì)胞輸送功能性物質(zhì)的特性使外泌體有潛力作為基因和藥物遞送的載體。有研究總結(jié)了從外泌體中篩選的生物標(biāo)志物，可用于疾病的診斷、預(yù)后及治理。外泌體在生物液體中寬泛分布，包括血液、尿液、唾液、胸腹水、腦脊液、膽汁、乳汁以及淚液等，其復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物，具有檢測(cè)包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可以用于對(duì)心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測(cè)。外泌體細(xì)胞共培養(yǎng)