血漿外泌體miRNA芯片

雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟、腎臟和脾臟中積累，但通過在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子。例如，識別靶抗原的肽或抗體片段，可以獲得靶向外泌體；通過在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定的納米抗體，可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白，包括抗體、熒光蛋白和信號分子。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限，但是，將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中，并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力。實際上，用PS親和法提取的人白血病細(xì)胞釋放的外泌體。血漿外泌體miRNA芯片

肺病細(xì)胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進種瘤血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖，遷移能力?？茖W(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機制功能。山東外泌體PKH26隨著EV研究倍受世界矚目，各國啟動了大型研究項目。

外泌體由于包含的內(nèi)容物具有明顯的組織特異性，為其能成為瘤早期診斷的生物標(biāo)志物提供了重要保障。但目前對于外泌體miRNA、LnkRNA等的檢測方法還不成熟，限制了外泌體用于疾病診斷中的應(yīng)用?；谕饷隗w的診斷產(chǎn)品獲得FDA批準(zhǔn)上市，很大程度的增加了研發(fā)企業(yè)的信心。外泌體的異質(zhì)性又決定了外泌體藥物遞送系統(tǒng)不能提供一個普適的遞藥策略，必須根據(jù)所傳遞治理物質(zhì)的類型、目標(biāo)組織的特點等進行針對性的進行策略調(diào)整。良好的生物兼容性、穩(wěn)定性和內(nèi)在靶向性等使外泌體在藥物遞送方向大有潛力。

外泌體運輸?shù)幕蝾愃幬镆部梢允莔iRNA，miRNA是一類非編碼的內(nèi)源性RNA，主要用于調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達。miRNA主要通過與mRNA的未翻譯的區(qū)域(UTRs)結(jié)合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對，因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達，而每種siRNA只針對一種蛋白質(zhì)。miRNA的運載也存在著種種挑戰(zhàn):miRNA體內(nèi)穩(wěn)定性差、生物分布不理想、易被體內(nèi)酶降解以及容易引起副反應(yīng)等。越來越多的研究表明外泌體也是體內(nèi)運載miRNA的優(yōu)良載體，并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應(yīng)用。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長、細(xì)胞遷移、抗病毒等生理過程。

目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細(xì)胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細(xì)胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離，提取高純度的完整外泌體。外泌體復(fù)雜的內(nèi)容物被認(rèn)為是疾病診斷的無創(chuàng)或微創(chuàng)生物標(biāo)志物。羊水提取試劑盒產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)

各種細(xì)胞粘著分子在外泌體膜表面表達，由其決定外泌體被運輸往哪一種細(xì)胞。血漿外泌體miRNA芯片

由于特殊的結(jié)構(gòu)和循環(huán)方式，外泌體作為藥物運輸?shù)妮d體具有獨特的優(yōu)勢。例如外泌體的尺寸分布能夠增強滲透滯留效應(yīng)，從而有選擇性地深入中流組織;其外層磷脂雙分子層可以保護內(nèi)容物不受各種生物酶的影響，維持各種生物分子的活性;外泌體普遍存在于各種體液和組織中，其體積小，結(jié)構(gòu)、組成與細(xì)胞膜類似，導(dǎo)致外泌體可以在避開免疫系統(tǒng)監(jiān)督的同時深入組織內(nèi)部，有較好的生物相容性;當(dāng)采用內(nèi)源外泌體時，能明顯降低其他藥物載體可能引起的有害免疫反應(yīng);除此之外，某些細(xì)胞來源或經(jīng)特殊修飾過的外泌體具有良好的特異性，可以與特定的qi官或組織結(jié)合。血漿外泌體miRNA芯片