唾液提取試劑盒方法

來源: 發(fā)布時間:2024-02-05

一類外泌體中常見的細胞質蛋白是Rabs蛋白,是鳥苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一種。它可以調節(jié)外泌體膜與受體細胞的融合,有文獻報道稱RAB4,RAB5和RAB11主要出現(xiàn)于早期以及回收的核內體中,RAB7和RAB9主要出現(xiàn)于晚期的核內體?,F(xiàn)有大量的研究發(fā)現(xiàn)外泌體中含有40種RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌體中富含具有外泌體膜交換以及融合作用的膜聯(lián)蛋白(包括膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌體膜上富含參與外泌體運輸的四跨膜蛋白家族、熱休克蛋白家族。其它一些外泌體中的蛋白包括多種的代謝類的酶、核糖體蛋白(RPS3)、信號轉導因子(黑色素瘤分化相關因子,ARF1,CDC42,人類紅細胞膜整合蛋白,SLC9A3R1)、粘附因子、細胞骨架蛋白以及泛素等。外泌體就像是生物界的郵差,可以在細胞間運輸和轉移生物活性分子,是細胞間通訊交流的載體。唾液提取試劑盒方法

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外泌體不只可作為疾病診斷的生物標志,而且可作為天然的藥物傳遞載體。外泌體能夠負載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等,且在體液中寬泛分布且具有定向歸巢能力。外泌體獨特的生物兼容性、高穩(wěn)定性、瘤靶向性使其在未來瘤治理中有很大的利用價值。外泌體能夠裝載的治理物質包括小分子化合物、蛋白質、寡核苷酸等。作為小分子化合物載體,外泌體裝載姜黃素、紫杉醇、阿霉素等主要是用于抗瘤研究;已經發(fā)現(xiàn)外泌體可遞送多種蛋白質,例如酶,細胞骨架蛋白質和跨膜蛋白質;外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,外泌體天然的可以攜帶遺傳(例如miRNA,siRNA)到靶細胞中,從而在生物學和致病過程中誘導遺傳修飾。安徽外泌體熒光標記外泌體的遺傳分子與肝臟病理息息相關,在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點或分子標志物。

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外泌體在神經系統(tǒng)中與神經回路的控制相關,同時各種神經退行性疾病的致病蛋白還可以通過外泌體釋放到細胞外并傳遞到其他細胞,與病情發(fā)展密切相關。病細胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關的分子,構建適合病細胞生長的微環(huán)境,促進病細胞的發(fā)展。另外,病細胞來源的外泌體上粘著分子的表達形式決定著癥狀向身體部位的轉移途徑。近,有報告指出脂肪細胞釋放的外泌體對肝臟的遺傳基因表達有控制作用。許多病毒利用外泌體的產生路徑傳播細胞,受病毒傳播的細菌和寄生蟲通過外泌體控制其他受細胞傳播的細菌、寄生蟲的活動。

外泌體(Exosome)是由細胞分泌而來的微小囊泡,直徑約為30-200nm,形態(tài)也呈現(xiàn)出多樣性。長鏈非編碼RNA(longnon-codingRNA)是一類轉錄本長度超過200nt、不編碼蛋白的RNA。近年來的研究表明lncRNA能在標貫遺傳、轉錄及轉錄后水平上調控基因表達,參與了X染色體沉默、基因組印記以及染色質修飾、轉錄jihuo、轉錄干擾、核內運輸等多種重要的調控過程,與人類疾病的發(fā)生、發(fā)展和防治都有著密切聯(lián)系。lncRNA芯片對lncRNA進行功能研究也被更多的關注,通過設計不同的lncRNA探針,可以更加快速、高通量地篩選出疾病或特定生物學過程中差異表達的lncRNA和mRNA信息,找到lncRNA的靶基因位點深入分析調控機制。不同肝臟疾病中,細胞分泌的外泌體所攜帶的核酸和蛋白組分之間存在差異。

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外泌體的提取方法:免疫磁珠法,這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整,特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設備,但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性,不便進行下一步的實驗。PS親和法,該方法將PS(磷脂酰絲氨酸)與磁珠結合,利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似,獲得的外泌體形態(tài)完整,純度較高。由于不使用變性劑,不影響外泌體的生物活性,外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內注射。PS法可提取相當高純度的外泌體。色譜法,這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設備,應用不寬泛。外泌體作為細胞間信號傳導的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。植物外泌體Dir

利用外泌體將siRNA和抗藥劑等運輸到目標細胞中。唾液提取試劑盒方法

外泌體大小不均可能是由于MVB的限制膜不均勻內陷,導致流體和固體的總含量不同;細胞的微環(huán)境和固有的生物學特性可能會影響外顯體的含量及其生物學標記,如乳腺病細胞及其外泌體的蛋白質組可以顯示來源細胞是上皮樣細胞還是間充質樣細胞;由于細胞表面受體表達的不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導細胞存活,也可能誘導凋亡,或誘導免疫調節(jié)等;異質性也可以基于外泌體起源的組織,包括它們是否來自病細胞,瘤細胞產生的外泌體傳遞致瘤miRNAs明顯促進瘤細胞增殖。唾液提取試劑盒方法