接觸生物標(biāo)志物

來源: 發(fā)布時間:2022-04-22

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramide signal amplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。 簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。 然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。 MSD平臺由于其獨特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,對于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。接觸生物標(biāo)志物

基于luminex平臺的xMAP技術(shù): Luminex :應(yīng)用熒光編碼微球帶有針對不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實驗中可以同時完成多個目標(biāo)分子的分析。 原理: 應(yīng)用微球和流式細胞儀的原理, 微球內(nèi)部含有三種免疫熒光, 通過熒光不同的比例可以區(qū)分 500 種不同的微球。 每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。 因此, 利用微球技術(shù), 可以同時檢測高達 500 個蛋白或基因。 特點: 1、既能檢測蛋白,又能檢測核酸 2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域 3、真正意義的“高通量”檢測,一次檢測100個指標(biāo) 4、在準確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達到相似的水平 IL-15 elisa kit檢測服務(wù)Luminex既能檢測蛋白,又能檢測核酸。

酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進行的技術(shù)。 基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。 測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。?其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標(biāo)儀) 加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。?

單細胞功能組學(xué)(IsoPlexis)技術(shù)優(yōu)勢 >在看似同質(zhì)的細胞亞群內(nèi)研究異質(zhì)性 >利用功能蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)層和免疫細胞比較免疫應(yīng)答情況 >通過多功能強度指數(shù)(PSI)建立參考點 >優(yōu)化試驗以預(yù)測區(qū)分應(yīng)答者和非應(yīng)答者 >表征導(dǎo)致身體狀況 / 應(yīng)答的生物學(xué)和功能驅(qū)動因素 技術(shù)原理 采用微流控技術(shù),通過 12,000 個亞納升級別的微室同時捕獲上千個單細胞。搭配IsoCode 芯片抗體條形碼技術(shù),捕獲每個小室中單個活細胞分泌的多重蛋白質(zhì),或者對單細胞裂解后釋放出的多種磷酸化蛋白進行捕獲,然后通過基于 ELISA 原理的全自動化蛋白檢測技術(shù),捕獲多重蛋白的熒光信號,一次可采集多達 30 種以上的功能蛋白質(zhì)。在檢測中從每個單細胞獲得的蛋白質(zhì)組信號將無縫傳輸?shù)?IsoSpeak 生信分析軟件,進行全自動分析和可視化呈現(xiàn),并可直接用于文章發(fā)表。LabEx提供MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺服務(wù)!

LUMINEX常見問題及解答(二) 6) 客戶自己提供抗體,是否可以進行LUMINEX檢測? Luminex和ELISA檢測試劑都需要兩個配套的特異性抗體。我們公司具有開發(fā)Luminex試劑盒的經(jīng)驗。但是,需要一系列的開發(fā)工作才能保證結(jié)果的特異性、重復(fù)性和可靠性。 7) 除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測? 可以用于基因表達,基因多態(tài)性和HLA配型分析。 8) 如何判定 LUMINEX數(shù)據(jù)表達水平差異有無意義? 表達差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計服務(wù)。 9) LUMINEX實驗和流式細胞儀的優(yōu)劣比較? Luminex技術(shù)是流式細胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測技術(shù), 檢測對象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細胞儀主要用于檢測整體細胞表面或細胞內(nèi)的蛋白表達情況。Luminex檢測蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測技術(shù)。普通流式細胞儀每次只能檢測幾種蛋白分子,而且檢測速度較慢,不適合高通量分析。 由此可見,兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。 細胞因子檢測是一個強大的工具,通過定制識別產(chǎn)生積極反應(yīng)的細胞因子的獨特組合。msd多因子檢測儀

LabEx MSD提供了更為便捷快速的實驗流程,通常只需4-5小時,即可完成整個檢測流程。接觸生物標(biāo)志物

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