細(xì)胞分選流式檢測服務(wù)

來源: 發(fā)布時間:2022-06-14

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行的技術(shù)。基本原理:它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于訂量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強(qiáng)。LabEx提供多音字檢測服務(wù)!細(xì)胞分選流式檢測服務(wù)

液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)特點(diǎn):多重檢測:理論上可同時檢測100種生物靶標(biāo)。節(jié)省樣品:只需低至25μl的樣品體積。高靈敏度:精確定量下限低至0.1pg/mL。應(yīng)用范圍應(yīng)用領(lǐng)域:免疫、炎癥、心血管疾病、腫塊物研究、腎、代謝、神經(jīng)、細(xì)胞間作用。分析物類型:細(xì)胞因子、炎癥因子、趨化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、腫塊物標(biāo)記物、基質(zhì)金屬蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。其他應(yīng)用:信號通路、重大疾病相關(guān)、Biomarker開發(fā)、臨床應(yīng)用。sonic hedgehog信號通路檢測服務(wù)LabEx現(xiàn)有MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式及ELISA等實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺。

Q:樣本處理方案?A:血清:不含抗凝劑的**管**,室溫靜置2小時(避免震動,防止溶血),離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復(fù)凍存血漿:含抗凝劑(EDTA、肝素,具體采取哪種抗凝劑,參考說明書)的**管**,,離心20min(4℃,2000g),取上清,建議再一次離心和取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復(fù)凍存細(xì)胞裂解液:收集細(xì)胞,PBS清洗后,離心10min(1000g,4℃),棄去上清,加入適量裂解液(107細(xì)胞對應(yīng)200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存組織裂解液:適量RIPA裂解液加入組織中(10mg對應(yīng)100-200ul裂解液),組織破碎器處理組織至勻漿(冰上處理),放置于4℃冰箱(20min),離心10min(3000g,4℃),取上清,建議再一次離心和取上清,測定BCA總蛋白濃度,-80℃保存細(xì)胞上清:離心,取上清,建議分裝后-80℃凍存,避免反復(fù)凍存

液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)流式熒光,又稱懸浮陣列、液相芯片等,是近20多年逐漸發(fā)展起來的多指標(biāo)聯(lián)合診斷技術(shù)。該技術(shù)以熒光編碼微球?yàn)橹行?集流式原理、激光分析、高速數(shù)字信號處理等多種技術(shù)于一體,多指標(biāo)并行分析,可一管同時準(zhǔn)確定量檢測2-100種不同的生物分子;具有高通量、高靈敏度、并行檢測等特點(diǎn);可用于免疫分析、核酸研究、酶學(xué)分析、受體、配體識別分析等多方面、多領(lǐng)域的研究?;驹恚簯?yīng)用微球和流式細(xì)胞儀的原理,微球內(nèi)部含有三種免疫熒光,通過熒光不同的比例可以區(qū)分100種不同的微球。每種微球可以用來檢測一種不同的蛋白或基因。因此,利用微球技術(shù),可以同時檢測高達(dá)100個蛋白或基因。Luminex技術(shù)的測量結(jié)果在準(zhǔn)確度、精確度、靈敏度方面與ELISA均可達(dá)到相似的水平。Luminex應(yīng)用的熒光編碼微球帶有針對不同目標(biāo)分子的特異性抗體,不同的微球在一定程度上可以自由組合,這樣在一次實(shí)驗(yàn)中可以同時完成多個目標(biāo)分子的分析。多目標(biāo)分子的同時測定可以減少生物樣品的消耗量,節(jié)省成本和測定時間,并且使多種目標(biāo)分子之間相關(guān)性的分析更加準(zhǔn)確。LabEx提供液態(tài)流式技術(shù)(Luminex)服務(wù)!

蛋白分析實(shí)驗(yàn)技術(shù)1、MSD超敏電化學(xué)發(fā)光平臺針對550位北美和歐洲的生物醫(yī)藥研究人員的報(bào)告中顯示,基于電化學(xué)發(fā)光技術(shù)的MSD(MesoScaleDiscovery)是較受歡迎的5大免疫分析品牌之一??蓪esternBlot從16小時縮短至4.5小時。基本原理:電化學(xué)發(fā)光是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng),是電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光兩個過程的完美結(jié)合。MSD電化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)使用SULFO-TAGTM標(biāo)記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學(xué)作用激發(fā)SULFO-TAGTM標(biāo)記物發(fā)出強(qiáng)光。多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),可以分批次檢測。信號通路檢測服務(wù)

為啥高分的文章用的都在做細(xì)胞因子的檢測?細(xì)胞分選流式檢測服務(wù)

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。簡單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉,共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測結(jié)果。細(xì)胞分選流式檢測服務(wù)

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