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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-06

Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測(cè)抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測(cè)時(shí),一束激光照射磁珠上的熒光,識(shí)別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測(cè)哪種細(xì)胞因子,從而實(shí)現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)檢測(cè)抗體,同步識(shí)別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過另一束激光照射進(jìn)行信號(hào)放大檢測(cè),實(shí)現(xiàn)“定量”作用。LabEx 藥物篩選平臺(tái):激酶抑制劑篩選,免疫檢查點(diǎn),GPCR,抗體藥研發(fā),蛋白互作。YKL40

Luminex——液相芯片檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)特點(diǎn):1、既能檢測(cè)蛋白,又能檢測(cè)核酸。2、既能用于臨床,又能用于多學(xué)科科研領(lǐng)域。3、真正意義的“高通量”檢測(cè),一次檢測(cè)100個(gè)指標(biāo)。Luminex——液相芯片檢測(cè)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)適宜領(lǐng)域:1、臨床:腫塊物標(biāo)記物檢測(cè)-流式熒光免疫法HPV的檢測(cè)-流式熒光雜交法2、疾控系統(tǒng):流行病監(jiān)測(cè)等3、血站系統(tǒng):HLA分型檢測(cè)4、自身免疫診斷相關(guān)檢測(cè)、心血管疾病相關(guān)因子檢測(cè)、糖尿病指標(biāo)檢測(cè),骨代謝檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)等Galectin-3LabEx提供酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)服務(wù)!

LUMINEX常見問題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開發(fā),臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測(cè)需要10ul,每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè),制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測(cè)目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測(cè)可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性?檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來源于美國大公司,產(chǎn)品經(jīng)過了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測(cè)公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。

多重?zé)晒饷庖呓M化,主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù),TSA即酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)(Tyramidesignalamplification),是一類利用辣根過氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。該技術(shù)可與高性能染料AlexaFluor、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測(cè)系統(tǒng)相兼容。簡(jiǎn)單來說,用這種方法做多重免疫熒光是利用二抗上帶有的HRP(而不是直接偶聯(lián)熒光素),來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化,跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價(jià)偶聯(lián),使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后微波處理,前一輪非共價(jià)結(jié)合的抗體被洗掉,共價(jià)結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個(gè)一抗來第二輪孵育,周而復(fù)始。等到所有抗體孵育結(jié)束,熒光素都結(jié)合好后,然后去檢測(cè)結(jié)果。LabEx 多因子檢測(cè)平臺(tái):抗體芯片,液相芯片,電化學(xué)技術(shù)為主的多種檢測(cè)技術(shù)。

流式多因子檢測(cè)技術(shù)(CBA)微球免疫分析系統(tǒng)CBA(CytometricBeadArray)是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法,它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。CBA是種結(jié)合流式細(xì)胞儀熒光檢測(cè)和微球免疫分析的應(yīng)用技術(shù),可以輕松的在短時(shí)間內(nèi),同時(shí)檢測(cè)多種蛋白,其作用原理利用熒光強(qiáng)度不同的微球,上面帶有可以辨認(rèn)特定蛋白的抗體(captureantibody),與樣本(例如血清、血漿、培養(yǎng)上清液、細(xì)胞裂解液等)及PE檢測(cè)抗體(detectionantibody)作用后,以流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,根據(jù)PE熒光強(qiáng)度的不同用FCAPArray軟件進(jìn)行分析和標(biāo)準(zhǔn)品做比對(duì)后,可進(jìn)行樣本內(nèi)特定,蛋白的定性或定量。CBA具有以下優(yōu)點(diǎn):每次檢測(cè)需25-50ul樣本;靈敏度可達(dá)0.274pg/ml時(shí)間t夬速,需3-4小時(shí),快速上樣可同時(shí)測(cè)定30種蛋白,實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性高利用FCAPArray軟件,不論樣本數(shù)目多少,可快速分析完成分析LabEx多因子檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用。IL17F

MSD平臺(tái)由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號(hào)予以排除,對(duì)于各類生物學(xué)樣本的兼容度高。YKL40

問:因子檢測(cè)技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計(jì)算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),是否可以分批次檢測(cè)?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會(huì)浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會(huì)造成浪費(fèi)。YKL40

上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司總部位于古丹路15號(hào)18號(hào)樓4樓,是一家從事生物科技、生物制品、醫(yī)藥科技領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),檢驗(yàn)技術(shù)的研發(fā),從事貨物及技術(shù)的進(jìn)出口業(yè)務(wù),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)室耗材與設(shè)備的銷售。 【依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項(xiàng)目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營(yíng)活動(dòng)】的公司。樂備實(shí)生物擁有一支經(jīng)驗(yàn)豐富、技術(shù)創(chuàng)新的專業(yè)研發(fā)團(tuán)隊(duì),以高度的專注和執(zhí)著為客戶提供標(biāo)志物篩查,多因子檢測(cè),Luminex檢測(cè),MSD技術(shù)服務(wù)。樂備實(shí)生物致力于把技術(shù)上的創(chuàng)新展現(xiàn)成對(duì)用戶產(chǎn)品上的貼心,為用戶帶來良好體驗(yàn)。樂備實(shí)生物始終關(guān)注醫(yī)藥健康行業(yè)。滿足市場(chǎng)需求,提高產(chǎn)品價(jià)值,是我們前行的力量。