LUMINEX常見(jiàn)問(wèn)題及解答(一)1)LUMINEX應(yīng)用于哪些領(lǐng)域?生物醫(yī)學(xué)研究,生物標(biāo)記物開(kāi)發(fā),臨床檢測(cè)等領(lǐng)域。Luminex技術(shù)主要用于蛋白和核酸檢測(cè)分析。2)LUMINEX敏感性如何?靈敏度取決于開(kāi)頭的質(zhì)量。對(duì)于同樣的抗體對(duì),Luminex檢測(cè)的靈敏度高于ELISA技術(shù)。一般檢測(cè)靈敏度在pg級(jí)。3)對(duì)不同類型的樣品制備和樣品量的要求是怎樣的?血清、血漿是常用的樣本,每次檢測(cè)需要10ul,每次可以檢測(cè)多個(gè)蛋白。從各種細(xì)胞或組織中提取的蛋白也可以用Luminex技術(shù)檢測(cè),制備方法與ELISA、WesternBlot完全一樣。4)一般可以檢測(cè)到多少基因或蛋白的表達(dá)信息?檢測(cè)蛋白和基因的數(shù)目主要取決于試劑盒。蛋白質(zhì)檢測(cè)目前可以達(dá)到50個(gè)左右,基因檢測(cè)可達(dá)500個(gè)。5)如何保證檢測(cè)結(jié)果的特異性?檢測(cè)的特異性取決于抗體高特異性。試劑幾乎全部來(lái)源于美國(guó)大公司,產(chǎn)品經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的質(zhì)量控制。同時(shí),我們檢測(cè)公司也有近15年的經(jīng)驗(yàn)、嚴(yán)格的操作程序和質(zhì)量控制體系。LabEx實(shí)驗(yàn)服務(wù)項(xiàng)目涵蓋:基因蛋白細(xì)胞組織四個(gè)層面。細(xì)胞生長(zhǎng)因子的作用
PCRArray技術(shù)服務(wù):PCRArray采用一種高通量的方法利用實(shí)時(shí)定量PCR聚焦信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、生物過(guò)程或疾病研究通路中的一組基因,無(wú)論您感興趣的是生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)、芯片后續(xù)研發(fā)、藥物幵發(fā)、疾病鑒定PCRarray都能實(shí)現(xiàn)您感興趣基因的表達(dá)分析,涵蓋人、小鼠、大鼠、狗、恒河猴、豬、雞、牛、馬、兔、CHO細(xì)胞、果蠅、斑馬魚(yú)等物種的200多條信號(hào)通路,覆蓋中的幾乎任何基因。生命科學(xué)現(xiàn)象和基因之間的關(guān)系都不是孤立的,例如血管生成都有幾十個(gè)或者幾百個(gè)基因參與這些調(diào)控,這些基因之間存在上下游調(diào)控關(guān)系形成一張復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)。我們關(guān)注某個(gè)信號(hào)通路的話就需要對(duì)整個(gè)信號(hào)通路進(jìn)行比較完整的觀察才能的到準(zhǔn)確的結(jié)論。PCRArray能夠同步對(duì)整個(gè)信號(hào)通路幾十個(gè)乃至上百的基因進(jìn)行觀察,我們檢測(cè)的對(duì)象包括mRNA,miRNA以及IncRNA。RNA的研究對(duì)了解基因調(diào)控、基因敲除、人類疾病防治及生物進(jìn)化探索等都具有重要意義。PBEF多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),可以分批次檢測(cè)。
流式細(xì)胞分析LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺(tái),用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺(tái),助推科研進(jìn)步!流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,F(xiàn)CM)是一項(xiàng)新型的、發(fā)展迅速的生物醫(yī)學(xué)分析技術(shù),它是集激光技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、流體力學(xué)以及細(xì)胞免疫熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的新型高科技細(xì)胞分析技術(shù)。技術(shù)原理流式細(xì)胞儀是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)建立起來(lái)的儀器裝置。它使細(xì)胞或微粒在液流中流動(dòng),逐個(gè)通過(guò)一入射光束,并用高靈敏度檢測(cè)器記錄下散射光及各種熒光信號(hào),從而得以對(duì)粒子進(jìn)行多參數(shù)分析,包括諸如粒子形狀和大小、細(xì)胞周期、細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子、細(xì)菌表面抗原、細(xì)胞DNA內(nèi)含物等。FCM檢測(cè)的粒子一般為活性細(xì)胞,通過(guò)激光光源激發(fā)細(xì)胞上所標(biāo)記的熒光物質(zhì)的強(qiáng)度和顏色以及散射光的強(qiáng)度可以得到細(xì)胞內(nèi)部各種各樣的生物信息。
1)除了蛋白,LUMINEX技術(shù)是否還可以用于其它指標(biāo)的檢測(cè)?可以用于基因表達(dá),基因多態(tài)性和HLA配型分析。2)如何判定LUMINEX數(shù)據(jù)表達(dá)水平差異有無(wú)意義?表達(dá)差異主要取決于標(biāo)本的性質(zhì)和數(shù)量,我們公司為客戶提供專業(yè)的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)服務(wù)。3)LUMINEX實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞儀的優(yōu)劣比較?Luminex技術(shù)是流式細(xì)胞儀和微球相結(jié)合的蛋白、核酸檢測(cè)技術(shù),檢測(cè)對(duì)象是蛋白質(zhì)、DNA等大分子。普通流式細(xì)胞儀主要用于檢測(cè)整體細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)的蛋白表達(dá)情況。Luminex檢測(cè)蛋白和標(biāo)本數(shù)目大,是一種高通量檢測(cè)技術(shù)。普通流式細(xì)胞儀每次只能檢測(cè)幾種蛋白分子,而且檢測(cè)速度較慢,不適合高通量分析。由此可見(jiàn),兩種方法應(yīng)用方向有很大差別。4)如何控制LUMINEX檢測(cè)的質(zhì)量?我們對(duì)每一次檢測(cè)都設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線,并設(shè)定內(nèi)參進(jìn)行校正。我們會(huì)定期做儀器校正,檢測(cè)精密度和重復(fù)性實(shí)驗(yàn)以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性。流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,F(xiàn)CM)是一項(xiàng)新型的、發(fā)展迅速的生物醫(yī)學(xué)分析技術(shù)。
Luminex液相懸浮芯片是基于高通量微孔板的多重檢測(cè)抗體芯片技術(shù)。其基本原理是將高度特異的捕獲單克隆抗體偶聯(lián)到不同熒光標(biāo)記的磁珠上,將不同種類磁珠混合后懸浮于96孔微孔板中。在檢測(cè)時(shí),一束激光照射磁珠上的熒光,識(shí)別磁珠標(biāo)記的捕獲抗體,從而獲知該磁珠可檢測(cè)哪種細(xì)胞因子,從而實(shí)現(xiàn)“定性”作用。進(jìn)一步,通過(guò)加入生物素標(biāo)記的高親和配對(duì)檢測(cè)抗體,同步識(shí)別磁珠抓取的目標(biāo)細(xì)胞因子,形成“三明治”結(jié)構(gòu),并加入SA-PE偶聯(lián)上生物素,通過(guò)另一束激光照射進(jìn)行信號(hào)放大檢測(cè),實(shí)現(xiàn)“定量”作用。LabEx提供 Luminex——xMAP技術(shù)—微球。細(xì)胞因子發(fā)現(xiàn)
LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技術(shù)服務(wù)!細(xì)胞生長(zhǎng)因子的作用
抗體蛋白質(zhì)芯片技術(shù)(Sengenics)優(yōu)勢(shì)1、包被蛋白具有正確折疊的空間結(jié)構(gòu)/芯片表面水凝膠保護(hù)2、特異性蛋白質(zhì)陣列上正確折疊的蛋白質(zhì)可確保構(gòu)象表位,可用于自身抗體結(jié)合(90%的抗體表位是非線性的)。與顯示低信噪比的其他陣列相比,這會(huì)帶來(lái)特定的命中和低背景噪音。3、檢測(cè)限<10pg/ml蛋白質(zhì)陣列可用于以極高的靈敏度檢測(cè)自身抗體,只需要1-10μL血清。檢測(cè)限在10pg/ml范圍內(nèi),線性動(dòng)態(tài)范圍至少為5個(gè)數(shù)量級(jí)。4、高重復(fù)性Sengenics蛋白質(zhì)陣列使用多個(gè)陽(yáng)性和陰性對(duì)照來(lái)測(cè)量研究和批次內(nèi)和之間的重復(fù)性。下圖顯示在比較兩個(gè)不同批次中的6524個(gè)蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)點(diǎn)的自身抗體水平時(shí),0.97以上的近乎完美的Pearson相關(guān)性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白質(zhì)折疊技術(shù)用于創(chuàng)建具有一致性的蛋白質(zhì)陣列。下圖顯示了Immunome蛋白質(zhì)陣列的蛋白質(zhì)內(nèi)復(fù)制變異系數(shù)(CV%)百分比。Immunome的平均CV%為7.2%。細(xì)胞生長(zhǎng)因子的作用
上海樂(lè)備實(shí)生物技術(shù)有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè),積極探索行業(yè)發(fā)展,努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。樂(lè)備實(shí)生物是一家有限責(zé)任公司(自然)企業(yè),一直“以人為本,服務(wù)于社會(huì)”的經(jīng)營(yíng)理念;“誠(chéng)守信譽(yù),持續(xù)發(fā)展”的質(zhì)量方針。公司擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),具有標(biāo)志物篩查,多因子檢測(cè),Luminex檢測(cè),MSD技術(shù)服務(wù)等多項(xiàng)業(yè)務(wù)。樂(lè)備實(shí)生物將以真誠(chéng)的服務(wù)、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品,為彼此贏得全新的未來(lái)!