產(chǎn)生組織切片非特異性染色的原因有哪些?如何解決?1)、抗體孵育時(shí)間過長、抗體濃度高易增加背景著色。這可通過縮短一抗/二抗孵育時(shí)間、稀釋抗體來控制。這是尤其重要的一條。2)、一抗用多克隆抗體易出現(xiàn)非特異性著色,建議試用單克隆抗體看看。3)、內(nèi)源性過氧化物酶和生物素在肝臟、腎臟等組織含量很高(含血細(xì)胞多的組織),需要通過延長滅活時(shí)間和增加滅活劑濃度來降低背景染色;4)、非特異性組分與抗體結(jié)合,這需要通過延長二抗來源的動物免疫血清封閉時(shí)間和適當(dāng)增加濃度來加強(qiáng)封閉效果;5)、DAB孵育時(shí)間過長或濃度過高;6)、PBS沖洗不充分,殘留抗體結(jié)果增強(qiáng)著色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤為重要;7)、標(biāo)本染色過程中經(jīng)常出現(xiàn)干片,這容易增強(qiáng)非特異性著色。多因子技術(shù)可同時(shí)檢測多個(gè)樣本的多個(gè)指標(biāo),如通路中多個(gè)相關(guān)蛋白的共檢測。GranzymeB檢測服務(wù)
LabEx提供抗體芯片技術(shù)服務(wù),您只需提供保存完好的標(biāo)本(組織、細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、血漿),本公司的芯片技術(shù)服務(wù)人員就可替您完成實(shí)驗(yàn)操作與數(shù)據(jù)分析,向您提供由您所選的任何一種芯片的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以為您節(jié)省大量的時(shí)間與精力。蛋白芯片技術(shù)特點(diǎn):作為一種快速、靈敏而又經(jīng)濟(jì)的工具,蛋白芯片能同時(shí)檢測單個(gè)樣品中多種分析物的相對水平。蛋白芯片的使用不需要任何特殊的儀器,也取代了多次免疫沉淀/Westernblot實(shí)驗(yàn)。每個(gè)芯片在設(shè)計(jì)時(shí)都利用了精心挑選的捕獲抗體,它們在硝酸纖維素膜上重復(fù)點(diǎn)樣兩次。經(jīng)多項(xiàng)研究證實(shí),蛋白芯片能簡化鑒定蛋白所需的篩選過程。蛋白芯片高通量定性分析試劑盒比WB的靈敏度高100倍;更有大規(guī)模多分子高通量篩選作用,通過監(jiān)控蛋白水平和一些蛋白翻譯后修飾的變化,能迅速靶定目標(biāo)分子,以便進(jìn)一步的研究。IL-33檢測服務(wù)LabEx提供 MSD---電化學(xué)發(fā)光技術(shù)。
問:因子檢測技術(shù)有哪些?答:Array抗體芯片、CBA、luminex、MSD。問:多因子實(shí)驗(yàn)適用的樣本類型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血漿)、Cell/Tissuelysate(細(xì)胞/組織裂解液)、CerebrospinalFluid(腦脊液)、支氣管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。問:如何計(jì)算96孔板可做多少樣本?答:標(biāo)曲16孔,預(yù)實(shí)驗(yàn)8孔,剩余72孔,單孔可做72樣本,復(fù)孔可做36樣本;問:多因子實(shí)驗(yàn)的正式實(shí)驗(yàn),是否可以分批次檢測?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:試劑盒須在一個(gè)月內(nèi)用完,否則標(biāo)準(zhǔn)曲線要重做,重做就要用到試劑,那樣本就樣減少。(2)Luminex:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑也要在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期。(3)MSD:每次都必須要做標(biāo)準(zhǔn)曲線,會浪費(fèi)試劑和孔板,同時(shí)試劑在一個(gè)月內(nèi)用完,防止試劑過期,每次送樣+標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)量,建議是4的倍數(shù),否則會造成浪費(fèi)。
腫塊物(瘤類)發(fā)病機(jī)制中的細(xì)胞因子(內(nèi)源性及相關(guān)功能):Il-1(白介素1):腫塊物侵襲和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化學(xué)誘導(dǎo)的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化學(xué)致腫塊物作用IL-15(白介素15):促進(jìn)自然殺傷T細(xì)胞白血病IFN-γ:抑制化學(xué)致腫塊物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制腫塊物M-CSF:促進(jìn)乳腺腫塊物侵襲GM-CSF:抑制淋巴瘤和腫塊物TNF-α:化學(xué)誘發(fā)的皮膚腫塊物所需MIF:抑制p53腫塊物抑制功能TGF-β:抑制結(jié)腸腫塊物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤發(fā)生LabEx多因子檢測技術(shù)--液相懸浮技術(shù)。
抗體芯片介紹:ELISA原理的高通量WB,單一樣品多種分析物的檢測。具有微型化、集成化、高通量的特點(diǎn),可以用于檢測某一特定的生理或病理過程相關(guān)蛋白的表達(dá)豐度,目前主要用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白組學(xué)、腫塊物及其他疾病的相關(guān)研究。R&D的多因子固相抗體芯片?每個(gè)試劑盒可檢測4個(gè)樣本,每個(gè)樣本可同時(shí)檢測多達(dá)119個(gè)分析物,實(shí)驗(yàn)可在一日內(nèi)完成?每個(gè)試劑盒提供4張膜,膜上監(jiān)測點(diǎn)以復(fù)孔的形式包被捕獲抗體和對照抗體?該即用型試劑盒包含抗體膜,檢測抗體和緩沖液等所有組分優(yōu)勢和特點(diǎn)?使用方便,節(jié)省時(shí)間和成本?無需專門設(shè)備?高通量:1天所得到的數(shù)據(jù)相當(dāng)于免疫印跡幾周所得數(shù)據(jù)?樣本類型多樣化?每種試劑盒均驗(yàn)證過多種樣本,如細(xì)胞裂解液,組織裂解液,細(xì)胞培養(yǎng)上清,血清,血漿,唾液,尿液或牛奶等?節(jié)省樣本?獲取相同數(shù)據(jù)點(diǎn)所需樣本量遠(yuǎn)低于WB?比競爭對手抗體芯片所需樣本量更少,獲得的數(shù)據(jù)更多LabEx提供28種抗體芯片,用于人,小鼠和大鼠物種的蛋白檢測相關(guān)服務(wù),我們?yōu)槟峁┩暾膶?shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告,包括數(shù)據(jù)分析結(jié)果,原始數(shù)據(jù)文件,實(shí)驗(yàn)protocol等。LabEx多因子檢測技術(shù)應(yīng)用。超敏多因子電化學(xué)發(fā)光MSD
MSD平臺由于其獨(dú)特的電化學(xué)發(fā)光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質(zhì)的影響更小。GranzymeB檢測服務(wù)
高通量蛋白組學(xué)(Olink)LabEx始終致力于為您的研究需要,提供前沿的多因子技術(shù)平臺,用心服務(wù),現(xiàn)有囊括基因、蛋白、組織、細(xì)胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗體芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12個(gè)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室技術(shù)平臺,助推科研進(jìn)步!產(chǎn)品特點(diǎn):采用獨(dú)有的PEA,ProximityExtensionAssay,鄰位延伸分析技術(shù)檢測蛋白標(biāo)志物。帶有特有的核苷酸序列探針的一對抗體與被檢測蛋白特異性結(jié)合后,正確且鄰位探針通過末端5bp配對堿基互補(bǔ)結(jié)合,在延伸酶的作用下形成雙鏈模板,利用qPCR或NGS進(jìn)行檢測,通過特異性的核苷酸序列信號來反應(yīng)檢測蛋白質(zhì)的含量。GranzymeB檢測服務(wù)
上海樂備實(shí)生物技術(shù)有限公司是一家有著先進(jìn)的發(fā)展理念,先進(jìn)的管理經(jīng)驗(yàn),在發(fā)展過程中不斷完善自己,要求自己,不斷創(chuàng)新,時(shí)刻準(zhǔn)備著迎接更多挑戰(zhàn)的活力公司,在上海市等地區(qū)的醫(yī)藥健康中匯聚了大量的人脈以及**,在業(yè)界也收獲了很多良好的評價(jià),這些都源自于自身不努力和大家共同進(jìn)步的結(jié)果,這些評價(jià)對我們而言是比較好的前進(jìn)動力,也促使我們在以后的道路上保持奮發(fā)圖強(qiáng)、一往無前的進(jìn)取創(chuàng)新精神,努力把公司發(fā)展戰(zhàn)略推向一個(gè)新高度,在全體員工共同努力之下,全力拼搏將共同上海樂備實(shí)生物供應(yīng)和您一起攜手走向更好的未來,創(chuàng)造更有價(jià)值的產(chǎn)品,我們將以更好的狀態(tài),更認(rèn)真的態(tài)度,更飽滿的精力去創(chuàng)造,去拼搏,去努力,讓我們一起更好更快的成長!