放射免疫法以不同稀釋度的抗血清與質(zhì)量標記抗原混合，孵育24h后，測定其結合率。通常以結合率為50%的血清稀度和為效價。如某抗血清的結合率為50%時的稀釋度為1:15000,則該血清的效價就是1:15000?？寡宓男r，除由抗血清本身的性質(zhì)決定外，還受標記抗原的質(zhì)量、孵育時間，所用稀釋液的成分及其pH等因素的影響，在工作中必須引起注意。(2)雙向擴散法利用大分子抗原和抗體在瓊脂平板上擴散，兩者在相交處產(chǎn)生沉淀線，以觀察和判斷抗血清中是否有抗體及其濃度。球脂板的制備:100mlpH7.1的磷酸鹽緩沖液加到15g的瓊脂內(nèi)，于水浴中加溫攪拌，使瓊脂完全溶解，趁熱用紗布過濾，待溶液冷卻到65°C左右時，加入疊氮鈉(NaN3)，使其在溶液中的濃度為0.1%。用移液管把瓊脂放在干凈平皿或玻片上，約3mm厚，待其冷卻，完全凝固后，用打孔器打孔。中間孔內(nèi)加適量抗原(容量為50ul)周圍各孔內(nèi)分別加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀釋的抗血清，37°下孵育24h，觀察有無沉淀線產(chǎn)生，以判斷血清的稀釋度。動物血清供應細胞生計和增殖所必需的生長調(diào)理因子。湖北豬血清生產(chǎn)廠
IR（輻照）血清輻照型血清是將正常血清經(jīng)過三次無菌過濾后再用鈷-60輻射滅菌制得的血清。輻照血清是細胞培養(yǎng)中比較重要的天然培養(yǎng)基，它具有促進細胞增殖和誘導細胞分化等的生物學功能其質(zhì)量的好壞直接影響著生物制品的安全性。功能：提供對維持細胞指數(shù)生長的，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他等，能結合或調(diào)變它們所結合的物質(zhì)活力。是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保護細胞不受傷害。應用適用于正常封閉與增殖旺盛的常規(guī)細胞系的培養(yǎng)等。陜西豬血清哪家好血清還可以緩沖培養(yǎng)基，抑制蛋白水解酶，增加培養(yǎng)基的粘度，降低在移液或攪拌時造成的剪切力。
血清保存方法1.如何保存血清？血清應該在-20℃保存。如果一次無法用完一瓶，應該無菌分裝后冷凍保存。注意避免反復凍融。2.為什么儲存在冰箱中的血清會出現(xiàn)沉淀？有些胎牛血清產(chǎn)品沒有預老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在－20℃儲存胎牛血清，避免反復凍融。凍融方法正確解凍方法：將血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小時，使之緩慢部分溶解，然后再放在室溫下使之全溶。注意：溶解過程中要每隔一段時間緩慢地搖動血清使之混勻。切記：避免37℃水浴。
常規(guī)細胞培養(yǎng)需要添加血清來維持細胞的增殖能力，盡管血清可以滿足一般細胞培養(yǎng)需求，但在進行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標記特定成分進行研究的實驗中，仍需要去除某些特定的成分，常用的去除方法有透析。透析是將血清循環(huán)通過中空纖維，并在血清中補充生理鹽水以維持滲透壓，移除分子量小于10,000Da的小分子，如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于關注小分子濃度的特殊研究，包括：研究蛋白質(zhì)組學、同位素標記、細胞信號傳導和報告基因分析、報告基因細胞系的篩選等。動物不同，分離出的血清也會有所不同。
1989年左右，也有國外學者建議用豬血清取代牛血清，用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞（見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》），原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測，造成假陽性反應。其他動物源血清兔血清：兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集，可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清。山羊血清：多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，質(zhì)量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清：從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定 物種來源相同的血清，根據(jù)采集血時間、血源品質(zhì)也會分出不同的類別。江蘇胎牛血清生產(chǎn)廠
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配制方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi)，用超聲波使之混勻，高壓滅菌，置4°C下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積完全或不完全佐劑與免疫原溶液混合，用振蕩器混勻成乳狀，也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨，均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液其中加卡介苗3~4mg/ml或不加加完后再繼續(xù)研磨成乳劑，潤十水水上10min內(nèi)完全不擴散為止。為避免損失抗原，亦可用一注射器裝抗原液，另一注射器裝佐劑，二者以聚乙烯塑料管連接，然后二者來回反復抽吸，約數(shù)十分鐘后即能完全乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。免疫方法抗原劑量，頭次劑量為300~500ug，加強免疫的劑量約為頭次劑量為1/4左右。每2~3周加強免疫一次。加強免疫時用不完全佐劑，頭次免疫時皮下注射百日咳疫苗0.5ml,加強免疫時不必注射百日咳疫苗。在第2次加強免疫后2周，從耳緣靜脈取2~3ml血，制備血清，檢測抗體效價。如未達到預期效價，需再進行加強免疫，直到滿意時為止。當抗體效價達到預期水平時，即可放血制備抗血清。湖北豬血清生產(chǎn)廠
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