瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀.一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破壞而影響血清質量.相同動物細胞代謝進程中有許多物質是動物細胞所必需而本身無法組成的的,例如堿基、氨基酸等微量物質。四川豬血清價格
組份與比例不同胎牛血清和新生牛血清兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質等組份與比例不同。03用途與用法不同某些細胞必需胎牛血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時,應先將血清至于2-8℃冰箱,并經常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應按用量分裝并于-20℃保存,避免反復凍融。貴州馬血清供應商采集血液樣品后,傾斜30-45度角放置好。
1989年左右,也有國外學者建議用豬血清取代牛血清,用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細胞(見《動物檢疫》1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學診斷的假陽性反應》),原因是牛血清中的白蛋白會干擾非洲豬瘟抗體的檢測,造成假陽性反應。其他動物源血清兔血清:兔血清通常從六個月或更小的動物身上收集,可用于與BSA結合用作免疫細胞化學[1]和免疫組織化學中的封閉血清。山羊血清:多用做封閉液,也有一些研究人員發(fā)現,質量的山羊血清可用于某些細胞的培養(yǎng)。雞血清:從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素B12的放射性同位素稀釋測定
血清是指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營養(yǎng)物質、提供各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷、對培養(yǎng)中的細胞起到某些保護作用。血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異(胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質比較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分比較少)。血清還可以緩沖培養(yǎng)基,抑制蛋白水解酶,增加培養(yǎng)基的粘度,降低在移液或攪拌時造成的剪切力。
馬血清10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應答, 常與牛血清結合或單獨作為哺乳動物細胞培養(yǎng)的補充培養(yǎng)基。豬血清豬血清在染色體研究中表現非常出色,可用于淋巴細胞培養(yǎng), 疫苗生產(生產支原體), 中和脂質體包裹的腺相關病毒(AAV), 用于誘導大鼠肝纖維化, 作為酶聯免疫吸附試驗(ELISA)中的標準陰性參考。兔血清正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對照。在免疫組織化學和免疫細胞化學方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。羊血清用于生物醫(yī)學研究的大多數細胞系和原代培養(yǎng)物上,FBS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學研究。用作魚類細胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物??沙晒Φ卮嫣ヅQ逶谏L培養(yǎng)基中長期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。碳水化合物,脂肪,生長因子,礦物質及微量元素。上海馬血清生產商
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為什么存放于冰箱中的血清會出現沉淀?如何避免該現象?在2~8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態(tài),在凍融過程中會發(fā)生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現象一般不會影響血清的性能??梢?00g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據需要選擇合適的濾膜孔徑,一般比較常用的是0.22umPES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養(yǎng)基內一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現上述現象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復凍融和融化后的血清在2~8°C條件下長時間放置。四川豬血清價格
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