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為什么儲(chǔ)存在4℃冰箱的血清會(huì)出現(xiàn)沉淀?有些胎牛血清產(chǎn)品沒(méi)有預(yù)老化,儲(chǔ)存在2~8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見(jiàn)的混濁。這應(yīng)該不會(huì)影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲(chǔ)存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物,該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但很普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,取上清液即可加入培養(yǎng)基中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),不影響培養(yǎng)過(guò)程。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過(guò)濾膜。云海生物羊血清,經(jīng)過(guò)精心提取和處理,保留了羊血清中的活性成分,具有很好的生物活性。湖北羊血清生產(chǎn)廠
實(shí)驗(yàn)中很常見(jiàn)的動(dòng)物血清,有牛血清、馬血清、雞血清、兔血清等。其中牛血清的泛用性很強(qiáng),并且因其產(chǎn)量大,價(jià)格相對(duì)實(shí)惠。那么牛血清如何分類?根據(jù)供血牛的生長(zhǎng)狀況不同,牛血清分以下幾類:1、成牛血清(AdultBovineSerum,簡(jiǎn)稱ABS):采自成年牛。2、小牛血清(CalfSerum):采自出生一周以上、一個(gè)月以下的小牛。3、新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡(jiǎn)稱NBCS):采自出生一周內(nèi)的新生牛。4、胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱FBS):采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血,通過(guò)剖腹取胎抽血后,進(jìn)行一系列的工藝處理終獲得。此時(shí)胎牛各臟器正處生長(zhǎng)分化階段,血中含有豐富的生長(zhǎng)發(fā)育因子,是細(xì)胞培養(yǎng)效果很好的血清,一旦胚胎接近發(fā)育完全,生長(zhǎng)因子便會(huì)消失。黑龍江動(dòng)物血清培養(yǎng)基云海生物雞血清,適用于多種細(xì)胞類型培養(yǎng),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
檢測(cè)的注意事項(xiàng)1樣品采集在采取豬血清時(shí),有幾個(gè)注意事項(xiàng),一是要采取不同階段豬的血清,這樣才可以反應(yīng)在不同階段的抗體水平,從而判定抗體衰減規(guī)律,確定首免日齡,評(píng)價(jià)疫苗效果。第二是各個(gè)階段需要有一定的樣本數(shù)量,個(gè)別豬場(chǎng)在采集血樣時(shí),為了降低檢測(cè)成本,盲目減少血樣數(shù)量,從而導(dǎo)致沒(méi)有代表性,一般情況下,每個(gè)階段的樣本數(shù)量可以選擇4-6份。第三,每份樣品的血樣,不能低于1毫升,否則可能導(dǎo)致樣本太少難以開(kāi)展檢測(cè)。第四,采集的樣本,盡量在冷藏狀態(tài)嚇保存。
為什么血清中會(huì)有沉淀生成,主要成分是什么,會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)有什么影響?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),胎球蛋白[1],脂蛋白,冷凝集素,玻連蛋白,磷酸鈣(顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長(zhǎng)期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。預(yù)防:非必要,不用熱滅活;避免反復(fù)凍融;-20℃保存;4℃全融(期間間斷搖晃均勻);2000rpm離心5分鐘(不建議用0.2um濾膜過(guò)濾),取上清使用。血清存在批間差嗎?因?yàn)檠鍋?lái)源于動(dòng)物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。每個(gè)批號(hào)的組分和百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。建議先進(jìn)行批號(hào)測(cè)試,篩選出合適批號(hào),購(gòu)買(mǎi)半年甚至一年以上的用量,避免批間差造成實(shí)驗(yàn)波動(dòng)(胎牛血清在-20℃保存可達(dá)5年)。山東云海生物豬血清,適用于多種細(xì)胞類型培養(yǎng),滿足不同實(shí)驗(yàn)需求。
血清出現(xiàn)沉淀的問(wèn)題:血清非人工產(chǎn)品,有些東西沉淀出來(lái)系自然現(xiàn)象;纖維蛋白原、鹽析出,如磷酸鈣等;膽固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情況下還會(huì)增加:熱滅活、37℃培養(yǎng)(常常由此引發(fā)歧異)、反復(fù)凍融、熔化中沒(méi)有搖勻、gamma照射、長(zhǎng)期存放在2-8°C。另外我們還發(fā)現(xiàn):血清加入到RPMI1640中時(shí),沉淀往往會(huì)發(fā)生或增加:pH升高時(shí),沉淀會(huì)增加;在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因?yàn)榕囵B(yǎng)基的蒸發(fā)也會(huì)導(dǎo)致沉淀的增加。如何避免血清中產(chǎn)生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。選擇山東云海生物的胎牛血清,您將獲得高質(zhì)量的原材料,從而提高實(shí)驗(yàn)的可靠性和成功率。鄭州馬血清購(gòu)買(mǎi)
我們的動(dòng)物血清具有較低的價(jià)格,能夠?yàn)槟?jié)省實(shí)驗(yàn)成本,同時(shí)保證產(chǎn)品質(zhì)量,是您實(shí)驗(yàn)室的理想選擇。湖北羊血清生產(chǎn)廠
血清的主要成分,蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長(zhǎng))等;多肽類主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和分裂的生長(zhǎng)因子,主要的生長(zhǎng)因子是血小板生長(zhǎng)因子,還有成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,雖然在血清中含量很少,但對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和分裂也起著重要作用;激丨素類激丨素對(duì)細(xì)胞的作用是多方面的。包括:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長(zhǎng)因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長(zhǎng)激丨素:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。湖北羊血清生產(chǎn)廠