生產(chǎn)重組蛋白的酵母表達(dá)系統(tǒng)兼有原核和高等真核系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn),培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單、生長(zhǎng)速度快、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)便、成本低廉,蛋白翻譯后能進(jìn)行正確加工、修飾,合理的空間折疊,使得蛋白的可溶性得到提高,是較優(yōu)的重組真核生物蛋白生產(chǎn)制備工具。其中畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)應(yīng)用較多,與其他表達(dá)系統(tǒng)相比,其較強(qiáng)的AOX1(醇氧化酶)、3-磷酸甘油醛脫氫酶、FLD1(醛脫氫酶)等啟動(dòng)子、蛋白穩(wěn)定持久表達(dá)、表達(dá)效率高、可分泌表達(dá)蛋白、雜蛋白少、翻譯后修飾等優(yōu)點(diǎn)使其成為酵母表達(dá)重組蛋白的優(yōu)先選擇。重組蛋白包括各類受體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。大鼠BMP-4重組蛋白
昆蟲(chóng)細(xì)胞是多種重組蛋白的多功能表達(dá)宿主。其較強(qiáng)的折疊能力和較高的培養(yǎng)密度使其成為表達(dá)細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜蛋白和病毒蛋白的理想選擇。2007年,由昆蟲(chóng)細(xì)胞系以病毒樣顆粒(VLPs)的形式生產(chǎn)的病毒疫苗Cervarix被批準(zhǔn)用于人類。除了在疫苗開(kāi)發(fā)方面的潛力外,昆蟲(chóng)細(xì)胞產(chǎn)生的高活性蛋白還應(yīng)用于生物物理學(xué)和生物化學(xué)的各個(gè)學(xué)科,如結(jié)構(gòu)解釋、藥物設(shè)計(jì)、測(cè)定方法建立和診斷試劑開(kāi)發(fā)等等。許多生物廠家利用昆蟲(chóng)細(xì)胞進(jìn)行重組蛋白產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和承包研究項(xiàng)目。普欣BMP-7重組蛋白怎么樣進(jìn)口重組蛋白質(zhì)量好,能保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
重組蛋白疫苗是采用基因工程技術(shù),將病毒的目的抗原基因構(gòu)建在表達(dá)載體上,將已構(gòu)建的表達(dá)蛋白載體轉(zhuǎn)化到細(xì)菌、酵母或哺乳動(dòng)物或昆蟲(chóng)細(xì)胞中,在一定的誘導(dǎo)條件下,表達(dá)出大量的抗原蛋白,再經(jīng)提純并添加佐劑而制成疫苗。重組蛋白疫苗主要有三個(gè)優(yōu)勢(shì):不養(yǎng)活病毒,無(wú)需擔(dān)心病毒外泄,對(duì)生產(chǎn)車(chē)間的生物安全等級(jí)要求低;利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)病毒S蛋白上的RBD蛋白,能實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量、高純度、低成本;重組蛋白疫苗只含RBD蛋白,純度高,安全性更好。
在生物學(xué)研究和蛋白質(zhì)功能研究中,常用的方法之一是重組融合蛋白,簡(jiǎn)稱融合蛋白。重組融合蛋白是由兩個(gè)或兩個(gè)以上原為不同蛋白質(zhì)編碼的基因組合而成的。由融合基因翻譯而來(lái)的包含單個(gè)或多個(gè)多肽的重組融合蛋白獲得了來(lái)自每個(gè)原蛋白的功能特性。融合蛋白有三個(gè)重要的用途:幫助純化克隆基因,報(bào)告表達(dá)水平,作為組織化學(xué)標(biāo)簽,使蛋白質(zhì)在細(xì)胞、組織或有機(jī)體中的位置可視化。在重組蛋白純化中,重組融合蛋白法通常用于親和層析,在親和層析中,將易于純化的蛋白與研究人員希望研究的蛋白相連接。許多蛋白質(zhì)和多肽已被用作融合標(biāo)簽,包括谷胱甘肽- s -轉(zhuǎn)移酶(gst標(biāo)簽)、麥芽糖結(jié)合蛋白(mbp標(biāo)簽)、多組氨酸(his標(biāo)簽)、人類生長(zhǎng)因子、泛素和抗體表位。此外,β-半乳糖苷酶、熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)通常作為部分蛋白表達(dá)和定位的報(bào)告因子。R&D Systems是全球重組蛋白生產(chǎn)的前列。
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常用的生長(zhǎng)因子,細(xì)胞因子和趨化因子,許多科學(xué)家傾向使用進(jìn)口的重組蛋白,如R&D Systems,PeproTech,ProSpec,Gibco等。這就導(dǎo)致可選擇范圍變得很窄。想要增加重組蛋白可選種類,建議選擇國(guó)產(chǎn)重組蛋白。如進(jìn)口品牌賽默飛選擇與國(guó)產(chǎn)品牌義翹神州(Sino Biologcical)合作來(lái)拓展他們的重組蛋白套裝范圍,為用戶提供1500種左右的重組蛋白(Thermo Fisher Scientific與Sino Biological聯(lián)合品牌)。Sino重組蛋白主要有四大優(yōu)勢(shì):(1)包括粘附蛋白,細(xì)胞因子,趨化因子,生長(zhǎng)因子,流感蛋白,蛋白酶,磷酸酶,轉(zhuǎn)錄因子,通道蛋白和受體在內(nèi)的多種選擇;(2)具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格;(3)為每一種蛋白產(chǎn)品提供更多種的包裝尺寸規(guī)格(4)大多數(shù)由哺乳動(dòng)物細(xì)胞所表達(dá),90%由人體細(xì)胞系表達(dá),這樣有助于就可確保蛋白產(chǎn)品具擁有正確的哺乳動(dòng)物翻譯后修飾。重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)有多種。大鼠BMP-4重組蛋白
重組蛋白的生物學(xué)活性定義。大鼠BMP-4重組蛋白
PeproTech Inc. 創(chuàng)立于1988年,始終致力于為生命科學(xué)研究開(kāi)發(fā)重組蛋白及相關(guān)產(chǎn)品,如今已成為能提供多種高質(zhì)量細(xì)胞因子和重組蛋白,相應(yīng)的單克隆、多克隆和生物素標(biāo)記抗體,以及ELISA試劑盒的世界。PeproTech Inc.的產(chǎn)品涵蓋免疫調(diào)節(jié)蛋白、白介素、集落刺激因子、生長(zhǎng)因子、化學(xué)趨化因子、干擾素、脂聯(lián)素、成纖維生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、壞死因子、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素和防御素等諸多生命科學(xué)研究領(lǐng)域中重要的生物活性分子。為跟上當(dāng)今科研發(fā)展、滿足日益增長(zhǎng)的需求,PeproTech Inc.研制出無(wú)動(dòng)物成分的重組蛋白(animal-free recombinant proteins)。這些蛋白是利用專有的無(wú)動(dòng)物成分生產(chǎn)設(shè)施,在嚴(yán)格的無(wú)動(dòng)物成分條件下生產(chǎn)出來(lái),因此痕量的動(dòng)物源性污染引發(fā)潛在問(wèn)題的可能性被降至低,從而完全達(dá)到臨床前研究用標(biāo)準(zhǔn)。大鼠BMP-4重組蛋白
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