普欣BMP-3重組蛋白怎么樣

來源: 發(fā)布時間:2022-07-24

如果一個實驗周期長于一周,或配制的細胞因子或重組蛋白一次用不完,我們就需對細胞因子或重組蛋白進行長期保存。千萬不能將重組蛋白凍干粉用推薦的溶液重懸后直接分裝凍存于-20℃至-80℃。塑料管壁對多數(shù)蛋白均有很好的吸附作用,也就是說溶液中的蛋白很容易粘附在管壁。直接分裝凍存,則溶液中的大部分細胞因子或重組蛋白均會粘附到管壁上,導(dǎo)致溶液中實際溶解的細胞因子或重組蛋白的濃度大為降低,表現(xiàn)為細胞因子或重組蛋白活性的下降。正確的方法是:將已重懸的細胞因子或蛋白用含載體蛋白,如0.1% BSA(牛血清白蛋白),10% FBS(胎牛血清),5% HSA(人血清白蛋白)的溶液將重懸液進一步稀釋,然后分裝凍存于-20℃至-80℃,即常規(guī)冰箱的冷凍室或超低溫冰箱中。不同表達系統(tǒng)所生成的重組蛋白間有何主要區(qū)別?普欣BMP-3重組蛋白怎么樣

ProSpec是一家全球細胞因子蛋白及相關(guān)抗體生產(chǎn)和研發(fā)品牌。ProSpec的生產(chǎn)和研發(fā)工廠位于以色列,專注于蛋白(重組及合成)生產(chǎn)研發(fā),其獨有的細菌和哺乳動物表達和蛋白折疊技術(shù)使其能在17年內(nèi)成長為國際的科研級蛋白供應(yīng)商。目前ProSpec可以提供細胞因子,生長因子,信號蛋白,病毒抗原等近800種重組蛋白和100多種抗體,是世界上提供蛋白品種多的公司之一,其生產(chǎn)工藝和規(guī)模使其可以提供毫克到克級蛋白,價格優(yōu)于同類公司。絕大部分產(chǎn)品是天然成熟型蛋白,而不含有標(biāo)簽蛋白??紤]到大部分研究者希望能更靈活地配制蛋白溶液,ProSpec-Tany絕大部分產(chǎn)品沒有添加保護劑或鹽,這就對工藝提出了更高的要求。同時,ProSpec-Tany絕大部分產(chǎn)品為凍干粉,因此易于運輸和保存。普欣BMP-3重組蛋白怎么樣什么是重組蛋白?如何產(chǎn)生?

不同細胞研究中添加的重組蛋白有所不同。人胚胎干(ES)細胞研究中的重組蛋白主要有,細胞培養(yǎng)用人重組actin A,bFGF,IGF-II等,細胞分化用BMP-4,EGF和HGF。間充質(zhì)干(MSC)細胞研究中的重組蛋白主要有,間充質(zhì)干(MSC)細胞培養(yǎng)和自我更新的生長因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生長因子或細胞因子:BMP-2與TGF-β1。神經(jīng)干細胞(NSC)研究中的重組蛋白主要有,重組EGF,重組bFGF,和重組VEGF,用于神經(jīng)干細胞的擴增。此外,包括BDNF在內(nèi)的多幾種神經(jīng)營養(yǎng)因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可適用于相關(guān)研究。

重組蛋白具有極高的經(jīng)濟價值和科研價值,但是在哺乳動物細胞中使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法將會消耗大量的時間,而傳統(tǒng)的瞬時轉(zhuǎn)染方法,在產(chǎn)量上也難以令人滿意。所以重組蛋白大規(guī)模的瞬時表達技術(shù)是近年來的一個研究熱點,已有報道能放大到 100L反應(yīng)器中生產(chǎn)重組蛋白,產(chǎn)量(分泌型蛋白)可達 1-10mg/L。不過該方法技術(shù)條件要求高,如質(zhì)粒的純度、轉(zhuǎn)染的效率等。哺乳動物細胞表達系統(tǒng)中,重組蛋白的表達水平與許多 因素相關(guān),如轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控元件、RNA剪接過程、mRNA穩(wěn) 定性、基因在染色體上的整合位點、重組蛋白對細胞的毒性作 用以及宿主細胞的遺傳特性等。重組蛋白藥物的發(fā)展動態(tài)。

在生物學(xué)研究和蛋白質(zhì)功能研究中,常用的方法之一是重組融合蛋白,簡稱融合蛋白。重組融合蛋白是由兩個或兩個以上原為不同蛋白質(zhì)編碼的基因組合而成的。由融合基因翻譯而來的包含單個或多個多肽的重組融合蛋白獲得了來自每個原蛋白的功能特性。融合蛋白有三個重要的用途:幫助純化克隆基因,報告表達水平,作為組織化學(xué)標(biāo)簽,使蛋白質(zhì)在細胞、組織或有機體中的位置可視化。在重組蛋白純化中,重組融合蛋白法通常用于親和層析,在親和層析中,將易于純化的蛋白與研究人員希望研究的蛋白相連接。許多蛋白質(zhì)和多肽已被用作融合標(biāo)簽,包括谷胱甘肽- s -轉(zhuǎn)移酶(gst標(biāo)簽)、麥芽糖結(jié)合蛋白(mbp標(biāo)簽)、多組氨酸(his標(biāo)簽)、人類生長因子、泛素和抗體表位。此外,β-半乳糖苷酶、熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)通常作為部分蛋白表達和定位的報告因子。國產(chǎn)重組蛋白品牌有哪些?GMP級重組蛋白銷售

如何長期保存重組蛋白?普欣BMP-3重組蛋白怎么樣

為了保證重組蛋白良好的穩(wěn)定性和生物學(xué)活性,通常加8%(質(zhì)量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑。海藻糖是一種以兩個葡萄糖分子通過 α,α,1,1-糖苷鍵連接的二糖。海藻糖是一種非還原糖,不與氨基酸或蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)。它本身不存在于哺乳動物體內(nèi),但哺乳動物體內(nèi)卻存在分解海藻糖的酶,且海藻糖作為一種小分子的半抗原,哺乳動物對其免疫反應(yīng)性很低。這使得海藻糖對live實驗或異種移植等實驗的干擾極小。海藻糖不僅可以防止蛋白在脫水狀態(tài)下改變其結(jié)構(gòu),更能在高溫、低溫、高滲透壓的條件下保留蛋白的生物學(xué)活性。目前,海藻糖以其高效的蛋白保護性能與相對低廉的價格漸漸代替 BSA,是免疫實驗產(chǎn)品和蛋白類產(chǎn)品添加劑的新寵。普欣BMP-3重組蛋白怎么樣

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