在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,近年來(lái)取得了進(jìn)展。尤其是針對(duì)成熟卵母細(xì)胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學(xué)的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細(xì)胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細(xì)胞,其內(nèi)部包含一個(gè)高度復(fù)雜且精細(xì)的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,這些微管通過(guò)動(dòng)態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細(xì)胞分裂過(guò)程中染色體的正確分離。成熟卵母細(xì)胞的紡錘體對(duì)溫度變化和機(jī)械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過(guò)程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體微管與細(xì)胞內(nèi)的其他細(xì)胞器存在復(fù)雜的相互作用。上海雙折射性紡錘體價(jià)格
胞質(zhì)膜
在動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞分裂結(jié)束時(shí),母細(xì)胞在一個(gè)被稱為“胞質(zhì)分裂”的過(guò)程中分裂成兩個(gè)子細(xì)胞和分區(qū)隔離的染色體。有絲分裂紡錘體控制胞質(zhì)膜上的“胞質(zhì)分裂”事件,但連接這兩個(gè)宏觀結(jié)構(gòu)的機(jī)制一直不清楚。Mark Petronczki及其同事提供了一個(gè)結(jié)構(gòu)和功能分析結(jié)果,他們發(fā)現(xiàn)**紡錘體蛋白(紡錘體中間區(qū)域和中間體中的一個(gè)蛋白復(fù)合物)是有絲分裂紡錘體與胞質(zhì)膜間所缺失的聯(lián)系環(huán)節(jié),這個(gè)聯(lián)系環(huán)節(jié)確?!鞍|(zhì)分裂”過(guò)程的***結(jié)果。本文作者還發(fā)現(xiàn),**紡錘體蛋白的MgcRac***亞單元中的一個(gè)區(qū)域?yàn)橐粋€(gè)“系繩”,它連接到胞質(zhì)膜中的磷酸肌醇脂質(zhì)上。 [4] 香港偏光成像紡錘體卵質(zhì)量評(píng)估在有絲分裂中,紡錘體形成并維持著染色體的穩(wěn)定性。
在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,卵母細(xì)胞的冷凍保存技術(shù)一直是研究的熱點(diǎn),旨在提高女性生育能力的保存與利用。然而,傳統(tǒng)的紡錘體觀察方法往往需要對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色處理,這不僅破壞了細(xì)胞的活性,還限制了對(duì)其發(fā)育潛能的深入評(píng)估。偏光成像技術(shù),特別是Polscope偏振光顯微成像系統(tǒng),通過(guò)利用紡錘體微管結(jié)構(gòu)的雙折射性,實(shí)現(xiàn)了對(duì)紡錘體的無(wú)損觀察。這種技術(shù)無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,能夠在保持細(xì)胞活性的同時(shí),實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)地觀察紡錘體的形態(tài)和變化。這不僅提高了觀察的準(zhǔn)確性和可靠性,還避免了傳統(tǒng)染色方法可能帶來(lái)的細(xì)胞損傷和誤差。
對(duì)卵子進(jìn)行評(píng)估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說(shuō)紡錘體的存在與否,可以用來(lái)評(píng)價(jià)卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過(guò)紡錘體對(duì)我們的卵子進(jìn)行評(píng)估的機(jī)會(huì): (1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對(duì)卵子的紡錘體進(jìn)行觀察,通過(guò)定量分析數(shù)據(jù)對(duì)卵子進(jìn)行分級(jí),挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進(jìn)而提高試管嬰兒的受精率。 (2)胚胎學(xué)家還可以通過(guò)紡錘體來(lái)確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進(jìn)而為體外成熟卵子進(jìn)行評(píng)估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。 (3)由于紡錘體對(duì)環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時(shí),只需要10分鐘的時(shí)間,就會(huì)紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過(guò)程中溫度改變很有可能對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,進(jìn)而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。
綜上所述,通過(guò)***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點(diǎn)不再那么遙遠(yuǎn)。 紡錘體形成的精確性對(duì)于維持生物體遺傳穩(wěn)定性至關(guān)重要。
哺乳動(dòng)物卵母細(xì)胞的紡錘體由微管組成,這些微管結(jié)構(gòu)精細(xì)且高度動(dòng)態(tài),對(duì)溫度、滲透壓和機(jī)械力等外界因素極為敏感。在冷凍過(guò)程中,紡錘體容易因冰晶形成、滲透壓變化或機(jī)械損傷而遭到破壞,導(dǎo)致染色體分離異常,進(jìn)而影響卵母細(xì)胞的發(fā)育潛力和受精后的胚胎質(zhì)量。選擇合適的冷凍保護(hù)劑是減少紡錘體損傷的關(guān)鍵。然而,不同濃度的冷凍保護(hù)劑對(duì)紡錘體的影響各異,且不同哺乳動(dòng)物種類之間也存在差異。因此,需要通過(guò)大量實(shí)驗(yàn)來(lái)優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,以大限度地保護(hù)紡錘體的完整性。紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過(guò)程中分子層面的奧秘。深圳輔助生殖紡錘體Hoechst染料
紡錘體在細(xì)胞分裂中的精確調(diào)控是生物體發(fā)育的基礎(chǔ)。上海雙折射性紡錘體價(jià)格
紡錘體觀測(cè)儀使ICSI更加安全可靠
在進(jìn)行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時(shí),**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細(xì)胞時(shí),通常認(rèn)為,卵母細(xì)胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動(dòng)卵母細(xì)胞使其***極**于6點(diǎn)或12點(diǎn)處,然后在3點(diǎn)處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測(cè)儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預(yù)測(cè)紡錘體的位置。一項(xiàng)研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測(cè)儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細(xì)胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動(dòng),或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學(xué)顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會(huì)損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過(guò)紡錘體觀測(cè)儀,可以精確地對(duì)卵母細(xì)胞中紡錘體的位置進(jìn)行定位,從而避免在ICSI過(guò)程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻(xiàn)報(bào)道,在進(jìn)行ICSI時(shí),觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細(xì)胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學(xué)者發(fā)現(xiàn),有些卵母細(xì)胞在普通光學(xué)顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測(cè)儀這個(gè)“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細(xì)胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。 上海雙折射性紡錘體價(jià)格
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