**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測(cè)方法。目前我國(guó)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室普遍使用人工方法進(jìn)行分析,結(jié)果缺少準(zhǔn)確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法,但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對(duì)精子的活率和活力的分級(jí)主要依賴檢驗(yàn)者的經(jīng)驗(yàn)和主觀判斷,不同的技術(shù)人員分析的結(jié)果有時(shí)相差甚遠(yuǎn),對(duì)精子運(yùn)動(dòng)能力的判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。因此應(yīng)用一種統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)和快速的檢測(cè)方法替代人工方法十分必要。計(jì)算機(jī)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測(cè)中的應(yīng)用49中國(guó)衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析(Computer-aidedSpermAnalysis,CASA)系統(tǒng)逐步取代了人工操作,在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術(shù)彌補(bǔ)了人工方法進(jìn)行**分析的不足。Hamilton Thorne精子分析儀采用先進(jìn)的光學(xué)成像,能夠?qū)崟r(shí)分析精子的動(dòng)力學(xué)參數(shù),提供有效的精子質(zhì)量評(píng)估。北京瀕危物種精子分析精確溫度控制
CASA可將每個(gè)精子的活力按以下分級(jí):(1)前向運(yùn)動(dòng)型(PR):精子運(yùn)動(dòng)活躍、線性運(yùn)動(dòng)或者在較大的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng)。(2)非前向運(yùn)動(dòng)型(NP):所有其他非前向運(yùn)動(dòng)的形式,如精子在較小的范圍內(nèi)運(yùn)動(dòng),精子頭部輕微移位或只觀察到尾部擺動(dòng)。(3)完全不動(dòng)型(IM):精子完全不動(dòng)。CASA系統(tǒng)檢測(cè)的這些參數(shù)有一套標(biāo)準(zhǔn)的術(shù)語。(1)VCL=曲線速度(mm/s)。精子頭沿其實(shí)際的曲線,即在顯微鏡下見到的二維方式運(yùn)動(dòng)軌跡的平均速度。檢測(cè)細(xì)胞活力。(2)VSL=直線速度(mm/s)。根據(jù)精子頭在開始檢測(cè)時(shí)的位置與***所處位置之間的直線運(yùn)動(dòng)的時(shí)間平均速度。(3)VAP=平均路徑速度(mm/s)。精子頭沿其空間平均軌跡移動(dòng)的時(shí)間平均速度。(4)ALH=精子頭側(cè)擺幅度(mm)。精子頭沿其空間平均軌跡側(cè)擺的幅度。以側(cè)擺的最大值或平均數(shù)值表示。(5)LIN=直線性。曲線軌跡的直線性。即VSL/VCL。(6)WOB=擺動(dòng)性。精子頭沿其實(shí)際軌跡的空間平均路徑擺動(dòng)的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性??臻g平均路徑的直線性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打頻率(Hz)。精子曲線軌跡越過其平均路徑軌跡的時(shí)間平均速率。(9)MAD=平均移動(dòng)角度(度)。精子頭沿其曲線軌跡瞬間轉(zhuǎn)折角度的時(shí)間平均***值。美國(guó)魚精子分析STR精子分析儀的出現(xiàn)簡(jiǎn)化了檢驗(yàn)流程,提高了診斷的可靠性,對(duì)于提升男性生殖健康領(lǐng)域的Z療效果具有重要作用。
CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點(diǎn),但是很多因素都會(huì)影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點(diǎn):3.1標(biāo)本的采集與制作(1)采集前禁欲2?7天,禁欲時(shí)間過長(zhǎng)、過短對(duì)**質(zhì)量都有一定影響。(2)容器要清潔。(3)特殊情況下,*可使用專門為采集**設(shè)計(jì)的無毒性避孕套,普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。(4)注意保溫(20?37℃),并于30分鐘內(nèi)送檢驗(yàn)科。(5)標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動(dòng)參數(shù)具有溫度敏感性,因此要求計(jì)數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。(6)密切注意**液化的情況,確保液化時(shí)間準(zhǔn)確,因**樣本隨放置時(shí)間的延長(zhǎng),精子活動(dòng)力及活動(dòng)率有減少的趨勢(shì)。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間,然后進(jìn)行分析。(7)檢測(cè)精子活動(dòng)力,標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的標(biāo)本,通常會(huì)增加碰撞的頻率,并可能由此出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。在這種情況下,建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。
精液常規(guī)是精液常規(guī)檢查的簡(jiǎn)稱;是泌尿外科、男科、生殖科簡(jiǎn)便普及的化驗(yàn)室檢查方法之一。也是婦科經(jīng)常參考使用的重要參數(shù)之一。
精液由精子和精漿組成,其中精子占10%,其余為精漿。它除了含有水、果糖、蛋白質(zhì)和脂肪外,還含有多種酶類和無機(jī)鹽。精液中含有鋅元素。精子精液是由睪丸產(chǎn)生的。精漿由前列腺、精囊腺和尿道球腺分泌產(chǎn)生。精漿里含有果糖和蛋白質(zhì),是精子的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。另外,精漿中還含有前列腺素和一些酶類物質(zhì)。 正常的精液呈乳白色、淡黃色或者無色,每毫升為精液中的精子數(shù)一般在6千萬至2億個(gè)。有活動(dòng)能力的精子占總數(shù)的60%以上?;尉討?yīng)總數(shù)的10%以下。在室溫下精子活動(dòng)力持續(xù)3-4小時(shí)。精液是堿性,女性生殖器內(nèi)部則為酸性。因此,精液進(jìn)入女性內(nèi)部,就會(huì)被中和。 男性精液檢測(cè)主要依賴計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀(computer assistant semen analyses,CASA)。
精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法
1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。
3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml 精子分析儀參數(shù),精子頭側(cè)擺幅度(ALH)?:精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度。慢速運(yùn)動(dòng)精子分析DAP
CASA系統(tǒng)減少了人為因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響,提高了檢測(cè)的客觀性和可重復(fù)性?。北京瀕危物種精子分析精確溫度控制
定量測(cè)定是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)***版及以后版本[1]?對(duì)有關(guān)男科的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。對(duì)計(jì)算機(jī)輔助精子分析進(jìn)行質(zhì)量管理包括:計(jì)算機(jī)本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動(dòng)力變量?其質(zhì)量包括所測(cè)得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯(cuò)和數(shù)據(jù)的正確性及確認(rèn)?以及分析中的標(biāo)準(zhǔn)[2]。
CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實(shí)驗(yàn)室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點(diǎn):⑴在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測(cè)定精子運(yùn)動(dòng)的方法;⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評(píng)估較困難;⑶WHO標(biāo)準(zhǔn)是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ);⑷今后應(yīng)加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)。 北京瀕危物種精子分析精確溫度控制