CASA,即計(jì)算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測(cè),CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng),以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子,適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個(gè)精子,結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí),需精確測(cè)量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。Hamilton Thorne自動(dòng)精子分析儀具有高精度、高效率和自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。廣州前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
1.基本檢查:是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法,不僅是男科實(shí)驗(yàn)室,任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計(jì)數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方法,但計(jì)數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法,伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對(duì)于精子活動(dòng)率大于40%的樣本沒有必要做存活率評(píng)估。與第5版手冊(cè)中淡粉色判讀為活精子不同,明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明,鑒別快速前向運(yùn)動(dòng)精子非常重要。因此,關(guān)于精子活力分級(jí),第6版手冊(cè)建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動(dòng)、慢速前向運(yùn)動(dòng)、非前向運(yùn)動(dòng)和不活動(dòng)4個(gè)活力級(jí)別,但精子活動(dòng)率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(dòng)(PR)、非前向運(yùn)動(dòng)(NP)、不活動(dòng)(IM)3個(gè)活力級(jí)別計(jì)算。第6版手冊(cè)強(qiáng)調(diào),精子形態(tài)學(xué)評(píng)估的價(jià)值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后,還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對(duì)于3%和5%的精子“正?!毙螒B(tài)率的判斷,則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評(píng)估1500個(gè)精子來完成;對(duì)于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液,應(yīng)單獨(dú)計(jì)算并在報(bào)告中注明;南京山羊精子分析WOBHamilton Thorne精子分析儀具有良好的數(shù)據(jù)管理和報(bào)告生成功能,能夠方便用戶查閱和分享分析結(jié)果。
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。
將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能。
七、精子形態(tài)檢查[正常參考值]畸形精子:<10%-15%; 凝集精子:<10%;未成熟精細(xì)胞:<1%。[臨床意義]1.精索靜脈曲張病人的畸形精子增多,提示精子在不成熟時(shí)已進(jìn)入精液,或靜脈回流不暢造成陰囊內(nèi)溫度過高和睪丸組織缺氧,或血液帶有毒性代謝產(chǎn)物從腎或腎上腺靜脈逆流至睪丸,上述原因均有損于精子形態(tài)。2. 精液中凝集精子增多,提示生殖道***或免疫功能異常。3. 睪丸曲細(xì)精管生精功能受到藥物或其他因素影響或傷害時(shí),精液中可出現(xiàn)較多病理性未成熟精細(xì)胞。
八、精液細(xì)胞檢查[正常參考值]白細(xì)胞(WBC):<5個(gè)/HP(高倍鏡視野);紅細(xì)胞(RBC):0-偶見/HP。[臨床意義]1.精液中白細(xì)胞增多,常見于精囊炎、前列腺炎及結(jié)核等。2.精液中紅細(xì)胞增多,常見于精囊結(jié)核、前列腺*等。3. 精液中若查到*細(xì)胞,對(duì)生殖系*有診斷意義。 Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強(qiáng)大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評(píng)估設(shè)備。
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):5、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L。【臨床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,其次是精囊。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來源有關(guān)。現(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪、精囊的功能。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪、精囊功能正常。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,則提示精囊功能障礙,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,果糖含量正常,說明附睪功能障礙,精囊功能正常;而肉堿急劇下降,果糖含量亦減少,表示精囊、附睪功能均發(fā)生障礙。6、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性?!九R床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,可抑制精子的活動(dòng),干擾精子的運(yùn)行,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙。即使已經(jīng)受精,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn)。不育夫婦AsAb陽性者占25%-30%,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷、炎癥、附睪等生殖系***時(shí),系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體。CASA系統(tǒng)通過計(jì)算機(jī)分析精子運(yùn)動(dòng)參數(shù),能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測(cè)方法。計(jì)算機(jī)輔助精子分析LIN
Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能,能夠在短時(shí)間內(nèi)處理大量樣本,提高工作效率。廣州前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
CASA系統(tǒng)在男性生殖能力檢驗(yàn)應(yīng)用中的功能要求和參數(shù)設(shè)置CASA是將現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)技術(shù)和先進(jìn)的圖象處理技術(shù)應(yīng)用于精子質(zhì)量的臨床檢驗(yàn),通過對(duì)精子動(dòng)(靜)態(tài)圖象中精子特性的***分析,為臨床提供有關(guān)精子質(zhì)量各項(xiàng)指標(biāo)的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)。CASA系統(tǒng)一般包括硬件和計(jì)算機(jī)軟件支持系統(tǒng)幾個(gè)部分:(1)相差顯微鏡、恒溫裝置和**技術(shù)板(Makler板、Macro板或MicroCell計(jì)數(shù)池等);(2)高速、高分辨率的攝像機(jī)和電視監(jiān)視器組成的攝像系統(tǒng);(3)計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng)及打印機(jī)打印輸出。廣州前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率