男科實(shí)驗(yàn)室中通常所指的質(zhì)量包含三個(gè)方面:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3]。1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量。工作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4]。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評(píng)定。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上、信息性的、統(tǒng)計(jì)學(xué)的或生物測(cè)量方面的檢查實(shí)驗(yàn)室難于進(jìn)行。IVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件,能夠自動(dòng)識(shí)別和計(jì)算精子的各項(xiàng)參數(shù),減少了人工操作的誤差。馬精子分析W.H.O 4
采集精液前5~7天內(nèi)必須停止性生活,并且不得有**、夢(mèng)遺等情況,還應(yīng)禁煙戒酒,忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。采取精液時(shí)間以晨起為佳,采精前用溫水將雙手、**,尤其是**洗凈??刹捎?*法或電動(dòng)按摩**法引起排精。精液的排出具有一定順序,開(kāi)頭部分來(lái)自前列腺、附睪及壺腹,伴有大量精子,***部分來(lái)自精囊,故應(yīng)收集整份精液,不要遺漏任何部分,尤其是開(kāi)頭部分。正因?yàn)橐讈G失精液的***部分,故不能用體外**法收集精液。盛精液的容器應(yīng)干凈、無(wú)菌、干燥,采精前容器的溫度應(yīng)與室溫相同;瓶子不應(yīng)過(guò)大,但瓶口不應(yīng)過(guò)小,以免將精液射出瓶外;還應(yīng)貼上標(biāo)簽,記錄姓名及取精時(shí)間。在冷天應(yīng)將精液標(biāo)本保溫,放置在貼身內(nèi)衣袋中,不可傾斜或倒置,盡可能在1小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室。香港水生動(dòng)物精子分析重復(fù)性高CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無(wú)***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無(wú)***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):1、精漿果糖測(cè)定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?!九R床意義】(1)精液果糖為0,可見(jiàn)于先天性兩側(cè)輸精管及精囊腺缺如、兩側(cè)輸精管完全阻塞或逆行**。(2)精液果糖降低,常見(jiàn)于精囊炎和雄***分泌不足,果糖不足可導(dǎo)致精子運(yùn)動(dòng)能量缺乏,甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測(cè)定【正常參考值】金氏法:>255nmol·s-1/L【臨床意義】(1)精漿酸性磷酸酶含量增高,常見(jiàn)于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。(2)精漿酸性磷酸酶含量降低,常見(jiàn)于前列腺炎患者。(3)精漿酸性磷酸酶檢測(cè)是法醫(yī)鑒定有無(wú)精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測(cè)定【正常參考值】36.72±21.43U/L?!九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關(guān),其活力不足,可導(dǎo)致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測(cè)定【正常參考值】LDH-X***活性:2620±1340U/L;LDH-X相對(duì)活性:≥0.426?!九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性,是精于運(yùn)動(dòng)獲能的關(guān)鍵酶,該酶檢測(cè)可作為診斷男性不育有價(jià)值的指標(biāo)。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失,精子發(fā)生缺陷時(shí)無(wú)LDH-X形成,少精或無(wú)精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。
定量測(cè)定是醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要保證。WHO1980年出版了男科實(shí)驗(yàn)室手冊(cè)***版及以后版本[1]?對(duì)有關(guān)男科的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了詳細(xì)的闡述。對(duì)計(jì)算機(jī)輔助精子分析進(jìn)行質(zhì)量管理包括:計(jì)算機(jī)本身的軟硬件、CASA分析結(jié)果、工作人員的具體操作幾方面。CASA參數(shù)包括精子數(shù)量和各種活動(dòng)力變量?其質(zhì)量包括所測(cè)得數(shù)據(jù)的可靠性、精確度、如何避免差錯(cuò)和數(shù)據(jù)的正確性及確認(rèn)?以及分析中的標(biāo)準(zhǔn)[2]。
CASA質(zhì)量管理關(guān)系到男科實(shí)驗(yàn)室中**分析的質(zhì)量?具有以下特點(diǎn):⑴在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量和醫(yī)生處置質(zhì)量方面?優(yōu)于其它測(cè)定精子運(yùn)動(dòng)的方法;⑵CASA結(jié)果及結(jié)果質(zhì)量的評(píng)估較困難;⑶WHO標(biāo)準(zhǔn)是醫(yī)生處置質(zhì)量保證的基礎(chǔ);⑷今后應(yīng)加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)。 全自動(dòng)精子分析儀極大提高臨床檢驗(yàn)水平,廣泛應(yīng)用于泌尿科,男性科以及計(jì)劃生育、優(yōu)生優(yōu)育研究等。上海濃度精子分析LIN
Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強(qiáng)大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評(píng)估設(shè)備。馬精子分析W.H.O 4
通過(guò)結(jié)果的生物學(xué)意義對(duì)結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評(píng)估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測(cè)試中表現(xiàn)出較小的可變性時(shí)則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評(píng)估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動(dòng)性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運(yùn)動(dòng)精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報(bào)道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對(duì)**參數(shù)值進(jìn)行比較,其結(jié)果為:采用同一個(gè)測(cè)定池由不同的操作者測(cè)定**參數(shù);變異系數(shù)(CV)是29%?活動(dòng)精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯(cuò)誤是差異的主要來(lái)源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)評(píng)估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來(lái)考察精子運(yùn)動(dòng)性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動(dòng)性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)(授精I(xiàn)VF)的發(fā)展使檢測(cè)精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗(yàn)證CASA測(cè)定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。馬精子分析W.H.O 4