方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評(píng)價(jià)4種計(jì)數(shù)方法的準(zhǔn)確性和精確性,并比較4種方法計(jì)數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計(jì)數(shù)乳膠珠時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計(jì)數(shù)精液時(shí),CellVU計(jì)數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血細(xì)胞計(jì)數(shù)池和Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計(jì)數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細(xì)胞計(jì)數(shù)池、Makler計(jì)數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論:計(jì)數(shù)精液時(shí),CASA系統(tǒng)與CellVU計(jì)數(shù)結(jié)果差異無***性。各實(shí)驗(yàn)室可選擇合適的手工或CASA計(jì)數(shù)方法。該設(shè)備還支持多種分析模式,包括精子濃度、活力、形態(tài)和DNA損傷等參數(shù)的測(cè)量,滿足用戶的多樣化需求。南京馬精子分析VCL
精液一般檢查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)顏色和透明度:正常剛射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黃色。鮮紅色或暗紅色的血精見于生殖系統(tǒng)炎癥、結(jié)核、和**,黃色膿樣精液,見于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鮮的精液排出后數(shù)秒呈粘稠膠凍狀,在精液中纖溶酶的作用下30分鐘后開始液化。如果粘稠度降低呈米湯樣,可能是精子數(shù)量減少,見于生殖系統(tǒng)炎癥,精液不凝固見于精囊阻塞或損傷;如果精液1小時(shí)后不液化,可能是由于炎癥破壞纖溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活動(dòng)力而影響受孕。(4)酸堿度:pH值。正常精液呈弱堿性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的陰道分泌物,pH值小于7或大于8都能影響精子的活動(dòng)和代謝,不利于受孕。 北京馬精子分析DCLCASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。
人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案、快速液氮熏蒸冷凍、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,更具可操作性。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開儲(chǔ)存;對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序;所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng),以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位,傳感器應(yīng)連接警報(bào)器,可通過實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法。該方法的原理是將小體積樣本與無污染液氮直接接觸并快速冷凍,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無菌玻璃化冷凍)中,也可以使用封閉系統(tǒng),不需要無菌的液氮。
檢查具備條件
受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,禁房事5-7天(上次排精到取標(biāo)本間隔時(shí)間至少不得少于100小時(shí)); [1]備大口有蓋清潔干燥容器一個(gè),以**方式獲取精液,一次全部射入容器,蓋上蓋,記錄標(biāo)本離體時(shí)間; 貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗(yàn)室,并向檢驗(yàn)員提供標(biāo)本取出時(shí)間。 精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽踊顒?dòng)情況,精子密度(個(gè)/毫升),精液液化時(shí)間(標(biāo)本取出到精液液化的時(shí)間),不動(dòng)精子(個(gè)/高倍視野)等。見不動(dòng)精子,須染色方可區(qū)分:不活動(dòng)的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗(yàn),仍然找不到精子;方可報(bào)告無精。經(jīng)三次取樣化驗(yàn),結(jié)果仍然找不到精子方可確認(rèn)無精子癥。 在男科和輔助生殖技術(shù)領(lǐng)域,精子質(zhì)量的評(píng)估是診斷和處理的重要環(huán)節(jié)。
精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后,滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。
將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合,用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀釋液至11刻度,振蕩三分鐘,然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi),計(jì)數(shù)二大格(每格面積1平方毫米)之精子數(shù),在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè),則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制:重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用,福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過高而不易吸取時(shí),可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi),稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少,亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的,還有25%是由輸精管道的其他部分來的,因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查,才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來反映睪丸的生精機(jī)能。 通過計(jì)算機(jī)圖像處理功能對(duì)顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識(shí)別和跟蹤計(jì)算,從而得出精子動(dòng)靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。美國前向運(yùn)動(dòng)精子分析VCL
Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂,用戶無需具備專業(yè)知識(shí)也能夠輕松上手使用。南京馬精子分析VCL
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動(dòng)力:指精子活動(dòng)狀態(tài),也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí):①精子活動(dòng)好,運(yùn)動(dòng)迅速,活潑有力,直線向前運(yùn)動(dòng);②精子活動(dòng)較好,運(yùn)動(dòng)速度尚可,游動(dòng)方向不定,呈直線或非直線運(yùn)動(dòng),帶有回旋;③精子運(yùn)動(dòng)不良,運(yùn)動(dòng)遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng),向前運(yùn)動(dòng)能力差;④死精子,精子完全不活動(dòng)。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上,若>40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí),常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動(dòng)力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 南京馬精子分析VCL