**分析是判斷男性生育能力的**基本和**重要的常規(guī)檢測(cè)方法。目前我國(guó)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室普遍使用人工方法進(jìn)行分析,結(jié)果缺少準(zhǔn)確性、客觀性和可比性。雖然WHO于近幾年多次修改并推薦**常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)方法,但仍不能充分克服人為主觀因素的影響。特別是對(duì)精子的活率和活力的分級(jí)主要依賴檢驗(yàn)者的經(jīng)驗(yàn)和主觀判斷,不同的技術(shù)人員分析的結(jié)果有時(shí)相差甚遠(yuǎn),對(duì)精子運(yùn)動(dòng)能力的判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。因此應(yīng)用一種統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)和快速的檢測(cè)方法替代人工方法十分必要。計(jì)算機(jī)計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)在**質(zhì)量檢測(cè)中的應(yīng)用49中國(guó)衛(wèi)生信息管理雜志第8卷第6期輔助精子分析(Computer-aidedSpermAnalysis,CASA)系統(tǒng)逐步取代了人工操作,在男性不育癥臨床診治及科研中CASA技術(shù)彌補(bǔ)了人工方法進(jìn)行**分析的不足。IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
Hamilton Thorne精子分析儀IVOS Ⅰ與IVOS Ⅱ一致性比對(duì)分析
根據(jù)質(zhì)量控制的要求,對(duì)新精子分析系統(tǒng)進(jìn)行性能驗(yàn)證后,應(yīng)與舊系統(tǒng)進(jìn)行一致性評(píng)價(jià),從而保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:選用原有Hamilton Thorne精子分析儀IVOSⅠ為參比儀器,新購儀器IVOSⅡ?yàn)閷?shí)驗(yàn)儀器,對(duì)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)進(jìn)行分析比對(duì)。結(jié)果:兩臺(tái)儀器的方法內(nèi)和方法間離群值檢驗(yàn)、偏倚圖和散點(diǎn)圖的線性關(guān)系和離群值檢測(cè)所有參數(shù)均能符合比對(duì)要求,檢測(cè)結(jié)果具有相關(guān)性;對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器的檢測(cè)結(jié)果適合范圍的檢驗(yàn),當(dāng)其精子濃度r=0.988,前向運(yùn)動(dòng)精子百分率r=0.975,總活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范圍合適;對(duì)預(yù)期偏倚(Bc)的接受性評(píng)價(jià)表明當(dāng)精子濃度在12×10~6/ml,允許總誤差(TEa)為6.67%;當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子百分率<31%,TEa為2.34%,兩項(xiàng)檢測(cè)的Bc上限<1/2允許誤差(Ea),實(shí)驗(yàn)儀器經(jīng)比對(duì)分析顯示符合質(zhì)控要求。結(jié)論:通過比對(duì)分析,得出兩臺(tái)精子分析系統(tǒng)的主要參數(shù)(精子濃度、前向運(yùn)動(dòng)精子百分率、總活力)結(jié)果具有可比性,檢測(cè)結(jié)果一致,可同時(shí)用于臨床標(biāo)本的檢測(cè)。 上海全自動(dòng)化精子分析W.H.O 5該設(shè)備的設(shè)計(jì)緊湊,占用空間小,適合不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室使用。
CASA,即計(jì)算機(jī)輔助精子分析,是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào),相比人工檢測(cè),CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù),如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng),以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示,CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀,通常通過相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子,適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確??煽拷Y(jié)果,操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡,更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀,通常進(jìn)行兩次分析,每次至少200個(gè)精子,結(jié)果通過統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí),需精確測(cè)量精子體積,確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵,每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**,可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面,CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段,尾部缺陷可通過活力評(píng)估。對(duì)于碎片過多或黏稠的**,可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語,如VCL(曲線速度)、VSL(直線速度)等,它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。
CASA系統(tǒng)也可用于精子形態(tài)學(xué)評(píng)估。CASA系統(tǒng)可用來定量分析精子頭部形態(tài)學(xué)、中段甚至主段的形態(tài),可以把精子頭部和中段分類為正?;蛘卟徽?,還可以給出頭部和中段尺度、頭部橢圓率和勻稱性的均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和中位數(shù),以及對(duì)染色的精子頂體區(qū)進(jìn)行測(cè)量[3]。
與人工操作相比,自動(dòng)化系統(tǒng)更具客觀性,精確度和重復(fù)性的潛力[4]。精確度和重復(fù)性不低于7%[5],這優(yōu)于有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員的手工評(píng)估。兩個(gè)研究已經(jīng)提示在CASA結(jié)果與生育力之間存在***聯(lián)系。Coetzee等發(fā)現(xiàn)自動(dòng)分析的正常精子形態(tài)的結(jié)果是預(yù)示體外受精率和妊娠率的有意義指標(biāo)[6]。Garrett等發(fā)現(xiàn)**中能與透明帶結(jié)合的、具有某些頭部形態(tài)特征的精子所占的百分比(Z%),和直線速度(VSL)的精子的百分比,與大樣本的低生育力夫婦的自然妊娠率是有***且**的關(guān)系。Z%和VSL與生育力間的關(guān)系顯示是連續(xù)的,而且沒有顯示臨界值;高于臨界值,妊娠率也不會(huì)進(jìn)一步增加[7]。 CASA系統(tǒng)可以給出多種精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的參數(shù),這些參數(shù)能夠幫助更有效地了解精子的運(yùn)動(dòng)特性。
[臨床意義]1. 若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變;若精液量減至數(shù)滴,甚至排不出,稱為無精液癥,見于生殖系統(tǒng)的特異性***,如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2.若精液量過多(一次超過8ml),則精子被稀釋而相應(yīng)減少,有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1.精液粘稠度低,似米湯樣,可因精子量減少所致,見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2.液化時(shí)間過長(zhǎng)或不液化,可抑制精子活動(dòng)而影響生育,常見于前列腺炎癥等。四、精子活動(dòng)率檢測(cè)[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(jí)(活動(dòng)較好,有中速運(yùn)動(dòng),但波形運(yùn)動(dòng)的較多)以上,**后1小時(shí)內(nèi)有Ⅲ級(jí)以上活動(dòng)能力的精于應(yīng)>0.60。[臨床意義]如果0級(jí)(死精子,無活動(dòng)能力,加溫后仍不活動(dòng))和Ⅰ級(jí)(活動(dòng)不良,精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動(dòng)或抖動(dòng),運(yùn)動(dòng)遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一。Hamilton Thorne精子分析儀具有高度的可靠性和穩(wěn)定性,能夠長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定運(yùn)行,保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。廣州CASA精子分析W.H.O 5
CASA系統(tǒng)操作簡(jiǎn)便,檢測(cè)速度快,且重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè)。香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率
精液顯微鏡檢查
(1)精子存活率:排精后30~60分鐘,正常精子存活率應(yīng)為80%~90%,精子存活率降低是導(dǎo)致不育的重要原因。(2)精子活動(dòng)力:指精子活動(dòng)狀態(tài),也是指活動(dòng)精子的質(zhì)量。世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦將精子活動(dòng)力分為4級(jí):①精子活動(dòng)好,運(yùn)動(dòng)迅速,活潑有力,直線向前運(yùn)動(dòng);②精子活動(dòng)較好,運(yùn)動(dòng)速度尚可,游動(dòng)方向不定,呈直線或非直線運(yùn)動(dòng),帶有回旋;③精子運(yùn)動(dòng)不良,運(yùn)動(dòng)遲緩,原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng),向前運(yùn)動(dòng)能力差;④死精子,精子完全不活動(dòng)。正常精子活動(dòng)力應(yīng)在③級(jí)以上,若>40%的精子活動(dòng)不良(③、④)級(jí),常是導(dǎo)致男性不育的重要原因。精子活動(dòng)力低,主要見于精索靜脈曲張、泌尿生殖系統(tǒng)非特異性***,應(yīng)用某些藥物如抗瘧藥、雄***等所致。 香港前向運(yùn)動(dòng)精子分析高準(zhǔn)確率