全自動化精子分析DAP

擴(kuò)展性檢查：可以在某些情況下由實(shí)驗(yàn)室選擇或根據(jù)臨床醫(yī)生的特殊要求而使用的項(xiàng)目。手冊增加了精子DNA損傷、遺傳學(xué)和炎癥細(xì)胞等相關(guān)檢查項(xiàng)目。提出了基因突變是導(dǎo)致不育和精液常規(guī)檢查異常的原因。新增了精液相關(guān)細(xì)胞因子、趨化因子等檢測的方法、試劑、檢測步驟等內(nèi)容。在精液參數(shù)異常的男性中普遍存在精子DNA損傷，并且已有報道指出其與精液參數(shù)正常男性的不育有關(guān)。由于與精液質(zhì)量相關(guān)，精子DNA損傷檢測是男性不育檢查中的重要補(bǔ)充內(nèi)容，已成為男科學(xué)基礎(chǔ)和臨床中論述**多、**有前景的精子損傷分子標(biāo)志物之一。本版手冊增加了大量篇幅對其原理和檢測方法進(jìn)行了描述。新增了基因和基因組測序內(nèi)容。臨床上，越來越多的人意識到染色體異常[數(shù)量異常、結(jié)構(gòu)異常(包括微缺失和微重復(fù))]和基因突變是導(dǎo)致各種男性不育癥的基礎(chǔ)病因，而這正是在精液分析中觀察到的許多異常的原因。盡管基因和基因組測序常規(guī)在醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，但一些男科實(shí)驗(yàn)室也在做同樣的檢測。為明確生殖道炎癥對于男性不育的影響，泌尿男科醫(yī)生可能提出對精液中的趨化因子和細(xì)胞因子進(jìn)行評估。本手冊納入了精液中白細(xì)胞介素檢測方法。Hamilton Thorne精子分析儀是一款功能強(qiáng)大、準(zhǔn)確可靠的精子質(zhì)量評估設(shè)備。全自動化精子分析DAP

[臨床意義]1.若數(shù)日未**、且精液量少于1.5ml者為不正常，說明精囊或前列腺有病變；若精液量減至數(shù)滴，甚至排不出，稱為無精液癥，見于生殖系統(tǒng)的特異性***，如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等。2．若精液量過多(一次超過8ml)，則精子被稀釋而相應(yīng)減少，有礙生育。二、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色，久未**者可呈淺黃色。[臨床意義]1．黃色或棕色膿樣精液：見于精囊炎或前列腺炎等。2．鮮紅或暗紅色血性精液：見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等。三、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀，30分鐘內(nèi)自行液化。[臨床意義]1．精液粘稠度低，似米湯樣，可因精子量減少所致，見于生殖系統(tǒng)炎癥。??2．液化時間過長或不液化，可抑制精子活動而影響生育，常見于前列腺炎癥等。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好，有中速運(yùn)動，但波形運(yùn)動的較多)以上，**后1小時內(nèi)有Ⅲ級以上活動能力的精于應(yīng)＞0.60。[臨床意義]如果0級(死精子，無活動能力，加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動，運(yùn)動遲緩)精子在0.40以上，常為男性不育癥的重要原因之一。南京計數(shù)精子分析VCL通過計算機(jī)圖像處理功能對顯微鏡下放大的精子圖像進(jìn)行識別和跟蹤計算，從而得出精子動靜態(tài)各項(xiàng)參數(shù)。

通過結(jié)果的生物學(xué)意義對結(jié)果質(zhì)量進(jìn)行評估?當(dāng)所有具生物學(xué)意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學(xué)可變性亦較低方法學(xué)可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進(jìn)行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運(yùn)動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運(yùn)動精子百分率上的相關(guān)性較低］。Holt等報道了在常規(guī)實(shí)驗(yàn)條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進(jìn)行比較，其結(jié)果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實(shí)際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進(jìn)一步的標(biāo)準(zhǔn)來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量。精子***的生物學(xué)功能是使卵細(xì)胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運(yùn)動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術(shù)（授精I(xiàn)VF）的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能；同樣可以驗(yàn)證CASA測定結(jié)果與精子真實(shí)質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高。

精子手工計數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗嫈?shù)池內(nèi)計數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計數(shù)。3.計算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×25×1/計數(shù)池高度×20×103/ml=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×1/計數(shù)池高度×5×103/mlIVOS和CEROS集成了智能化的分析軟件，能夠自動識別和計算精子的各項(xiàng)參數(shù)，減少了人工操作的誤差。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實(shí)驗(yàn)、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實(shí)驗(yàn)操作及討論。手冊重寫了計算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運(yùn)動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。Hamilton Thorne精子分析儀的操作簡單易懂，用戶無需具備專業(yè)知識也能夠輕松上手使用。馬精子分析DAP

不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大，因此，更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進(jìn)男科學(xué)發(fā)展具有重要的意義。全自動化精子分析DAP

1.基本檢查：是確定精液變量穩(wěn)定的常規(guī)方法，不僅是男科實(shí)驗(yàn)室，任何開展精液檢查的實(shí)驗(yàn)室都能遵循。精子計數(shù)依然推薦使用改良Neubauer血細(xì)胞計數(shù)板的方法，但計數(shù)的方法有了改變。明確推薦了伊紅笨胺黑染色法作為精子存活率診斷的優(yōu)先方法，伊紅染色和低滲腫脹實(shí)驗(yàn)只作為備選方法。刪減了參考值下限的描述。對于精子活動率大于40%的樣本沒有必要做存活率評估。與第5版手冊中淡粉色判讀為活精子不同，明確了只有精子頭為白色的精子為活精子、淡粉色為死精子。臨床數(shù)據(jù)表明，鑒別快速前向運(yùn)動精子非常重要。因此，關(guān)于精子活力分級，第6版手冊建議恢復(fù)到快速前向運(yùn)動、慢速前向運(yùn)動、非前向運(yùn)動和不活動4個活力級別，但精子活動率的參考值范圍卻依然是按前向運(yùn)動(PR)、非前向運(yùn)動(NP)、不活動(IM)3個活力級別計算。第6版手冊強(qiáng)調(diào)，精子形態(tài)學(xué)評估的價值不僅在于其可用于判斷自然妊娠和輔助生殖技術(shù)(ART)結(jié)局的預(yù)后，還可以為男性生殖***包括睪丸和附睪功能判斷提供更多診斷信息。對于3%和5%的精子“正?！毙螒B(tài)率的判斷，則要求必須由訓(xùn)練有素的人員評估1500個精子來完成；對于無尾精子(只有頭部的精子)超過總精子數(shù)20%的精液，應(yīng)單獨(dú)計算并在報告中注明；全自動化精子分析DAP