已有的流行病學(xué)研究顯示,單精子胞漿注射技術(shù)(Intracytoplasmicsperminjection,ICSI)可能導(dǎo)致出生小孩泌尿系統(tǒng)疾病的發(fā)生率增加.印記基因印記狀態(tài)的改變與泌尿系統(tǒng)疾病相關(guān),而ICSI操作正是發(fā)生在印記基因甲基化重新建立的關(guān)鍵時期,所以本研究的目的是研究ICSI技術(shù)對小鼠腎臟印記基因表達及甲基化狀況的影響,從分子水平上研究ICSI技術(shù)對子代泌尿系統(tǒng)的影響,建立ICSI小鼠模型,以2-細胞移植組和自然妊娠組為對照,分別取10周,1.5年小鼠腎臟,用real-timeRT-PCR的方法測定h19,igf2,mest,peg3和snrpn的mRNA表達水平,對h19和snrpn進一步用亞硫酸鹽測序方法測定甲基化水平.我們的結(jié)果顯示***促排卵和單精子胞漿注射都能影響h19,mest,peg3和snrpn的mRNA表達水平,而mRNA表達水平的改變主要不是通過甲基化調(diào)控,提示ICSI操作確實會導(dǎo)致子代腎臟印記基因表達水平的改變,而引起這種改變的機制還需要進一步研究。與傳統(tǒng)ICSI方法相比,Piezo-ICSI增加了顯微注射的速度和準(zhǔn)確率,利用MII轉(zhuǎn)基因的方法有效的生成轉(zhuǎn)基因鼠。上海壓電壓電注射
***,我們都知道,壓晶體管可用來作為聲波的產(chǎn)生器與接收器,無論在***上(如聲納)、工業(yè)上、工程上都具有***的用途。可是早在居里兄弟發(fā)現(xiàn)壓電性后的三分之一世紀(jì)中,壓電效應(yīng)在應(yīng)用上幾乎沒有受到任何重視。就是皮爾本人也只不過用它來測量鐳元素所輻射出的電荷罷了。到了***次世界大戰(zhàn),盟軍軍艦受到德國潛艇的攻擊大量受損,于是設(shè)法尋找有效偵測潛艇的方法。因為電磁波無法有效穿透海水,而聲波則能容易地在海里行進,因此,當(dāng)時的藍杰文(P.Langevin)發(fā)展出利用石英壓晶體管作為聲波產(chǎn)生器。可惜等到有了好結(jié)果,大戰(zhàn)已接近尾聲而來不及用上了。石英兩面各貼一鋼片,使其振蕩頻率降到50KHz,外加一電脈波訊號,則經(jīng)換能器轉(zhuǎn)換成聲波傳至海底;過一段時間后,換能器接收到由海底反射之回波,由來回時間及波在海中行進的速度,可決定換能器到海底的距離。這個原理同樣可測潛艇的位置。日本壓電顯微注射壓電破膜儀 PMM 具有高度的精確性和可調(diào)節(jié)性,可以根據(jù)實際需求進行調(diào)整,提高操作效率。
依據(jù)電介質(zhì)壓電效應(yīng)研制的一類傳感器稱為為壓電傳感器。這里再介紹一下電致伸縮效應(yīng)。電致伸縮效應(yīng),即電介質(zhì)在電場的作用下,由于感應(yīng)極化作用而產(chǎn)生應(yīng)變,應(yīng)變大小與電場平方成正比,與電場方向無關(guān)。壓電效應(yīng)*存在于無對稱中心的晶體中。而電致伸縮效應(yīng)對所有的電介質(zhì)均存在,不論是非晶體物質(zhì),還是晶體物質(zhì),不論是中心對稱性的晶體,還是極性晶體。壓電效應(yīng)的發(fā)現(xiàn)1880年皮埃爾·居里和雅克·居里兄弟發(fā)現(xiàn)電氣石具有壓電效應(yīng)。1881年,他們通過實驗驗證了逆壓電效應(yīng),并得出了正逆壓電常數(shù)。1984年,德國物理學(xué)家沃德馬·沃伊特(德語:WoldemarVoigt),推論出只有無對稱中心的20中點群的晶體才可能具有壓電效應(yīng)。
壓電效應(yīng)是某些介質(zhì)在力的作用下產(chǎn)生形變時,在介質(zhì)表面出現(xiàn)異種電荷的現(xiàn)象。實驗表明,這種束縛電荷的電量與作用力成正比,而電量越多,相對應(yīng)的兩表面電勢差(電壓)也越大。這種神奇的效應(yīng)已被應(yīng)用到與人們生產(chǎn)、生活、***、科技密切相關(guān)的許多領(lǐng)域,以實現(xiàn)力──電轉(zhuǎn)換等功能。例如用壓電陶瓷將外力轉(zhuǎn)換成電能的特性,可以生產(chǎn)出不用火石的壓電打火機、煤氣灶打火開關(guān)、炮彈觸發(fā)引信等。此外,壓電陶瓷還可以作為敏感材料,應(yīng)用于擴音器、電唱頭等電聲器件;用于壓電地震儀,可以對人類不能感知的細微振動進行監(jiān)測,并精確測出震源方位和強度,從而預(yù)測地震,減少損失。利用壓電效應(yīng)制作的壓電驅(qū)動器具有精確控制的功能,是精密機械、微電子和生物工程等領(lǐng)域的重要器件??梢哉f,壓電陶瓷等器件不僅廣泛應(yīng)用于科技領(lǐng)域,還頗具“平民性”,對廣大“煙民”來說,天天與壓電陶瓷發(fā)生著“零接觸”,卻熟視無睹。目前流行的一次性塑料打火機,有相當(dāng)一部分是采用壓電陶瓷器件來打火的。取出其中的壓電打火元件,日本PRIME TECH 從PMM 150FU到PMM 4G,再到新一代的PMM 6。
在工業(yè)上,地質(zhì)探測儀里有壓電陶瓷元件,用它可以判斷地層的地質(zhì)狀況,查明地下礦藏。還有電視機里的變壓器——電壓陶瓷變壓器,它體積變小、重量減輕,效率可達60%~80%,能耐住3萬伏的高壓,使電壓保持穩(wěn)定,完全消除了電視圖象模糊變形的缺陷?,F(xiàn)在國外生產(chǎn)的電視機大都采用了壓電陶瓷變壓器。一只15英寸的顯像管,使用75毫米長的壓電陶瓷變壓器就行了。這樣就使電視機體積變小、重量減輕了。壓電陶瓷也***用于日常生活中。用了兩個直徑3毫米、高5毫米的壓電陶瓷柱取代了普通的火石制成的氣體電子打火機,可連續(xù)打火幾萬次。利用同一原理制成的電子點火***是點燃煤氣爐極好的用具。還有一種用壓電陶瓷元件制作的兒童玩具,比如在玩具小狗的肚子中安裝壓電陶瓷制作的蜂鳴器,玩具都會發(fā)出逼真有趣的聲音。隨著高新技術(shù)的發(fā)展,壓電陶瓷的應(yīng)用必將越來越廣闊。除了用于高科技領(lǐng)域,它更多的是在日常生活中為人們服務(wù),為人們創(chuàng)造更美好的生活。PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。昆明透明帶壓電胚胎干細胞
PMM PIEZO的使用不僅可以提高受孕成功率,還可以減少患者的心理壓力和焦慮感,增強他們的信心。上海壓電壓電注射
Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準(zhǔn)備操作盤;按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準(zhǔn)備進行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合;再將單個精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾;連續(xù)剪切5個精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉(zhuǎn)移到放置卵母細胞的操作滴中,準(zhǔn)備將精子頭逐個注射至卵母細胞質(zhì)中。注射時,從時鐘9點的方向吸住卵母細胞,使紡錘體保持在6點或12點的位置,從3點的方向輕輕進針,同時用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時,將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進針,直至針尖插入卵母細胞深處,幾乎貼近對側(cè)質(zhì)膜時,用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質(zhì)膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內(nèi)多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實現(xiàn)該批卵母細胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射,在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射。上海壓電壓電注射