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Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術,無需對卵母細胞進行染色,即可實時、清晰、高對比度地進行紡錘體結構和透明帶成像,對ICSI、核移植操作、卵母細胞質量評價等有很好的輔助作用。
主要應用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級卵母細胞,避免卵的破裂損傷,增強胚胎的發(fā)育潛能。卵評估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。體外成熟評估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據(jù)采用的是準確的識別紡錘體,而非不準確的極體。質量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對卵進行分級,改善對胚胎的選擇。
核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質,使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對冷凍的初級卵母細胞進行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發(fā)育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡)。可以對染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測量卵母細胞的透明帶;準確測量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài) 在有絲分裂中,紡錘體形成并維持著染色體的穩(wěn)定性。上海輔助生殖紡錘體Oosight Meta
紡錘體是如何形成的(2)動粒微管連接染色體動粒與位于兩極的中心體。在有絲分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反兩個方向的中心體伸出的動粒微管就會隨機地與染色體上的動粒結合而俘獲染色體,微管**終附著在動粒上,動粒微管把染色體和紡錘體連接在一起。在細胞分裂期的后期,分開后的染色單體被拉向兩極。染色體移動由兩個相互獨立且同步進行的過程所介導,分別為過程A和過程B。在過程A中,在連接微管和動粒的馬達蛋白的作用下,動粒微管解聚縮短,在動粒處產(chǎn)生的拉力使染色體移向兩極。極間微管是從一個中心體伸出的某些微管與從另一個中心體伸出的微管相互作用,阻止了它們的解聚,從而使微管結構相對穩(wěn)定,兩套微管的這種結合形成了有絲分裂紡錘體的基本框架,具有典型的兩極形態(tài),產(chǎn)生這些微管的兩個中心體稱為紡錘極,這些相互作用的微管被稱為極間微管。在有絲分裂后期過程B中,極間微管的伸長和相互間的滑行使紡錘極向兩極方向移動。星體微管從中心體向周圍呈輻射狀分布,在有絲分裂后期過程B中,每一紡錘極上向外伸展的星體微管發(fā)出向外的力,拉動兩個紡錘極向兩極方向移動。上海Hamilton Thorne紡錘體起偏器紡錘體的功能異常與某些藥物的副作用有關,如化療藥物可能干擾紡錘體的形成和功能。
通過抑制細胞周期重新進入,可以減少神經(jīng)元的細胞凋亡,保護神經(jīng)元的存活。例如,使用細胞周期抑制劑(如CDK抑制劑)可以抑制細胞周期重新進入,減少神經(jīng)元的細胞凋亡。此外,通過促進神經(jīng)元的細胞周期退出,也可以減少神經(jīng)元的細胞凋亡。通過改善線粒體功能,可以恢復能量代謝,保護神經(jīng)元的存活。例如,使用線粒體功能增強劑(如輔酶Q10)可以改善線粒體功能,恢復能量代謝。此外,通過減少線粒體的氧化應激,也可以改善線粒體功能。
染色體當細胞從間期進入有絲分裂期,間期細胞微管網(wǎng)絡解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體,再重組成紡錘體,介導染色體的運動;分裂末期紡錘體微管解聚,又重組形成細胞質微管網(wǎng)絡??煞譃椋簞恿N⒐埽哼B接染色體動粒于兩極的微管。極間微管:從兩極發(fā)出,在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯的微管。星體微管:中心體周圍呈輻射分布的微管。染色體的運動依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過程中動粒微管與動粒之間的滑動主要是依靠結合在動粒部位的驅動蛋白和動力蛋白沿微管的運動來完成。極微管在紡錘體中部交錯,有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達蛋白,其中2個馬達蛋白沿一條微管運動,另2個馬達結構域沿另一條微管運動。由于2條微管分別來自二極,故極性相反。當雙極驅動蛋白四聚體沿微管向正極運動時,紡錘體二極間距離延長。反之紡錘體距離縮短。紡錘體的結構和功能在不同類型的細胞中可能存在差異。
紡錘體的完整性決定了染色體分裂的正確性。在有絲分裂前期,中心體被復制形成兩個中心體,并逐漸分離,形成兩個紡錘體。紡錘體的微管從中心體發(fā)出,與染色體上的著絲粒(kinetochore)結合。著絲粒是一組復雜的蛋白質結構,可以與微管的末端結合。當纖維束的微管末端與著絲粒結合時,纖維束開始縮短,將染色體拉向兩端,實現(xiàn)染色體的精確分離。這一過程不僅確保了每個新細胞都能獲得正確數(shù)量的染色體,還保證了遺傳信息的穩(wěn)定傳遞。紡錘體,作為細胞分裂的“引擎”,驅動著生命的延續(xù)與多樣性。昆明成熟卵母細胞紡錘體卵質量評估
紡錘體的研究有助于揭示細胞分裂過程中的精細調控機制。上海輔助生殖紡錘體Oosight Meta
紡錘體觀測儀在補救ICSI中的應用我們知道,成熟的卵母細胞含有1個極體,也就是***極體。IVF加入精子后,精子會穿透層層障礙**終進入卵子,隨著時間的推移,~6小時后卵子的紡錘體會將染色單體拉向兩極,進而排出第二極體,再往后大約加精后9~16小時,雌雄原核會出現(xiàn),而原核的出現(xiàn)才是受精的標志。但是對于那些沒有受精的卵子,到了原核出現(xiàn)的時間窗發(fā)現(xiàn)沒有受精時再去補救ICSI,往往錯過了卵子的比較好受精時間,因為沒有受精的卵子會在體外老化,即使受精,胚胎的發(fā)育潛能也很低。所以,我們在加精后的4~6小時,通過觀察第二極體的排出來初步判斷是否受精,**的增加了那些受精障礙患者的受精率,也避免了卵子的老化。當然,偶爾也會出現(xiàn)錯誤補救。文獻報道對IVF受精后的未排出第二極體的卵母細胞進行補救,實驗組用紡錘體觀測儀觀察并統(tǒng)計紡錘體的數(shù)目,82.7%含有一個紡錘體,17.3%含有兩個紡錘體,并對含有一個紡錘體的卵母細胞進行補救ICSI;而對照組并未用紡錘體觀測儀觀察紡錘體,只對未排出第二極體的卵母細胞進行補救ICSI。結果發(fā)現(xiàn)使用紡錘體觀測儀觀察紡錘體的數(shù)目能顯著提高正常受精率,降低多原核受精比率。上海輔助生殖紡錘體Oosight Meta