湖北檢測數(shù)字PCR聯(lián)系方式

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-07

定量PCR和數(shù)字PCR的特點(diǎn):1.在20多年的使用和發(fā)展中,定量PCR作為一種技術(shù)平臺,已經(jīng)產(chǎn)出海量的數(shù)據(jù),在工業(yè)界和分子檢測的某些應(yīng)用上,定量PCR已經(jīng)成為“金標(biāo)準(zhǔn)”?;A(chǔ)研究方面,則形成了被稱為MIQE的“定量PCR標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)指南”。2.在定量PCR的各種應(yīng)用中,基因表達(dá)分析(geneexpressionanalysis)的應(yīng)用比重約占七成,綜合各種因素來看,眼下定量PCR還是進(jìn)行基因表達(dá)研究的理想手段。3.上述的“各種因素”具體展開,主要包括:通量、自動化程度、各種檢測探針與染料、檢測通道、成本和可參考文獻(xiàn)與protocol的數(shù)目等等。4.就目前市場上已有的數(shù)字PCR設(shè)備來看,定量PCR在檢測的線性范圍上具有優(yōu)勢,意味著同一個(gè)run內(nèi)可對各種表達(dá)豐度的樣品進(jìn)行分析??:?上海)儀器科技有限公司是一家專業(yè)提供數(shù)字PCR 的公司,歡迎您的來電哦!湖北檢測數(shù)字PCR聯(lián)系方式

數(shù)字PCR

要了解為什么傳統(tǒng)PCR存在限制,務(wù)必要了解PCR反應(yīng)過程中發(fā)生了什么?;綪CR運(yùn)行可以分為三個(gè)階段:指數(shù)期每個(gè)循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定**反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和精確度。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,因?yàn)樗性噭┚迈r可用,反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍。線性期(高變異性)隨著反應(yīng)繼續(xù),一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,并且每個(gè)循環(huán)的PCR產(chǎn)物不再加倍。平臺期(終點(diǎn):使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測)反應(yīng)停止,不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,并且如果放置時(shí)間夠長,PCR產(chǎn)物將開始降解。因?yàn)槊總€(gè)樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué),所以每支試管或每個(gè)反應(yīng)將在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)入平臺期。在平臺期可以看到這些差異。在平臺期內(nèi),傳統(tǒng)PCR進(jìn)行測量,又稱為終點(diǎn)檢測。寧夏安全數(shù)字PCR價(jià)格浚和(上海)儀器科技有限公司為您提供數(shù)字PCR ,歡迎新老客戶來電!

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數(shù)字PCR可以直接計(jì)算目標(biāo)序列的拷貝數(shù),因此無需依賴于對照樣品和標(biāo)準(zhǔn)曲線就可以進(jìn)行精確的***定量檢測;此外,由于數(shù)字PCR在進(jìn)行結(jié)果判讀時(shí) 判斷有/無兩種擴(kuò)增狀態(tài),因此也不需要檢測熒光信號與設(shè)定閾值線的交點(diǎn),完全不依賴于Ct值的鑒定,因此數(shù)字PCR的反應(yīng)受擴(kuò)增效率的影響**降低,對PCR反應(yīng)***物的耐受能力**提高;數(shù)字PCR實(shí)驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系分配的過程可以極大程度上降低與目標(biāo)序列有競爭性作用的背景序列濃度,因此數(shù)字PCR技術(shù)也特別適合在復(fù)雜背景中檢測稀有突變。

研究方向基因表達(dá)差異研究檢測時(shí)完全不依賴傳統(tǒng)的Ct值即可實(shí)現(xiàn)真正意義上的***定量,從而提供了比實(shí)時(shí)熒光定量PCR更精確的基因差異表達(dá)研究,尤其對于那些靶基因表達(dá)差異微小的情況:microRNA、lncRNAs等的表達(dá)分析、等位基因的不平衡表達(dá)、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、Exosome內(nèi)核酸分子定量分析等。拷貝數(shù)變異(CNV)研究微滴化的樣品處理及檢測,這種擺脫Ct值的計(jì)算方法而直接獲取目標(biāo)基因的***拷貝數(shù),為拷貝數(shù)變異的研究提供了***的檢測精度。是其他諸如二代測序、芯片雜交等平臺無法達(dá)到的,因此采用數(shù)字PCR能夠有效對NGS、aCGH的實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證,并具有成本低、通量高的特點(diǎn)。浚和(上海)儀器科技有限公司力于提供數(shù)字PCR ,歡迎您的來電哦!

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數(shù)字PCR(dPCR)是近年來引起重視并迅速發(fā)展起來的一種突破性的核酸定量分析技術(shù)。該技術(shù)先將核酸模板進(jìn)行稀釋,分配到大量 的反應(yīng)單元中,使每個(gè)反應(yīng)單元中只有單個(gè)模板分子,然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng),擴(kuò)增結(jié)束后對每個(gè)反應(yīng)室的熒光信號進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,來定量DNA拷貝數(shù)。數(shù)字PCR采用先擴(kuò)增后定量,因此不依賴擴(kuò)增曲線的循環(huán)閾值(Ct),也無需采用內(nèi)參基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線,準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好,可以實(shí)現(xiàn)***定量分析。由于其獨(dú)特的技術(shù)優(yōu)勢,已經(jīng)在臨床診斷、轉(zhuǎn)基因成分定量、單細(xì)胞基因表達(dá)分析、環(huán)境微生物檢測和下一代測序等研究領(lǐng)域顯示出巨大的優(yōu)勢和應(yīng)用前景。數(shù)字PCR ,就選浚和(上海)儀器科技有限公司,用戶的信賴之選,歡迎新老客戶來電!江蘇重量輕數(shù)字PCR銷售

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數(shù)字PCR也叫DigitalPCR(dPCR),是近幾年發(fā)展起來的一種核酸定量分析技術(shù)。相較于傳統(tǒng)熒光定量PCR來說,數(shù)字PCR對結(jié)果的判定不依賴于擴(kuò)增曲線循環(huán)Ct值,不受擴(kuò)增效率的影響,能夠直接讀出DNA的分子個(gè)數(shù),能夠?qū)ζ鹗紭颖竞怂岱肿?**定量。數(shù)字PCR基本原理是將一個(gè)樣本分成幾十到幾萬份,然后再將其分配到不同的反應(yīng)單元中,使每個(gè)微滴單元包含一個(gè)或多個(gè)拷貝的核酸分子(即DNA模板),每個(gè)單元都會對目標(biāo)分子進(jìn)行擴(kuò)增,然后再對每個(gè)單元進(jìn)行熒光信號的統(tǒng)計(jì)并計(jì)算。相對而言,傳統(tǒng)PCR或qPCR反應(yīng)都是發(fā)生于同一體系當(dāng)中,這也是數(shù)字PCR與其比較大的區(qū)別。 湖北檢測數(shù)字PCR聯(lián)系方式