胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要??！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！
載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質粒系統(tǒng)、四質粒系統(tǒng)，當然使用三質粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP 載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構建純化良好，質粒間比例得當，并且對質粒進行酶切驗證. 質粒細胞轉染步驟是什么?廣東pei液體轉染試劑
X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高，生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋，再與質粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.湖北pei轉染試劑說明書riboFECT CP轉染試劑應用案例,可轉染各種細胞,***靠譜!
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。
在難轉染細胞（原代大鼠動脈平滑肌細胞）轉染效率的比較
圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑（左圖）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右圖）分別將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉染操作步轉染至該細胞。轉染 24 小時后，用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光，以此來評價轉染效率。
對難轉染細胞 LNCap 細胞轉染效率的比較
在難轉染細胞（原代大鼠動脈平滑肌細胞）轉染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所（Roswell Cancer Institute）
試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。
十全十美難，十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現(xiàn)。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率，細胞毒性低，操作簡單可重復，價格還要可愛?，F(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質體系列轉染試劑，但脂質體對細胞毒性大，某些細胞的轉染效率還很低，看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面，脂質體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發(fā)思路與其核酸純化領域的精而專，全而深不同。在轉染試劑的研發(fā)過程中，另辟蹊徑，研精致思進而做到小而美的轉染產(chǎn)品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中，神奇的開辟出一塊藍海，為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。MagTransf 磁轉染試劑實現(xiàn)高效轉染解析.山東轉染試劑如何使用
siRNA脫靶效應會導致細胞死亡，并引起分析問題。廣東pei液體轉染試劑
超級好用的siRNA和miRNA轉染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶：HiPerFect是小RNA轉染試劑，這種非脂質體的脂質分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉染（推薦濃度是1nM-5nM）。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應，正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA，HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉染，滿足miRNA功能分析的需要。操作簡單，方便快速：HiperFect轉染試劑的方便程度也是***的，甚至***之內(nèi)可以完成再次接種、轉染到檢測結果！這對于高通量反應簡直是求之不得的福音：轉染前將細胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基可以是含有***和血清的，在37度培養(yǎng)箱中保溫。廣東pei液體轉染試劑