細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中**常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢***、腺***和腺相關(guān)***等**常見(jiàn)，其侵染效率可以達(dá)到90%以上，但常因安全性等問(wèn)題，很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***，無(wú)論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢(qián)一分貨，性能好的價(jià)格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法，主要包括兩類(lèi)：陽(yáng)離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子聚合物。其基本原理是利用陽(yáng)離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過(guò)正負(fù)電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。我們希望把mRNA轉(zhuǎn)染進(jìn)入原代細(xì)胞，那**適合的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉(zhuǎn)儀。hela轉(zhuǎn)染試劑加不加血清
基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時(shí)間，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng)，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細(xì)胞毒性，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。hek293t轉(zhuǎn)染試劑如何保存原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性.但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。
Zeta Life轉(zhuǎn)染試劑 成功轉(zhuǎn)染THP-1 (人單核白血病細(xì)胞) 懸浮細(xì)胞 ZETA LIFE ZETA LIFE 微信號(hào) gh_97714b427409
功能介紹 美國(guó) Zeta Life公司是國(guó)際無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基 DMEM/F12主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)； Zeta Life與美國(guó)加利福尼亞大學(xué)聯(lián)合開(kāi)發(fā)全球細(xì)胞體內(nèi)可代謝轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為全球細(xì)胞轉(zhuǎn)染優(yōu)先技術(shù)之一。 7月17日 收錄于話題Zeta Life Advanced DNA RNA，AD600150轉(zhuǎn)染試劑；
成功轉(zhuǎn)染THP-1 (人單核白血病細(xì)胞) 懸浮細(xì)胞；
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zeta life，Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑信息如下 研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。河北轉(zhuǎn)染試劑加不加血清
在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。hela轉(zhuǎn)染試劑加不加血清
.在多種不同類(lèi)型細(xì)胞中基因敲除效率超過(guò)90%。
高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。
細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過(guò)程本身介導(dǎo)。
兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無(wú)需換液(如無(wú)血清培養(yǎng)基)。
X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說(shuō)明書(shū)建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞,通過(guò)LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評(píng)估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 hela轉(zhuǎn)染試劑加不加血清