Q:在做刺激實(shí)驗(yàn)時(shí),對(duì)測(cè)定是否有影響?
A:如果有還原性,則會(huì)與CCK-8發(fā)生反應(yīng),影響吸光度;金屬離子的存在可能會(huì)影響CCK-8的靈敏度。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)5% 、15% 、90%的顯色反應(yīng),使靈敏度降低。如果終濃度是10 mM 的話(huà)。
Q:如果吸光度值太低,可以采取什么辦法?
A:適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長(zhǎng)加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。
Q:如果吸光度值太高,可以采取什么辦法?
A:適當(dāng)減少細(xì)胞數(shù)量(建議正式實(shí)驗(yàn)前優(yōu)化細(xì)胞數(shù)量與熒光值之間的關(guān)系)或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時(shí)間。 細(xì)胞增殖生長(zhǎng)力是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo)。武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡
t細(xì)胞增殖試驗(yàn)又稱(chēng)T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。T細(xì)胞在體外經(jīng)某種物質(zhì)刺激,細(xì)胞代謝和形態(tài)相繼變化,在24~48h細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的合成增加,產(chǎn)生一系列增殖的變化,如細(xì)胞變化、細(xì)胞漿擴(kuò)大、出現(xiàn)空泡、核仁明顯、核染色質(zhì)疏松等,由淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣?xì)胞。因此,這種淋巴細(xì)胞增殖又叫淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。據(jù)此可判斷出淋巴細(xì)胞對(duì)有關(guān)刺激的反應(yīng)性與功能狀態(tài)。  (1)非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS),通稱(chēng)促有絲分裂原。其中LPS刺激B細(xì)胞,PWM可刺激T和B細(xì)胞,PHA和ConA刺激T細(xì)胞增殖。  (2)抗原性刺激物:如結(jié)核菌素、葡萄球菌*、破傷風(fēng)類(lèi)、鏈球菌激酶、抗原、同種異型抗原等。沈陽(yáng)醇促進(jìn)b細(xì)胞增殖的方法細(xì)胞增殖的技術(shù)難點(diǎn)。
上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物(Formazandye)。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途:***篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、**藥敏試驗(yàn)CCK8的優(yōu)點(diǎn):使用方便,省去了洗滌細(xì)胞,不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑;CCK-8法能快速檢測(cè);CCK-8法的檢測(cè)靈敏度很高,甚至可以測(cè)定較低細(xì)胞密度;CCK-8法的重復(fù)性?xún)?yōu)于MTT法;CCK-8法對(duì)細(xì)胞毒性??;CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中為1瓶溶液,毋需預(yù)制,即開(kāi)即用。CCK8的缺點(diǎn):與MTT法相比,CCK8和XTT的價(jià)格比較貴。CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,不注意的話(huà)容易產(chǎn)生漏加或多加。與以往的增殖/毒性測(cè)定試劑相比較:檢測(cè)方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產(chǎn)物的水溶性差。
標(biāo)簽抗體
Anti HA-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Anti HA-tag mouse mAb是標(biāo)簽抗體系列之一。本抗體具有高度敏感性,可用于HA標(biāo)簽融合蛋白的檢測(cè),能識(shí)別重組蛋白C端、N端和內(nèi)部的HA標(biāo)簽。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?性?xún)r(jià)比高,多種稀釋比例推薦:
WB: 1:1000 - 1:10000
IP: 1:100 - 1:500
IF: 1:200 - 1:1000
?常備現(xiàn)貨
3.結(jié)果示例
HA標(biāo)簽小鼠單抗(1B10)經(jīng)1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)
稀釋后對(duì)HA標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行Western Blot分析。Anti Flag-Tag Mouse mAb
1.產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DYKDDDDK肽段是表位的一小部分,不會(huì)對(duì)重組蛋白的生物活性或分布有影響,在很多表達(dá)載體中被用作表位標(biāo)簽。作為標(biāo)簽抗體之一,本抗體是抗DYKDDDDK比較好的Flag抗體,可識(shí)別融合蛋白的C端、N端和內(nèi)部的Flag標(biāo)簽。
2.產(chǎn)品特點(diǎn)
?性?xún)r(jià)比高,多種稀釋比例推薦:
WB: 1:1000 - 1:10000
IP: 1:100 - 1:500
IF: 1:200 - 1:1000
?常備現(xiàn)貨
3.結(jié)果示例
Flag標(biāo)簽小鼠單抗(2E4)經(jīng)1:2000 (泳道1)和1:5000 (泳道2)
稀釋后對(duì)Flag標(biāo)簽融合蛋白進(jìn)行Western Blot分析。
293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染Flag后,用Anti Flag-Tag Mouse mAb (2E4)進(jìn)行免疫熒光分析。
DAPI染色細(xì)胞核;Flag抗體染色;
較新的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。
使用方法:  1.將印記膜從蛋白轉(zhuǎn)印設(shè)備中取出,加入合適的封閉液在溫室下孵育20-60分鐘,同時(shí)振蕩;  2.將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育1小時(shí),同時(shí)振蕩或在28℃孵育過(guò)夜,不振蕩;  3.用適當(dāng)?shù)木彌_液充分洗滌印跡膜。  4.用10-50ng/mL二抗孵育印跡膜約30-60分鐘;  5.重復(fù)步驟3,以除去未結(jié)合的HRP標(biāo)記二抗(膜與HRP標(biāo)記二抗孵育后必須進(jìn)行徹底洗滌);  6.通過(guò)混合等份的本產(chǎn)品溶液A和本產(chǎn)品溶液B來(lái)制備發(fā)光工作溶液。每平方厘米印記膜使用0.1mL發(fā)光工作溶液。已配制的工作溶液在室溫下可穩(wěn)定保存8小時(shí)。  7.將印跡膜置于新配置的工作溶液中孵育5分鐘;  8.去除多余的工作溶液;  9.將印跡膜放在透明的塑料包裝或薄片保護(hù)膜中,去除氣泡10將印跡暴露于X射線(xiàn)膠片或成像系統(tǒng)。細(xì)胞增殖的主要方式有哪種?廣州心臟成纖維細(xì)胞增殖教學(xué)視頻
CCK用途:試劑篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定等。武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(Glyceraldehyde 3 phosphate dehydrogenase, ***DH)是參與糖酵解的一種關(guān)鍵酶。其高水平組成性表達(dá)于幾乎所有組織中,因此可作為Western Blot的內(nèi)參對(duì)照。一些生理因素如缺氧、糖尿病等,會(huì)使***DH在某些類(lèi)型的細(xì)胞中表達(dá)升高。
產(chǎn)品特點(diǎn)
?用于WB實(shí)驗(yàn),性?xún)r(jià)比高,推薦稀釋比例為:1:1000 - 1:10000
?常備現(xiàn)貨
結(jié)果示例
***DH-HRP小鼠單抗經(jīng)1:4000(泳道1) 和1:8000(泳道2)梯度稀釋?zhuān)?
對(duì)小鼠肝臟裂解物進(jìn)行Western Blot分析。 武漢brdu細(xì)胞增殖凋亡
上海儒安生物科技有限公司位于真南路4268號(hào)2幢J1718室,交通便利,環(huán)境優(yōu)美,是一家生產(chǎn)型企業(yè)。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè),以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專(zhuān)業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍,努力為廣大用戶(hù)提供***的產(chǎn)品。公司業(yè)務(wù)涵蓋細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶(hù)的歡迎。上海儒安生物科技順應(yīng)時(shí)代發(fā)展和市場(chǎng)需求,通過(guò)**技術(shù),力圖保證高規(guī)格高質(zhì)量的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體。