預(yù)期用途:成分確定、無需程序降溫,所有原料均為注射級(jí),內(nèi)***水平低于0.06EU/mL。本產(chǎn)品為埃澤思(AppliedCell)推出一款即用型的無血清細(xì)胞凍存液,本款產(chǎn)品在常規(guī)凍存液基礎(chǔ)上做了大量?jī)?yōu)化,主要具有幾大特點(diǎn):凍存液無血清成分、無需配制直接使用、無需程序降溫盒、不需分步降溫、即用型細(xì)胞凍存液,且細(xì)胞復(fù)蘇率高,尤其對(duì)干細(xì)胞干性維持以及細(xì)胞表面蛋白保護(hù)有極好效果。該款凍存液適用于臍帶、脂肪、骨髓等間充質(zhì)干細(xì)胞,免疫細(xì)胞以及大多數(shù)細(xì)胞系凍存。同時(shí)該款所有成分均使用藥用級(jí)原料配制而成,內(nèi)***水平<0.06EU/mL,適用不同應(yīng)用場(chǎng)景。細(xì)胞凍存液每次克隆化得到的亞克隆細(xì)胞的凍存保種常常是必不可少的實(shí)驗(yàn)操作。上海單核細(xì)胞凍存液
一些凍存液能夠通過降低某種溶液或者物質(zhì)的玻璃化溫度,使溶液在玻璃化的過程中仍保持一定的流動(dòng)性。很多的凍存液也能通過氫鍵的形成來發(fā)揮作用(由于將水分子替物材料能夠保持原始的生理結(jié)構(gòu)和功能,這種保存方法主要用于低濕休眠。2.多種混合的凍存液含有更少的細(xì)胞毒性,通常會(huì)比單一的凍存液使用更加有效。帶有二甲基亞砜(DMSO),丙二醇(Propyleneglycol),膠質(zhì)(Colloid)的甲酰胺(Formamide)是這么多年以來**為有效的人工制造的凍存液,同時(shí)凍存液的混合物也經(jīng)常被用于玻璃化。活細(xì)胞凍存液一次加多少細(xì)胞凍存的方法與步驟?
凍存(Cryo-preservation)是一個(gè)將細(xì)胞器,細(xì)胞,組織,細(xì)胞外基質(zhì),***或者任何其他的在沒有經(jīng)調(diào)控的化學(xué)動(dòng)力學(xué)因素影響下容易受損的生物組成物,將他們通過迅速降低到非常低的溫度來進(jìn)行保存(通常是使用固態(tài)二氧化碳的營(yíng)造-80°C條件或者是使用液氮的營(yíng)造的-196°C條件)。在很低的溫度下,任何的酶和可能會(huì)對(duì)生物材料造成傷害的化學(xué)活躍因素都因?yàn)闇氐沫h(huán)境從而有效地解決。。就凍存這樣的方法而言,人們努力尋找一個(gè)合適的低溫,這樣的溫度不會(huì)造成在結(jié)冰過程中的由于冰晶的形成從而導(dǎo)致細(xì)胞的附加傷害,這是凍存中的頭等大事。
無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品介紹:無血清細(xì)胞凍存液是一款針對(duì)細(xì)胞凍存和復(fù)蘇所研發(fā)的即用型細(xì)胞凍存液。該凍存液采用獨(dú)特的凍存配方,包括DMSO在內(nèi)的凍存保護(hù)劑復(fù)合物,**降低了細(xì)胞在凍存過程中冰晶對(duì)于細(xì)胞的損傷。凍存液中添加了葡萄糖,氨基酸等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分,***提高了細(xì)胞的活力和復(fù)蘇率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無任何動(dòng)物源組分,可維持干細(xì)胞低分化狀態(tài),并且可減少各類***和支原體污染的風(fēng)險(xiǎn),確保細(xì)胞凍存安全。與傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液相比,本產(chǎn)品重懸細(xì)胞后可直接凍存于-80℃,無需程序降溫。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。
細(xì)胞凍存的操作步驟是什么配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來;離心1000rpm,5min;去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計(jì)數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~1.5ml;在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時(shí)間及操作者;凍存:標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時(shí),則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中過夜細(xì)胞凍存液的配制方法是什么?上海單核細(xì)胞凍存液
在細(xì)胞建株和建系中,及時(shí)凍存原始細(xì)胞是十分重要的。上海單核細(xì)胞凍存液
4.逐滴加入5-7mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中,加入的同時(shí)輕輕混勻。5.室溫以300xg離心5分鐘。6.吸出培養(yǎng)基,使細(xì)胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細(xì)胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。7.將0.5mL的細(xì)胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個(gè)凍凍管可以鋪板兩個(gè)孔)。8.將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細(xì)胞聚集體分布均勻。24小時(shí)內(nèi)不要移動(dòng)培養(yǎng)板。注意:解凍復(fù)蘇后如果只能觀察到少數(shù)的未分化的集落上海單核細(xì)胞凍存液