原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。 轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。細胞轉染試劑選購
siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細胞直到適當的時候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心上海神經細胞轉染試劑原理試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。
轉染是將外源核酸導入真核細胞的過程,是細胞和分子生物學研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉染效率太低""轉染完細胞全漂了""轉染后忘記給細胞換液了",真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,影響轉染成功的因素非常多,包括細胞質量、核酸質量、微生物污染、轉染試劑等。各種細胞使用的轉染條件都可能不同,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準的方案。
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉染的驗證,尤其針對難轉染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉染帶GFP標記的質粒,A和C是轉染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉染的細胞株進行轉染,X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~MagTransf 磁轉染試劑實現(xiàn)高效轉染解析.
用 LipoD293? 體外 DNA 轉染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉染 pEGFP-C1 質粒到 HEK293 細胞中。轉染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。
對懸浮 HEK293F 產生蛋白質效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉染試劑按照生產商的標準轉染步驟將 pEGFP-6xHis 質粒導入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉染試劑均使用 30 微克質粒 DNA。 連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理?;蜣D染試劑配方
該試劑可將RNA導入多種細胞系,包括原代細胞和懸浮細胞.細胞轉染試劑選購
轉染產品知多少:轉染試劑選擇工具收錄于話題轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。不同的實驗方案和技術差別巨大,我們可以利用化學方法或脂質體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細胞內,也可以使用電穿孔方法利用電流在細胞膜上開孔,使核酸進入細胞內。賽默飛提供了多種高質量的轉染產品,適用于各種細胞類型的轉染。如何選擇**受信賴的可用于轉染的系統(tǒng),是實驗結果的重要影響因素。細胞轉染試劑選購