對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定;GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè)。左圖:LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
對(duì) HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較
右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞(在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)之后,用流式細(xì)胞儀檢測(cè) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。
左圖:血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑(升級(jí)版)對(duì)在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過(guò)三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞(生長(zhǎng)在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無(wú)血清和***,10% 血清和***的存在,轉(zhuǎn)染 5 小時(shí)后換液和不換液。
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)用案例,可轉(zhuǎn)染各種細(xì)胞,靠譜!
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō),這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。
X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡(jiǎn)介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類(lèi)多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋?zhuān)倥c質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無(wú)血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無(wú)需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。
圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測(cè))。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長(zhǎng)的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng)。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射。在第2、5、9、16、23及30日收集血清,并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果。低毒性siRNA脫靶效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,并引起分析問(wèn)題。pei轉(zhuǎn)染試劑原理
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。
4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。
LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程
細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
上海儒安生物科技有限公司坐落在真南路4268號(hào)2幢J1718室,是一家專(zhuān)業(yè)的從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)咨詢(xún)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開(kāi)發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實(shí)驗(yàn)窒設(shè)備的銷(xiāo)售。公司。一批專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),是實(shí)現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標(biāo)的基礎(chǔ),是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動(dòng)力。公司業(yè)務(wù)范圍主要包括:細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等。公司奉行顧客至上、質(zhì)量為本的經(jīng)營(yíng)宗旨,深受客戶(hù)好評(píng)。公司憑著雄厚的技術(shù)力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實(shí)的工作作風(fēng)、良好的職業(yè)道德,樹(shù)立了良好的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體形象,贏得了社會(huì)各界的信任和認(rèn)可。