LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實驗步驟進行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合。轉(zhuǎn)染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海病毒轉(zhuǎn)染試劑價格
胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。上海病毒轉(zhuǎn)染試劑價格連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理.
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在難轉(zhuǎn)染細胞（原代大鼠動脈平滑肌細胞）轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由芝加哥大學(xué)肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑（左圖）和 Lipofecatmine 2000（L2K, 右圖）分別將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細胞。轉(zhuǎn)染 24 小時后，用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。
對難轉(zhuǎn)染細胞 LNCap 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所（Roswell Cancer Institute）的 Lyn Gao 博士友情提供
siRNA脫靶效應(yīng)會導(dǎo)致細胞死亡，并引起分析問題。動物轉(zhuǎn)染試劑
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兩種試劑對CHO-K1 細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場顯微圖. 與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENE HP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性
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