轉(zhuǎn)染試劑配方

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過(guò)沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物，粘附到細(xì)胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時(shí)間，細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長(zhǎng)，且重復(fù)性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽(yáng)離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細(xì)胞毒性，可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。各種轉(zhuǎn)染試劑成分分析.轉(zhuǎn)染試劑配方

轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程，是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開(kāi)的話題。然而常常聽(tīng)到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了"，真所謂辛辛苦苦實(shí)驗(yàn)N多回，一夜回到解放前……眾所周知，影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多，包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同，現(xiàn)實(shí)中也并沒(méi)有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案。上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得：只需簡(jiǎn)單地混合，并進(jìn)行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí)，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案，易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑，可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能，使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過(guò)計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 mRNA細(xì)胞&***轉(zhuǎn)染試劑來(lái)助力.

用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑（Ver. II）（上圖）和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?（下圖）轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后，細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖（左側(cè)）和熒光成像圖（右側(cè)）。

對(duì)懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/

30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為 LipoD293? 試劑，20 微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。 連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理.上海懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑

將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中，前后移動(dòng)培養(yǎng)皿，混合均勻；轉(zhuǎn)染試劑配方

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 轉(zhuǎn)染試劑配方

上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè)，積極探索行業(yè)發(fā)展，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，以誠(chéng)信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì)、踏實(shí)的職工隊(duì)伍，努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo)，提供***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技自成立以來(lái)，一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線，得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。