FBS南美特級(jí)胎牛血清本品采自南美源健康母牛的出生前胎牛,經(jīng)無菌采集、批量混合,**終經(jīng)過3次0.1um過濾分裝而成。本品適合于細(xì)胞株的保藏及組織***培養(yǎng)、單抗研制、絕大多數(shù)**細(xì)胞。特點(diǎn):·適合細(xì)胞株的保藏及組織***培養(yǎng)、單抗研制、絕大多數(shù)**細(xì)胞;·細(xì)胞生長(快)曲線峰值:1.4×106·細(xì)胞倍增時(shí)間(短):≤17小時(shí)·細(xì)胞克隆率(高):≥80%·內(nèi)***含量低;(內(nèi)***:≤5EU/ml)·批次間差異小,質(zhì)量把控嚴(yán)格;·經(jīng)濟(jì)實(shí)惠,性價(jià)比高。儲(chǔ)存事項(xiàng):干冰運(yùn)輸,盡量避免反復(fù)凍融。常期存放請(qǐng)將血清保存在-5℃至-2O℃冰箱中凍存,有效期5年。重要提示:產(chǎn)品用于:供研究使用,不可用于人或動(dòng)物的體外診斷與***。FBS 澳洲特級(jí)胎牛血清的主要功能?浙江血清購買
抗體稀釋參考
一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL,二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事項(xiàng)
為獲得比較好效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床;
2. 將Tween20(終濃度0.05-0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào);
3. 不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑,疊氨鈉是HRP的***物;
4. 避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子;
5. 所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來物質(zhì),金屬器械(如剪刀)不得具有可見的銹跡,銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。 武漢山羊血清gibco牛血清中含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,具有極為重要的功能。
解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞過濾膜。
何謂熱滅活一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和***。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅***清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)***的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是"小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。購買的時(shí)候注意詢問廠家是否是已滅***清。血清還含有一些微量元素和離子,它們?cè)诖x穩(wěn)定中起重要作用。
總RNA提取試劑盒
Trizol是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便,顏色鮮明,便于分層。本試劑適用范圍較大,可以從動(dòng)物單位、 植物材料、 各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。 該方法對(duì)少量的單位(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的單位(≥1g)和細(xì)胞(>107)均有較好的分離效果。樣品在Trizol中被充分裂解的同時(shí)能夠比較大限度地保證RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液會(huì)分成三層:上層無色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相,RNA 分布在上清層中。收集上清層后,經(jīng)異丙醇沉淀便可以回收得到總RNA。提取的總RNA完整性好,無蛋白和DNA污染,可用于各種分子生物學(xué)常規(guī)實(shí)驗(yàn),如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern blot、Dot Blot、體外翻譯等。
Trizol 試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15 kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5 kb(28S)和~2 kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3 kb之間 (tRNA, 5S)。當(dāng)抽提的RNA用TE稀釋時(shí)其A260/A280比值≥1.8。(注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。)
血清的主要方式有哪種?重慶驢血清試劑
無血清快速細(xì)胞凍存液使用方法?浙江血清購買
t細(xì)胞增殖試驗(yàn)又稱T細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)。T細(xì)胞在體外經(jīng)某種物質(zhì)刺激,細(xì)胞代謝和形態(tài)相繼變化,在24~48h細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和核酸的合成增加,產(chǎn)生一系列增殖的變化,如細(xì)胞變化、細(xì)胞漿擴(kuò)大、出現(xiàn)空泡、核仁明顯、核染色質(zhì)疏松等,由淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣?xì)胞。因此,這種淋巴細(xì)胞增殖又叫淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化。據(jù)此可判斷出淋巴細(xì)胞對(duì)有關(guān)刺激的反應(yīng)性與功能狀態(tài)。  (1)非抗原性刺激物:如植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)、美洲商陸(PWM)、脂多糖(LPS),通稱促有絲分裂原。其中LPS刺激B細(xì)胞,PWM可刺激T和B細(xì)胞,PHA和ConA刺激T細(xì)胞增殖。  (2)抗原性刺激物:如結(jié)核菌素、葡萄球菌*、破傷風(fēng)類、鏈球菌激酶、抗原、同種異型抗原等。浙江血清購買
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