LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細胞系中(包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果相對于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉(zhuǎn)染細胞比率,超過其他RNAi試劑。連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理.上?;蜣D(zhuǎn)染試劑公司
圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進行血液化學(xué)分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2、24及48小時收集血液樣品,并通過臨床化學(xué)檢測方法對數(shù)個生物標(biāo)志物(Antech)進行評估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染上海質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑多少錢帶你了解性價比比較高的轉(zhuǎn)染試劑-PEI轉(zhuǎn)染.
原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代...
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標(biāo)準(zhǔn)實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。2細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑分裝
隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。上?;蜣D(zhuǎn)染試劑公司
細胞轉(zhuǎn)染實驗是生物醫(yī)學(xué)實驗室中**常規(guī)的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法:生物轉(zhuǎn)染,物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體,以慢***、腺***和腺相關(guān)***等**常見,其侵染效率可以達到90%以上,但常因安全性等問題,很多實驗室對其敬而遠之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,無論哪一種都需要特定的設(shè)備,且一分錢一分貨,性能好的價格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法,主要包括兩類:陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物。其基本原理是利用陽離子的化學(xué)分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。上?;蜣D(zhuǎn)染試劑公司
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