用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉(zhuǎn)染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。上海電轉(zhuǎn)染試劑配制
轉(zhuǎn)染48小時后,使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進行成像(左側(cè)四幅圖),A:LipoD293;B:293fectin;C:Xfect和D:Fugene6.帶有6xHis標記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進行Coomassie亮藍染色(右上圖E),道1為LipoD293293、道2為標準蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量(見右下圖F)。產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細胞。一個GFP載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1微升(上圖)和10微升(下圖)。懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑分裝轉(zhuǎn)染試劑--總有一款你想要的.
原代細胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。采用siRNA轉(zhuǎn)染試劑可以將siRNA輕松導(dǎo)入細胞內(nèi)。
簡介:X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結(jié)果相關(guān)性好.圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導(dǎo)致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡(luò)).將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;動物轉(zhuǎn)染試劑供應(yīng)商
3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。上海電轉(zhuǎn)染試劑配制
在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。上海電轉(zhuǎn)染試劑配制
上海儒安生物科技有限公司依托可靠的品質(zhì),旗下品牌上海儒安生物以高質(zhì)量的服務(wù)獲得廣大受眾的青睞。是具有一定實力的醫(yī)藥健康企業(yè)之一,主要提供細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體等領(lǐng)域內(nèi)的產(chǎn)品或服務(wù)。我們在發(fā)展業(yè)務(wù)的同時,進一步推動了品牌價值完善。隨著業(yè)務(wù)能力的增長,以及品牌價值的提升,也逐漸形成醫(yī)藥健康綜合一體化能力。上海儒安生物科技有限公司業(yè)務(wù)范圍涉及從事生物技術(shù)、物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開發(fā)、技術(shù)咨詢、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)服務(wù),軟件開發(fā),電子商務(wù)(不得從事增值電信、金融業(yè)務(wù)),化工產(chǎn)品及原料(除危險化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、民用物品、易制毒化學(xué)品)、實驗窒設(shè)備的銷售。等多個環(huán)節(jié),在國內(nèi)醫(yī)藥健康行業(yè)擁有綜合優(yōu)勢。在細胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內(nèi)參抗體等領(lǐng)域完成了眾多可靠項目。