確定希望輸送的運載物
(如DNA、RNA或蛋白質)
根據不同實驗類型,我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內轉染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉染產品的第一步。
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希望轉染的細胞類型
轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。
連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現可能無法必然地反映體內狀態(tài)。 轉染是將核酸導入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關鍵步驟。怎么配制轉染試劑怎么樣
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。湖北原代細胞轉染試劑原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.
siRNA,加入HiperFect轉染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細胞直到適當的時候檢測基因沉默效果。這個快速操作流程簡便到還可以用于“反向轉染”,方便至極。當然,習慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細胞匯合度50%—80%進行轉染就可以了。沒有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實驗簡化到了***。適合多種細胞類型:HiPerfect可高效轉染多種細胞類型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對于原代細胞,產品手冊中列出了轉染原代HUVEC、成纖維細胞、角質細胞、上皮細胞和平滑肌細胞的操作步驟,貼心
.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。
2.高靈活應用, 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗。
3.細胞毒性低,結果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導。
4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。
圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現均表現優(yōu)異。 MagTransf 磁轉染試劑實現高效轉染解析.
細胞轉染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉染試劑 簡介:
X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2 μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。
優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數據。
2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE 9 DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。
3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。廣東roche 轉染試劑
包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉染的細胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。怎么配制轉染試劑怎么樣
細胞轉染是指將外源基因如DNA,RNA等導入細胞內的技術。隨著分子生物學的發(fā)展,轉染已經成為研究和控制細胞基因功能、實現基因調控的常規(guī)工具。市場上各種轉染試劑琳瑯滿目,各有千秋,然而沒有任何一種轉染試劑可以能夠適用于所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的,成分控認為轉染試劑的成分及作用機理對轉染效果及細胞生理作用影響***,是轉染試劑選擇的重要依據,選試劑時要留意成分哦。嚴格來講,轉染的方法可以基于化學法、物理法(電穿孔、顯微注射等)以及***介導法,沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編,本次主要為大家介紹基于各類轉染試劑的化學法轉染。怎么配制轉染試劑怎么樣
上海儒安生物科技有限公司擁有從事生物技術、物聯網技術、網絡技術領域內的技術開發(fā)、技術咨詢、技術轉讓、技術服務,軟件開發(fā),電子商務(不得從事增值電信、金融業(yè)務),化工產品及原料(除危險化學品、監(jiān)控化學品、民用物品、易制毒化學品)、實驗窒設備的銷售。等多項業(yè)務,主營業(yè)務涵蓋細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內參抗體。一批專業(yè)的技術團隊,是實現企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎,是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。公司以誠信為本,業(yè)務領域涵蓋細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內參抗體,我們本著對客戶負責,對員工負責,更是對公司發(fā)展負責的態(tài)度,爭取做到讓每位客戶滿意。公司憑著雄厚的技術力量、飽滿的工作態(tài)度、扎實的工作作風、良好的職業(yè)道德,樹立了良好的細胞轉染試劑,ecl發(fā)光液,cck8細胞增殖,內參抗體形象,贏得了社會各界的信任和認可。