細胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國Polysciences家的PEIMAX40K！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強大，值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達40％左右。ThomasM，etal（2005）研究數(shù)據(jù)表明，去乙?；腜EI40000（PolyethylenimineMAX40000）體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍，小鼠體內(nèi)靶向效率達到10000倍，隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.polviet轉(zhuǎn)染試劑分裝
LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光，以此來評價轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合。轉(zhuǎn)染48小時后，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑配制連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理。
基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復合物，粘附到細胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長，且重復性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。此方法操作簡單，重復性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。
LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細胞系中（包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細胞類型）提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果相對于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑，LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10nM和1nMp53siRNA下，LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉(zhuǎn)染細胞比率，超過其他RNAi試劑。轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具.
產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑（升級版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個cDNAs共轉(zhuǎn)染進293T細胞。一個GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）。5天后，細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是8x10^6和3x10^6tu/ml。將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中，前后移動培養(yǎng)皿，混合均勻；上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑類型
用了這個轉(zhuǎn)染試劑,慢***再也不用怕轉(zhuǎn)不進去了!polviet轉(zhuǎn)染試劑分裝
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