基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉染試劑.Opti-MEM轉染試劑購買
用LipoD293?體外DNA轉染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉染pEGFP-C1質粒到HEK293細胞中。轉染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側)和熒光成像圖(右側)。對懸浮HEK293F產生蛋白質效率的比較/30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉染試劑按照生產商的標準轉染步驟將pEGFP-6xHis質粒導入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉染試劑均使用30微克質粒DNA。sirna轉染試劑原理在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。
用LipoFectMax?轉染Hela細胞,左圖轉染GFPcDNA,右圖共轉染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經細胞的轉染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白(GFP),轉染24小時后觀察轉染效果,LipoFectMax?轉染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉染試劑轉染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。細胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉染試劑 Nano293T.
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代。pei轉染試劑說明書主要內容是什么?上海貼壁細胞系轉染試劑分裝
并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。Opti-MEM轉染試劑購買
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉染的驗證,尤其針對難轉染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉染帶GFP標記的質粒,A和C是轉染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉染的細胞株進行轉染,X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~Opti-MEM轉染試劑購買
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