細(xì)胞冷存液若長(zhǎng)期保存,次日轉(zhuǎn)移到液氮中即可。 本產(chǎn)品是一款適用于貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞,干細(xì)胞的通用型細(xì)胞凍存液。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):1.化學(xué)成分明確,無(wú)任何外源蛋白和血清,適用于各類(lèi)動(dòng)物細(xì)胞株凍存。 2.無(wú)需程序降溫,細(xì)胞復(fù)蘇率90%以上。 3.凍存細(xì)胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。 4.即用型產(chǎn)品,4℃可穩(wěn)定保存。
細(xì)胞凍存:1.收集融合率>90%的對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于離心管中。2.1000 rmp離心5分鐘,去除離心管中的上清液,收集細(xì)胞沉淀。3.加入適量細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為1x106~1x107 cells/mL。 無(wú)血清細(xì)胞凍存液說(shuō)明書(shū).武漢怎么配制細(xì)胞凍存液4 保存
細(xì)胞凍存簡(jiǎn)介生物醫(yī)學(xué)科研實(shí)驗(yàn) 1、培養(yǎng)室實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備工作大致同細(xì)胞傳代培養(yǎng)的前6個(gè)步驟。簡(jiǎn)言之:用紫外消毒等消毒超凈工作臺(tái)面;清洗消毒手部;觀察細(xì)胞;預(yù)熱培養(yǎng)用液;點(diǎn)燃酒精燈;取出巴斯德吸管、刻度吸管等插在無(wú)菌試管內(nèi)。
凍存液的配置方法:按如下比例配置:10%甘油+90%培養(yǎng)基,或者10%DMSO+90%培養(yǎng)基。用于配制凍存液的培養(yǎng)基中小牛血清濃度適量提高至20%或更高。所用的甘油需事先高壓滅菌,如使用DMSO,則不需要任何滅菌措施。
無(wú)血清細(xì)胞凍存液怎么樣復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化.
希望本期的分享能夠?yàn)槟募?xì)胞培養(yǎng)過(guò)程提供凍存方面的幫助,同時(shí)我公司也能為您提供凍存液等凍存相關(guān)產(chǎn)品,與成熟的實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo),非常感謝您的支持!
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:品牌貨號(hào)產(chǎn)品描述包裝OriGenCP-70USP級(jí) **DMSO二甲基亞砜,CE、USP、EP認(rèn)證70mL/瓶, 6瓶/盒OriGenCP-10USP級(jí) **DMSO二甲基亞砜10mL/瓶, 12瓶/盒OriGenCD-100DMSO/Dextran/remainder water
55%二甲基亞砜,5%右旋糖酐40混合液,CE、USP、EP認(rèn)證100mL/瓶,6瓶/盒OriGenCD-50DMSO/Dextran/remainder water
3、步驟:? (1)冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。? (2)配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。? (3)離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。? (4)取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO***濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106 cells/ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示完全之冷凍保存管中,1~2ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱(chēng)、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。細(xì)胞凍存一定要沒(méi)過(guò)液氮嗎?
凍存/解凍標(biāo)準(zhǔn)流程TBD598、TBD698可以按照下列步驟操作,TBD798需要先使用自體血漿配制然后凍存。建議凍存細(xì)胞密度為1×106-107個(gè)/ml一.凍存1.在室溫以300xg離心5分鐘。2.輕輕吸走上清液,注意不要擾動(dòng)細(xì)胞團(tuán)。3.用血清學(xué)吸管以1mL的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞,打散細(xì)胞團(tuán)時(shí)。4.用2mL的血清學(xué)吸管將1mL的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到標(biāo)記好的凍存管中。5.用以下方法凍存細(xì)胞:推薦使用緩速降溫方法,每分鐘降低1度,隨后可以在-196°C液氮長(zhǎng)期保存。不推薦在-80°C長(zhǎng)期保存。逐步降溫法:-20°C保存2個(gè)小時(shí),然后-80°C中保存2個(gè)小時(shí),隨后可以在-196°C液氮中長(zhǎng)期保存。細(xì)胞凍存液一般有兩種配置方法是什么?杭州加完細(xì)胞凍存液怎么樣
無(wú)血清快速細(xì)胞凍存液,減少各類(lèi)霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全.武漢怎么配制細(xì)胞凍存液4 保存
用以下方法凍存細(xì)胞:
4℃放置15-30分鐘
(一定不能省略該步驟,否則凍存液無(wú)法完全滲透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞起保護(hù)作用)
① 緩速降溫方法(以使用需異丙醇的Nalgene程序降溫盒為例,冷凍細(xì)胞的過(guò)程中可以輔助實(shí)現(xiàn)緩慢降溫,以達(dá)到近似于1℃/分鐘):-80℃過(guò)夜→液氮長(zhǎng)期保存。
(不推薦在-80℃長(zhǎng)期保存;異丙醇易揮發(fā),并且容易吸收空氣中的水分,建議使用5次后更換)
② 逐步降溫法:-20℃保存2小時(shí),然后-80℃中保存2小時(shí),隨后可以在-196℃液氮中長(zhǎng)期保存。 武漢怎么配制細(xì)胞凍存液4 保存
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